Recombinant Cynomolgus SPARC Protein

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-06-05

Endo H糖苷內(nèi)切酶H:結(jié)構(gòu)、功能及其在糖生物學(xué)中的應(yīng)用摘要Endo H糖苷內(nèi)切酶H(Endo H)是一種專(zhuān)門(mén)作用于糖鏈的內(nèi)切酶,對(duì)研究蛋白質(zhì)糖基化修飾具有重要意義。本文將探討Endo H的結(jié)構(gòu)特性、催化機(jī)制以及在糖生物學(xué)研究中的應(yīng)用。引言蛋白質(zhì)糖基化是一種普遍存在的翻譯后修飾,對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、穩(wěn)定性和功能發(fā)揮著關(guān)鍵作用。Endo H是一種能夠特異性識(shí)別并切割高甘露糖型N-連接糖鏈的內(nèi)切酶,廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)糖基化分析。Endo H的結(jié)構(gòu)特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量約為130 kDa。該酶具有一個(gè)催化中心,能夠識(shí)別并切割特定的糖苷鍵。Endo H的三維結(jié)構(gòu)尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些關(guān)鍵催化殘基已被確定。催化機(jī)制Endo H通過(guò)水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)與N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之間的β-1,4糖苷鍵,從而釋放高甘露糖型N-連接糖鏈。該過(guò)程不涉及輔因子,表明Endo H催化機(jī)制可能依賴于其活性位點(diǎn)的氨基酸殘基。全長(zhǎng)A2aR蛋白具有天然完整構(gòu)象,VLP(病毒樣顆粒)固有特征可以帶來(lái)更高的免疫原性。Recombinant Cynomolgus SPARC Protein,His Tag

Recombinant Cynomolgus SPARC Protein,His Tag,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

3C蛋白酶(3C Protease),也稱(chēng)為3Cpro或3C樣蛋白酶(3CLpro),是一類(lèi)在RNA病毒復(fù)制中發(fā)揮關(guān)鍵作用的酶。它們負(fù)責(zé)切割病毒的多聚蛋白前體,從而釋放出成熟的病毒蛋白,這些蛋白對(duì)于病毒的復(fù)制和組裝至關(guān)重要。3C蛋白酶在多種病毒中都有發(fā)現(xiàn),包括冠狀病毒、小RNA病毒等。結(jié)構(gòu)與功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位點(diǎn),能夠識(shí)別并切割特定的氨基酸序列。例如,小RNA病毒科的3C蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)為L(zhǎng)eu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,切割位點(diǎn)位于谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)之間,稱(chēng)為Q-G位點(diǎn)4。抗病毒藥物開(kāi)發(fā)3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的關(guān)鍵作用,成為抗病毒藥物開(kāi)發(fā)的重要靶點(diǎn)。通過(guò)抑制3C蛋白酶的活性,可以有效阻斷病毒的復(fù)制過(guò)程。例如,SARS-CoV-2(病毒)的3CLpro是抗冠狀病毒藥物的重要靶點(diǎn),西湖大學(xué)胡奇團(tuán)隊(duì)等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潛在耐藥機(jī)制,為解決潛在的耐藥問(wèn)題提供了重要信息3。耐藥性研究隨著3CLpro抑制劑的使用,其耐藥問(wèn)題也日益受到關(guān)注。研究表明,3CLpro的某些突變可能導(dǎo)致病毒對(duì)抑制劑產(chǎn)生耐藥性。Nuclear Localiation Signal PeptideC5a通過(guò)與髓源性抑制細(xì)胞 (MDSCs) 膜上的受體C5aR1結(jié)合,招募MDSCs至炎癥局部,抑制CD8+ T細(xì)胞增殖與功能。

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3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非結(jié)構(gòu)蛋白的關(guān)鍵酶,在病毒復(fù)制過(guò)程中發(fā)揮著重要作用。鼻病毒屬于小RNA病毒科,其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因編碼區(qū)全長(zhǎng)552bp,編碼的蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量約為22000Da。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特異性,能特異切割位于Gln-Gly之間的肽鍵,識(shí)別位點(diǎn)為L(zhǎng)eu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。本公司將人鼻病毒3C蛋白酶的編碼區(qū)基因,在大腸桿菌中進(jìn)行重組表達(dá),純化后獲得了高純度的重組3C蛋白酶,該蛋白酶能特異切割含有3C酶切位點(diǎn)的融合蛋白,具有良好的生物學(xué)活性。同時(shí),本公司生產(chǎn)的3C蛋白酶帶有GST和MAT標(biāo)簽蛋白,有利于后期將其從酶切體系中去除。產(chǎn)品性質(zhì):中文別名(Chinesesynonym):3C蛋白酶英文別名(Englishsynonym):3CProtease來(lái)源(Source):大腸桿菌表達(dá)標(biāo)簽(label):GST-3CProtease-MAT純度(Purity):經(jīng)SDS-PAGE及HPLC分析,純度>95%分子量(Molecularweight):47.38kDa比活性(Specificactivity):500U/ml緩沖液組分(Buffer):50mMTris-HCl,150mMNaCl,1mMEDTA,1mMDTT,pH7.0酶活定義(UnitDefinition):在緩沖液中切割100μg被檢測(cè)的融合蛋白,反應(yīng)條件為4℃16小時(shí),切割率≥90%運(yùn)輸和保存方法:干冰運(yùn)輸;保存于-20℃。

RecombinantBiotinylatedHumanHBV(HLA-A*02:01)Protein,His-AviTag性能參數(shù)表達(dá)區(qū)間及表達(dá)系統(tǒng)(Source)RecombinantBiotinylatedHumanHBV(HLA-A*02:01)ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminalItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:01),Ile21-Met119(B2M)andFLLTRILTIpeptide.[Accession|A0A140T913(HLA-A*02:01)&P61769(B2M)&FLLTRILTIpeptide]分子量大?。∕olecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto52-62kDabasedonTris-BisPAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.純度(Purity)>95%asdeterminedby>95%asdeterminedbyHPLC制劑(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重構(gòu)方法(Reconstitution)Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.α-凝血酶是研究血液凝固機(jī)制和血栓性疾病發(fā)展的主要靶點(diǎn)。重組α-凝血酶用于體外測(cè)定。

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透明質(zhì)酸酶,英文名稱(chēng)Hyaluronidase,一類(lèi)能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸活性的酶的總稱(chēng),結(jié)構(gòu)上由4個(gè)相同亞基構(gòu)成,每個(gè)亞基分子量接近14kDa,該酶是一種糖蛋白,包含5%的甘露糖和2.2%的葡萄糖胺。功能上該酶可隨機(jī)裂解透明質(zhì)酸、軟骨素和硫酸軟骨素中的β-N-乙酰己糖胺-[1→4]糖苷鍵。常與膠原酶聯(lián)合使用于降解細(xì)胞外基質(zhì),從而從組織中分離活細(xì)胞。本品來(lái)源于牛睪丸,活力值為400–1,000units/mg,合適的pH值為4.5–6.0。產(chǎn)品性質(zhì)中文別名(ChineseSynonym)玻璃糖醛酸酶;玻璃酸酶英文別名(EnglishSynonym)Hyaluronoglucosaminidase;Hyaluronate4-glycanohydrolaseCAS號(hào)(CASNO.)37326-33-3來(lái)源(Source)牛睪丸分子量(MolecularWeight)~55kDa類(lèi)型(Type)I-S外觀(Appearance)淡黃色至米黃色至褐色粉末常用的跨膜蛋白表達(dá)系統(tǒng)包括大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)、酵母表達(dá)系統(tǒng)、昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)等。Recombinant Mouse CD83 Protein,hFc Tag

在蛋白質(zhì)工程中,PNGase F可以用于改變蛋白質(zhì)的糖基化模式,以研究糖基化對(duì)蛋白質(zhì)功能的影響。Recombinant Cynomolgus SPARC Protein,His Tag

膠原蛋白是哺乳動(dòng)物體內(nèi)含量多的功能性蛋白[1]。膠原蛋白由3條α鏈的多肽鏈亞基組成,α鏈自身構(gòu)型為左手螺旋,三條α鏈又互相纏繞成右手螺旋結(jié)構(gòu),即膠原蛋白的“膠原域”[2]。膠原蛋白的一級(jí)結(jié)構(gòu)分析結(jié)果顯示,其肽鏈由(Gly-X-Y)n組成,其中X通常是脯氨酸,Y通常是羥脯氨酸[3]。按照膠原蛋白發(fā)現(xiàn)的先后順序,可將其分為Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型等28種膠原蛋白[4],Ⅰ型膠原蛋白分子組成為[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ),主要分布于骨骼中[5];Ⅱ型膠原蛋白由[α1(Ⅱ)]3組成,主要由軟骨細(xì)胞產(chǎn)生,因其含有大量賴氨酸殘基,因而糖基化率較高[6];Ⅲ型膠原蛋白分子組成為[α1(Ⅲ)]3,因含半胱氨酸所以肽鏈間形成二硫鍵,因此其本身就可形成細(xì)纖維,Ⅲ型膠原蛋白血管中含量較高,主要存在于肺泡間質(zhì)中且分布雜亂,因而形成復(fù)雜的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),正是這種結(jié)構(gòu)使得肺組織具有良好的柔韌性與彈性,并且可以為細(xì)胞提供充足養(yǎng)分,使得皮膚飽滿透亮[7]。Recombinant Cynomolgus SPARC Protein,His Tag