薄膜微流控PCR熒光檢測

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）的作用下，由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng)，三個不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi)，以一對人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物，第一步，模板DNA變性，以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物，目的基因作為模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性，使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步，模板DNA與引物退火（復(fù)性），模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃，引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個步驟為一個循環(huán)，2-4分鐘即可完成一個循環(huán)，2-3小時就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍，從而實(shí)現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制，因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。巧亦捷采用的薄膜微流控技術(shù)與核酸檢測技術(shù)相結(jié)合，特別適用于基因表達(dá)和病原體檢測等領(lǐng)域。薄膜微流控PCR熒光檢測

目前市面上有很多PCR儀器，一時間讓獸醫(yī)師無從選擇，但大多數(shù)都是PCR擴(kuò)增儀，即需要人工進(jìn)行核酸提取和純化。他們都有以下痛點(diǎn)：1、核酸提取和純化的操作麻煩并且需要專業(yè)的技術(shù)人員和場地，有些還需要配置高速離心機(jī)，人工核酸提取需要30~40分鐘并容易導(dǎo)致污染。2、人工反復(fù)開蓋加入或倒出試劑，容易導(dǎo)致人為和氣溶膠污染，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。因此針對寵物醫(yī)院來說，需要一臺集核酸提取、純化和擴(kuò)增為一體的全自動核酸檢測儀。能更好的控制人工成本及試劑成本。蘇州寵物PCR儀器生產(chǎn)企業(yè)巧亦捷核酸檢測解決方案包括全自動便攜式核酸檢測一體機(jī)、免核酸提取檢測試劑盒。

巧亦捷核酸一體機(jī)采用的探針法熒光PCR與常規(guī)PCR的不同之處在于：在上、下游引物外還加入了具有序列特異性的探針（探針本身具有熒光標(biāo)記），該探針根據(jù)需要擴(kuò)增的靶序列設(shè)計因此只能與待檢測序列結(jié)合，與染料法相比提高了實(shí)驗(yàn)的特異性。目前市場上的探針主要種類有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探針應(yīng)用寬泛。TaqMan探針的結(jié)構(gòu)：長度與普通PCR引物類似，大約20bp左右。在5’與3’端各標(biāo)記有一個熒光基團(tuán)，5’的熒光基團(tuán)稱為報告基團(tuán)（Report），3’的熒光基團(tuán)稱為淬滅基團(tuán)（Quencher）。TaqMan探針的性能：在探針結(jié)構(gòu)完整的情況下用特定的波長激發(fā)報告基團(tuán)，由于報告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)的空間位置很近，因此報告基團(tuán)能夠通過FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）將接受的能量轉(zhuǎn)移到淬滅基團(tuán)，使后者以發(fā)射熒光或熱量的方式釋放能量，而報告基團(tuán)并不發(fā)射特定波長的熒光信號。

當(dāng)犬貓的一些疾病處于潛伏期時，該階段動物體內(nèi)的病原體含量過低。而目前市場上的一些檢測工具主要檢測寵物體內(nèi)是否產(chǎn)生對抗某種病原的抗體，雖然快速，但在初期傳染時，寵物免疫系統(tǒng)尚未產(chǎn)生抗體，所以檢測出現(xiàn)偽陰性，進(jìn)而延誤診療。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一體機(jī)則可以很好的解決這一問題，即便處于疾病潛伏期，巧亦捷核酸一體機(jī)也可以得到準(zhǔn)確的檢測結(jié)果，做到早期診斷，實(shí)現(xiàn)及時診療，減少患病動物痛苦，獲得更好的療效。預(yù)后評估，監(jiān)控診療效果。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)的靈敏性和特異性上的優(yōu)勢，像犬貓的呼吸道、消化道和貧血等疾病的診斷和鑒別診斷。

巧亦捷（ingeNova）是翊新診斷技術(shù)（蘇州）有限公司旗下專注于動物體外診斷檢測的產(chǎn)品品牌，以翊新診斷全資子公司——蘇州翊創(chuàng)生物科技有限公司為主體。巧亦捷系列產(chǎn)品覆蓋了貓呼吸道疫病檢測、貓消化道疫病檢測、犬消化道疫病檢測、寄生蟲等寵物核酸檢測，非洲豬瘟、藍(lán)耳等豬病核酸檢測，牛逼支、牛腹瀉等牛羊類食品動物的核酸檢測，人畜共患病核酸檢測，以及魚蝦等水生動物的核酸檢測。全自動薄膜微流控核酸檢測一體機(jī)是巧亦捷系列產(chǎn)品的主打檢測平臺，巧亦捷基于此平臺技術(shù)致力于為客戶提供快速、精確的動物疫病診斷整體解決方案。翊新診斷技術(shù)（蘇州）有限公司由微流控技術(shù)領(lǐng)域國際**周朋博士創(chuàng)立。公司依托先進(jìn)的薄膜微流控技術(shù)開發(fā)一體化、智能化的快速、便捷的POCT體外分子診斷解決方案。針對動物疫病的早期診斷，公司以市場需求為出發(fā)點(diǎn)，開發(fā)出了低成本、無污染、能夠?qū)崿F(xiàn)真正意義上“全自動，全封閉，樣本進(jìn)，結(jié)果出”的薄膜微流控芯片技術(shù)和可以用于動物疫病現(xiàn)場快速診斷的分子檢測系統(tǒng)，從而為動物疫病的現(xiàn)場診斷提供更加便利的檢測手段。目前已開發(fā)非洲豬瘟檢測、寵物呼吸道多聯(lián)檢測、寵物消化道多聯(lián)檢測等多種試劑及檢測方案?？朔渌麢z測方法的缺點(diǎn)與目前臨床上已有的大部分病原檢測方法相比，巧亦捷核酸檢測一體機(jī)都有其獨(dú)特優(yōu)勢。蘇州寵物PCR儀器生產(chǎn)企業(yè)

PCR是可以做到病原體準(zhǔn)確診斷的技術(shù)，與膠體金試紙及熒光定量試紙的應(yīng)用場景相同。薄膜微流控PCR熒光檢測

大多數(shù)寵物醫(yī)院運(yùn)用的診斷方法為：PCR和試紙條。其區(qū)別是：試紙條原理是基于抗體抗原的免疫學(xué)方法，通過顏色或熒光標(biāo)記來判讀，和PCR檢測是基于不同方法學(xué)的檢測方式。PCR通過檢測樣本中有無病毒DNA（RNA）來確診，靈敏度高、特異性強(qiáng)、支持檢測項目多，是人醫(yī)醫(yī)學(xué)界公認(rèn)的診斷金標(biāo)準(zhǔn)，兩者區(qū)別可以理解為滴血認(rèn)親（免疫學(xué)方法）與親子鑒定（分子診斷）的區(qū)別。目前專業(yè)的的寵物疾病機(jī)構(gòu)就是使用PCR檢測。巧亦捷核酸檢測一體機(jī)采用國際**的薄膜微流控技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了從核酸提取、PCR擴(kuò)增、熒光檢測全流程自動化芯片內(nèi)完成，可以實(shí)現(xiàn)專業(yè)實(shí)驗(yàn)室級別的核酸檢測，且檢測時間短，全程無需專業(yè)技術(shù)人員參與，可實(shí)現(xiàn)基于病癥的多項目聯(lián)檢，更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站、養(yǎng)殖場等現(xiàn)場快檢應(yīng)用場景。薄膜微流控PCR熒光檢測