江蘇分子檢測PCR熒光探針法

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（熱穩(wěn)定DNA聚合酶）的作用下，由一對特異性引物經(jīng)熱變性-退火-延伸反應(yīng)，三個(gè)不同溫度的循環(huán)處理使得DNA由少量擴(kuò)增到多量的一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù)。在反應(yīng)體系內(nèi)，以一對人工合成的寡核苷酸作為擴(kuò)增引物，第一步，模板DNA變性，以構(gòu)成脫氧核糖核酸的四種脫氧核苷酸為底物，目的基因作為模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA經(jīng)過80-90℃高溫變性，使模板DNA雙鏈經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈解離成單鏈。第二步，模板DNA與引物退火（復(fù)性），模板DNA解離成單鏈后溫度降至50-60℃，引物與模板DNA單鏈互補(bǔ)配對。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物結(jié)合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP為反應(yīng)原料半保留復(fù)制合成一條新的模板DNA鏈。這三個(gè)步驟為一個(gè)循環(huán)，2-4分鐘即可完成一個(gè)循環(huán)，2-3小時(shí)就能使極微量的DNA、片段、甚至單拷貝基因復(fù)制到幾百萬倍，從而實(shí)現(xiàn)對靶DNA的放大。由于擴(kuò)增堿基序列按照靶DNA復(fù)制，因此PCR反應(yīng)具有高度特異性。傳染性疾病在寵物中比較常見，由多種病原體如寄生蟲，細(xì)菌，病毒等引起，且多具有傳染性，死亡率也較高。江蘇分子檢測PCR熒光探針法

目前市面上有很多PCR儀器，一時(shí)間讓獸醫(yī)師無從選擇，但大多數(shù)都是PCR擴(kuò)增儀，即需要人工進(jìn)行核酸提取和純化。他們都有以下痛點(diǎn)：1、核酸提取和純化的操作麻煩并且需要專業(yè)的技術(shù)人員和場地，有些還需要配置高速離心機(jī)，人工核酸提取需要30~40分鐘并容易導(dǎo)致污染。2、人工反復(fù)開蓋加入或倒出試劑，容易導(dǎo)致人為和氣溶膠污染，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。因此針對寵物醫(yī)院來說，需要一臺集核酸提取、純化和擴(kuò)增為一體的全自動核酸檢測儀。能更好的控制人工成本及試劑成本。巧亦捷PCR擴(kuò)增巧亦捷采用的薄膜微流控技術(shù)與核酸檢測技術(shù)相結(jié)合，特別適用于基因表達(dá)和病原體檢測等領(lǐng)域。

在寵物醫(yī)療中，目前病毒檢測主要包括膠體金檢測（試紙）和PCR檢測。兩者的區(qū)別：膠體金是針對病毒蛋白質(zhì)的檢測，PCR檢測是針對病毒核酸的檢測。病毒蛋白質(zhì)和病毒核酸對于病毒來說都是獨(dú)特的，因此它們都可以確定病毒的身份。但目前醫(yī)學(xué)上無法進(jìn)行病毒蛋白質(zhì)的擴(kuò)增，因此當(dāng)樣本中病毒量少的情況下，就有可能無法找到病毒；而PCR病毒核酸檢測的關(guān)鍵就在于可以將核酸進(jìn)行不斷地復(fù)制和擴(kuò)增，所以PCR檢測的靈敏度就更高，更容易在樣本病毒量相對少的情況下更早地確認(rèn)病毒。假設(shè)一個(gè)樣本病毒量在10萬以上，膠體金技術(shù)和PCR技術(shù)可以同時(shí)檢測確診陽性；但如果樣本病毒量低于10萬，則只能依靠PCR技術(shù)。

傳統(tǒng)PCR檢測系統(tǒng)常見的痛點(diǎn)：“一是“繁”，即操作繁瑣，需要手動進(jìn)行核損提取、純化；二是“?！保葱枰獙I(yè)操作人員和**的操作臺，耗費(fèi)人力、物力；三是“污”，即因PCR系統(tǒng)靈敏性和特異性高，人員操作，容易污染，導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)。四是“半”，即市面上幾乎所有的PCR儀都是半自動?！庇谑敲闇?zhǔn)這一痛點(diǎn)，巧亦捷快速核酸檢測一體機(jī)正式面世。相較于傳統(tǒng)PCR檢測系統(tǒng)，我們擁有三大特色：一是全自動：自動完成繁瑣的核酸提取+PCR擴(kuò)增，全自動核酸提取，手工操作時(shí)間少于1分鐘，至少節(jié)省一個(gè)專業(yè)操作人員。二是全封閉：避免人為干擾，消除人和實(shí)驗(yàn)室的污染，降低對實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的高要求。三是可檢測：貓皰疹病毒、貓杯狀病毒、貓冠狀病毒、貓瘟熱病毒、犬瘟熱病毒、犬細(xì)小病毒等多種病原體。巧亦捷是翊新診斷全力打造的、服務(wù)于動物體外診斷的產(chǎn)品品牌。

PCR(PolymeraseChainReaction)是一種復(fù)制核酸片段并提高DNA產(chǎn)量的技術(shù)，即所謂的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，這種技術(shù)可以在數(shù)小時(shí)內(nèi)大量復(fù)制特定的基因片段。由于其高敏感性和高特異性的特點(diǎn)，PCR技術(shù)被應(yīng)用在寵物疾病分子的診斷上，將從疑似患病寵物（血液、眼鼻分泌物、糞便，尿液或腹水）中采樣的極微量病原(細(xì)菌、病毒或寄生蟲)特定核酸片段樣本，透過PCR的方式大量被復(fù)制，再以核酸電泳的方式判讀結(jié)果，從而獲得早期、快速、穩(wěn)定和準(zhǔn)確的診斷結(jié)果.在準(zhǔn)確的前提下，高效顯得尤為重要。江蘇分子檢測PCR熒光探針法

巧亦捷核酸檢測一體機(jī)操作非常簡單，只需要放入樣本就可以了，不需要手工進(jìn)行核酸提取，也避免了樣本污染。江蘇分子檢測PCR熒光探針法

巧亦捷全自動薄膜微流控核酸檢測儀器擁有多種重技術(shù)，保障結(jié)果準(zhǔn)確：其采用Taqman熒光探針和經(jīng)典PCR擴(kuò)增技術(shù)，能夠?qū)⑸飿?biāo)志物精確定量，同時(shí)輸出Ct值和擴(kuò)增曲線，結(jié)果判讀簡潔明了；質(zhì)控更全1面，結(jié)果更可靠，設(shè)備體積小巧，便于搬運(yùn)和攜帶，可在多種場景下隨心使用，且薄膜微流控芯片為封閉系統(tǒng)操作，可很大程度避免人為和環(huán)境的污染，降低對檢測環(huán)境的要求，以及對檢測人員的要求。更適合寵物醫(yī)院、獸醫(yī)站、養(yǎng)殖場等多種使用場景。江蘇分子檢測PCR熒光探針法