薄膜微流控PCR熒光探針法

來源: 發(fā)布時間:2024-06-09

巧亦捷核酸檢測一體機的特異性及靈敏度可達(dá)99%以上,使用的PCR熒光探針技術(shù)不但可以檢測出病毒的種類,更可以檢測出樣品里100個/ul數(shù)量級的病毒數(shù)量,可謂特異性極強,準(zhǔn)確度極高!若檢測出有病毒,但沒有發(fā)病也要引起重視,因為檢測的病毒是一些對動物機體傷害極大的病毒,或者是人畜共患病,雖然現(xiàn)在沒有發(fā)病,并不表明以后不會發(fā)病,如果任其在體內(nèi)發(fā)展,等到病毒繁殖到一定的數(shù)量后,或者機體的抵抗力突然下降,也許就會發(fā)生災(zāi)難性的爆發(fā),對動物造成極大的傷害。巧亦捷全自動核酸一體機無需專業(yè)檢測人員,儀器上樣簡便,軟件操作易于掌握。薄膜微流控PCR熒光探針法

薄膜微流控PCR熒光探針法,PCR

巧亦捷核酸一體機采用的探針法熒光PCR與常規(guī)PCR的不同之處在于:在上、下游引物外還加入了具有序列特異性的探針(探針本身具有熒光標(biāo)記),該探針根據(jù)需要擴增的靶序列設(shè)計因此只能與待檢測序列結(jié)合,與染料法相比提高了實驗的特異性。目前市場上的探針主要種類有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探針應(yīng)用寬泛。TaqMan探針的結(jié)構(gòu):長度與普通PCR引物類似,大約20bp左右。在5’與3’端各標(biāo)記有一個熒光基團(tuán),5’的熒光基團(tuán)稱為報告基團(tuán)(Report),3’的熒光基團(tuán)稱為淬滅基團(tuán)(Quencher)。TaqMan探針的性能:在探針結(jié)構(gòu)完整的情況下用特定的波長激發(fā)報告基團(tuán),由于報告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)的空間位置很近,因此報告基團(tuán)能夠通過FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)將接受的能量轉(zhuǎn)移到淬滅基團(tuán),使后者以發(fā)射熒光或熱量的方式釋放能量,而報告基團(tuán)并不發(fā)射特定波長的熒光信號。熒光PCR試劑巧亦捷薄膜微流控全自動核酸檢測平臺將成為我們保護(hù)毛孩健康的重要利器。

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    如犬瘟熱、貓瘟、細(xì)小、貓杯狀病毒等,能夠快速準(zhǔn)確地確定病原體的存在。遺傳性疾病篩查:PCR可以用于檢測寵物遺傳性疾病的基因突變,如遺傳性眼疾、遺傳性肌肉疾病等,幫助寵物主人了解寵物的遺傳疾病風(fēng)險。免疫性疾病診斷:PCR可用于檢測寵物免疫性疾病相關(guān)的免疫標(biāo)記物或基因表達(dá)水平的變化,幫助診斷和診療免疫相關(guān)疾病。何時考慮進(jìn)行PCR檢查在以下情況下,應(yīng)考慮進(jìn)行PCR檢查:寵物出現(xiàn)不明原因的癥狀:當(dāng)寵物出現(xiàn)不明原因的發(fā)熱、嘔吐、腹瀉、咳嗽等癥狀時,應(yīng)考慮進(jìn)行PCR檢查以排除感*性疾病。如可以使用巧亦捷犬/貓消化道五聯(lián)檢、呼吸道五聯(lián)檢、貧血五聯(lián)檢等試劑,可快速篩查致病因。遺傳性疾病篩查:對于某些易患遺傳性疾病的品種,如柯基、金毛等,可以考慮在寵物出生后進(jìn)行遺傳性疾病的基因篩查。免疫性疾病診斷:當(dāng)寵物出現(xiàn)免疫相關(guān)的疾病癥狀,如食欲不振、關(guān)節(jié)腫脹等時,可考慮進(jìn)行PCR檢查以輔助診斷。綜上所述,PCR檢查作為一種高效、準(zhǔn)確的分子生物學(xué)技術(shù),在寵物醫(yī)療診斷中發(fā)揮著重要作用。在適當(dāng)?shù)那闆r下,及時進(jìn)行PCR檢查可以幫助寵物主人更好地了解寵物的健康狀況,并及時采取相應(yīng)的診療和預(yù)防措施,保障寵物的健康和幸福。

在寵物醫(yī)療中,目前病毒檢測主要包括膠體金檢測(試紙)和PCR檢測。兩者的區(qū)別:膠體金是針對病毒蛋白質(zhì)的檢測,PCR檢測是針對病毒核酸的檢測。病毒蛋白質(zhì)和病毒核酸對于病毒來說都是獨特的,因此它們都可以確定病毒的身份。但目前醫(yī)學(xué)上無法進(jìn)行病毒蛋白質(zhì)的擴增,因此當(dāng)樣本中病毒量少的情況下,就有可能無法找到病毒;而PCR病毒核酸檢測的關(guān)鍵就在于可以將核酸進(jìn)行不斷地復(fù)制和擴增,所以PCR檢測的靈敏度就更高,更容易在樣本病毒量相對少的情況下更早地確認(rèn)病毒。假設(shè)一個樣本病毒量在10萬以上,膠體金技術(shù)和PCR技術(shù)可以同時檢測確診陽性;但如果樣本病毒量低于10萬,則只能依靠PCR技術(shù)。傳染病診斷也類似于刑偵,就是在患者的樣本中查找引起癥狀的元兇——病原微生物。

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近年來,人們養(yǎng)寵的需求正在持續(xù)被釋放,對醫(yī)療的需求將大幅增加。在這一過程中,傳統(tǒng)的疫苗、驅(qū)蟲等基礎(chǔ)保健服務(wù)逐漸無法滿足寵物主對寵物健康的更高層面需求,因此專業(yè)化、多維度的寵物醫(yī)療服務(wù)成為行業(yè)發(fā)展的大勢所趨。其中寵物體外診斷作為寵物醫(yī)療的關(guān)鍵環(huán)節(jié),發(fā)展?jié)摿o限。目前的寵物檢驗多集中于血常規(guī)、生化以及傳染性疾病的檢測。前兩者屬于常規(guī)檢測,后者則是因為寵物已經(jīng)出現(xiàn)了疾病表現(xiàn)而進(jìn)行臨床準(zhǔn)確檢測。核酸檢測主要是對于病毒核酸的檢測,由于自身技術(shù)的優(yōu)勢性,核酸檢測沒有窗口期,具備特異性高、靈敏度高的特點。其臨床符合率超95%,而膠體金檢測ZUI多只能達(dá)到70%,故而核酸檢測是目前寵物疾病診斷的金標(biāo)準(zhǔn),在臨床中特別適用于對于剛剛購買的愛寵或者接觸過傳染病患寵的傳染病排查。傳染病是由某些具有致病性的微生物,如細(xì)菌、病毒等引起的,能夠在某種動物或多種動物之間傳播的一些疾病。薄膜微流控PCR熒光探針法

無論是由病毒、細(xì)菌,還是原蟲、寄生蟲等引起的犬貓傳染性疾病都可利用巧亦捷核酸一體機進(jìn)行診斷。薄膜微流控PCR熒光探針法

目前,市面上的寵物用分子檢測平臺普遍存在操作復(fù)雜,單價偏高,靈敏度不佳等問題,巧亦捷依托于自主研發(fā)的薄膜微流控技術(shù),經(jīng)多年沉淀,研發(fā)出全自動快速核酸檢測一體機及多種配套檢測試劑,儀器自動進(jìn)行核酸提取和PCR擴增,讓使用者將樣本加入薄膜囊袋中就可上機進(jìn)行核酸檢測,且支持多重聯(lián)檢功能,一次可檢測多種病原體。多重寵物檢測試劑除了可解決操作的復(fù)雜性問題,也由于采用常規(guī)的多重PCR策略,可大幅降低檢測試劑的費用。薄膜微流控PCR熒光探針法