MSCs培養(yǎng)血小板裂解液過濾

來源: 發(fā)布時間:2021-10-18

MSCs在添加10% 血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天,隨后使用MTT法評估增殖。脂肪組織源性間充質(zhì)干細胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質(zhì)干細胞(BM-MSC)培養(yǎng)的過程中,如果使用的UFH濃度低于0.61 IU/mL或者使用Enoxaparin(LMWH)濃度低于0.024 mg/mL (2.4 IU/mL) 時培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)(灰色背景),而肝素濃度過高則對細胞增殖的負面影響明顯且以劑量依賴的方式提高。備注肝素濃度單位換算:肝素濃度國際單位(IU)衡量,1IU國際單位是指在規(guī)定的條件下,將1ml全血延長凝血3分鐘所需的量:1mg大約相當(dāng)于100IU的肝素。人源血小板裂解液除了擁有比富血小板血漿更高的生長因子濃度。MSCs培養(yǎng)血小板裂解液過濾

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胎牛血清(FBS)對動物和人的間充質(zhì)干細胞(MSCs)的大規(guī)模擴增以及細胞zhi liao的快速發(fā)展起著重要作用,但它也帶來了一些監(jiān)管和物種交叉污染等問題,并阻礙了大多數(shù)產(chǎn)品往臨床的過渡。無血清培養(yǎng)基(SFM)補充幾種生長因子也被提出作為胎牛血清綜合征的替代方法,然而通常SFM需要根據(jù)細胞類型、來源和種類開發(fā)定制,費時費力。此外,SFM的高成本使其無法用于大規(guī)模細胞擴增。因此,迫切需要找到一種基于人源的培養(yǎng)基補充劑。人源血小板裂解液(HPL)來自人血小板,含有類似的生長因子和細胞因子,且與在胎牛血清中發(fā)現(xiàn)的水平相當(dāng)。目前已經(jīng)證明HPL支持各種細胞的生長。本研究的重點是評估不需要使用肝素(PL-NH)的HPL和需要肝素(PL-H)的標準HPL在不同濃度培養(yǎng)基下支持來自不同組織的新生兒和成人間充質(zhì)干細胞的生長和增殖的能力。無需添加肝素血小板裂解液價格多少人血小板裂解液是一種來源于人血小板的無異種源、無動物血清的細胞培養(yǎng)基添加物。

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由于在臨床中對血小板單元的需求而供體有限,因此使用新鮮的血小板單元來產(chǎn)生血小板裂解液引起了關(guān)注。過期的血小板單位可能是另一種來源,因為有證據(jù)表明可以使用從過期單位獲得的血小板而不會影響終產(chǎn)品的質(zhì)量。在一個擁有380萬居民的意大利地區(qū),2014年生產(chǎn)了大約100,000個來自單一捐贈者的血沉棕黃層單位。其中約60%在有效期后被丟棄??紤]到50ml的平均血沉棕黃層體積,使用過期的血沉棕黃層單位可以生產(chǎn)約3000L的血小板裂解液。

那么經(jīng)常有客戶會問道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養(yǎng)之前有必要花時間來優(yōu)化下這個肝素濃度參數(shù)嗎?現(xiàn)在小編通過比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養(yǎng)基中培養(yǎng)MSCs的增殖能力、成纖維細胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。血小板裂解液的有效成分是什么?

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Sexton的血小板裂解液系列產(chǎn)品使用干冰運輸,全程確保產(chǎn)品處于凍存狀態(tài)。接收后立即儲存在-20°C環(huán)境中,使用的時候必須使用37°C水浴解凍,而非4°C冰箱或室溫解凍方法,否則會產(chǎn)生更多碎片,影響性能。對于不立即使用的整瓶/袋解凍的血小板裂解液產(chǎn)品,建議將剩余體積制備成一次性使用的等分試樣。在滿足生物血清相容性和低溫要求的條件下,可以使用錐形管或較小的瓶子進行等分儲存。等分試樣的制備將減少血小板裂解液產(chǎn)品的冷凍/解凍循環(huán)。 血小板裂解液和胎牛血清,各自有利弊,只是這些年大家對血小板裂解物的熱情比較高漲。性能好血小板裂解液中國代理權(quán)

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相比之下,我們開發(fā)了一個專有的制造工藝,使我們的血小板裂解液可使用電子束處理。重要的是經(jīng)輻照的產(chǎn)品被發(fā)現(xiàn)保存了輻照前的產(chǎn)品功效,圖顯示了未經(jīng)處理的hPL(Stemulate)和電子束處理的hPL(nLivenPR)和伽馬處理的FBS對細胞增殖的影響。骨髓間充質(zhì)干細胞的生長在模擬或***中生長,始終顯示與傳統(tǒng)方法相比,維持細胞的穩(wěn)健擴張,輻照FBS的生長速度要慢得多。A-MSCs結(jié)果類似結(jié)果,已經(jīng)為我們的許多客戶已過渡到輻照版本的血小板裂解液。MSCs培養(yǎng)血小板裂解液過濾

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