美國(guó)血小板裂解液細(xì)胞添加劑

血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長(zhǎng)因子等細(xì)胞培養(yǎng)必須物質(zhì),在體外細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞zhiliao中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類來源血小板細(xì)胞經(jīng)過連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后，進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液（platelet lysate，PL）是自體或異體血小板富集物經(jīng)細(xì)胞裂解后的產(chǎn)物，已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清（fetal bovine serum，F(xiàn)BS）的替代品，應(yīng)用于間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSC）的大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。 血小板裂解液不能反復(fù)凍融。美國(guó)血小板裂解液細(xì)胞添加劑

通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況，發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時(shí)，分化成脂細(xì)胞的百分比明顯降低。同樣的，通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況，高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比，特別是在脂肪組織來源的MSCs中，UFH肝素高濃度對(duì)成脂和成骨分化誘導(dǎo)的負(fù)面影響較為明顯。基于上述結(jié)果，我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴(kuò)增的必要性，在購(gòu)買血小板裂解液后，用戶應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)條件去合理的選擇合適的肝素濃度，而肝素濃度的選擇應(yīng)該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎(chǔ)上盡量降低，以減少肝素對(duì)于MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位（CFU-F）、MSCs體外分化等的影響。MSCs培養(yǎng)血小板裂解液過濾人源血小板裂解液是一種能有效支持間充質(zhì)干細(xì)胞等人類細(xì)胞生長(zhǎng)的高效細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑。

在解凍的ELAREM Prime血小板裂解液中可能會(huì)形成不溶性顆粒。顆粒形成不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng)性能。如果完全細(xì)胞培養(yǎng)基中出現(xiàn)凝結(jié)或不溶性顆粒，建議在ELAREM Prime血小板裂解液在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中稀釋后使用0.22μm過濾器過濾完全培養(yǎng)基。過濾不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)性能（經(jīng)過MSC測(cè)試）。但是，不建議對(duì)100%濃縮的ELAREM  Prime血小板裂解液進(jìn)行過濾。避免多次凍融循環(huán)ELAREM Prime血小板裂解液，可以很大限度地減少微粒的形成。無菌性ELAREM Prime血小板裂解液經(jīng)過無菌處理。微生物培養(yǎng)測(cè)試為陰性。質(zhì)量控制測(cè)試在經(jīng)過認(rèn)證的測(cè)試實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。

血小板裂解液解凍后請(qǐng)立即進(jìn)行培養(yǎng)基的配制，配置好的培養(yǎng)基在2-8°C環(huán)境下保存并盡快使用，不建議超過21天。如解凍后的原瓶無法全部使用，建議按需分裝成合適的小瓶中進(jìn)行-20°C保存一旦產(chǎn)品瓶或袋經(jīng)過初始解凍過程，建議盡快將產(chǎn)品置于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。盡管對(duì)于儲(chǔ)存在2-8°C的準(zhǔn)備好的含有hPL的培養(yǎng)基，Sexton的內(nèi)部測(cè)試有效期為21天，但建議客戶進(jìn)行內(nèi)部驗(yàn)證研究，以確定其基于血小板裂解液的完整培養(yǎng)基的有效期。使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基和添加劑等變量可能會(huì)縮短或延長(zhǎng)完整培養(yǎng)基產(chǎn)品的有效期。血小板裂解液的原理是什么？

細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREM Prime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時(shí)。2.通過將10%ELAREM Prime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基（即MEMα、GlutaMAX補(bǔ)充劑、無核苷）和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mL PL SUPPLEMENT(貨號(hào)PL-SUP-500)or 0.024mg/mL PL SUPPLEMENT-XF(貨號(hào)PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲(chǔ)存，并穩(wěn)定約4周儲(chǔ)存和穩(wěn)定性ELAREM Prime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREM Prime在使用前在-20°C（或在-80°C進(jìn)行長(zhǎng)期儲(chǔ)存）冷凍儲(chǔ)存時(shí)穩(wěn)定。解凍后，建議將未使用的ELAREM Prime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREM Prime的重復(fù)凍融循環(huán)，因?yàn)檫@會(huì)導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時(shí)，只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基，并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長(zhǎng)因子濃度。FBS替代品血小板裂解液添加肝素的目的

血小板裂解液用于無血清分離和傳代培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的方法。美國(guó)血小板裂解液細(xì)胞添加劑

Sexton致力于為細(xì)胞和基因zhi liao行業(yè)提供解決方案，以改善客戶實(shí)驗(yàn)結(jié)果和降低風(fēng)險(xiǎn)。兩款人源血小板裂解液Stemulate和nLivenPR（通過病原體減少PR技術(shù)處理以進(jìn)一步降低風(fēng)險(xiǎn)）為用戶提供了一種可用于生產(chǎn)多種細(xì)胞類型的偉大方案。如果需要大批量生產(chǎn)使用，我們的專有工藝確保每個(gè)批次都提供安全一致的產(chǎn)品。也許由于血小板中蛋白表達(dá)的性質(zhì)與血液生物化學(xué)固有的可變性質(zhì)，對(duì)多個(gè)批次的Stemulate和Nliven評(píng)估表明，關(guān)鍵因子的蛋白濃度高度一致(如圖3所示的Stemulate中的EGF水平)。這種產(chǎn)品批次之間的一致性會(huì)明顯降低MSCs制造過程中性能差異。美國(guó)血小板裂解液細(xì)胞添加劑

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