間充質(zhì)間質(zhì)細(xì)胞(MSCs)體外擴(kuò)增的培養(yǎng)基一般添加胎牛血清FBS,但是考慮到異種ganran及免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn),監(jiān)管機(jī)構(gòu)并不鼓勵(lì)使用。人血小板裂解液除了不存在異種免疫反應(yīng)或牛病原體ganran的風(fēng)險(xiǎn),有助于增強(qiáng)間充質(zhì)干細(xì)胞的擴(kuò)增,也相對(duì)容易地根據(jù)良好的生產(chǎn)規(guī)范程序生產(chǎn),并已用于臨床應(yīng)用,因此現(xiàn)如很多資料顯示血小板裂解液已被證明是擴(kuò)增MSCs一種非常有效的FBS替代方法(參考文獻(xiàn)1)。血小板裂解液由血漿組成,含有纖維蛋白原和凝血因子,對(duì)于一般細(xì)胞培養(yǎng)中涉及的含鈣培養(yǎng)基來(lái)說(shuō)通常需要加入抗凝劑(常用肝素、Rivaroxaban利伐沙班、argatroban阿加曲班等)來(lái)防止凝膠形成,其中肝素很為常用。血小板裂解液里面的沉淀對(duì)細(xì)胞有沒(méi)有影響?NK細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液代理商
在已有的上百篇文獻(xiàn)中,報(bào)道了Sexton公司的Stemulate和nliven已經(jīng)被確定為間充質(zhì)干細(xì)胞MSC的良好生長(zhǎng)補(bǔ)充劑,并且支持各種組織來(lái)源包括脂肪、骨髓、軟骨、牙髓和臍帶中的MSCs的擴(kuò)增培養(yǎng)。Sexton公司標(biāo)準(zhǔn)型和PR處理的血小板裂解液始終優(yōu)于輻照胎牛血清,幫助用戶(hù)優(yōu)化MSCs的生產(chǎn)。用戶(hù)通過(guò)使用Sexton公司的血小板裂解液培養(yǎng)基生長(zhǎng)劑,降低時(shí)間和花費(fèi)的成本,可帶來(lái)更快的倍增時(shí)間。既可以減少潔凈室生產(chǎn)時(shí)間,也可以減少試劑的使用量,實(shí)現(xiàn)總成本的降低。灝洋血小板裂解液廠(chǎng)家血小板裂解液中的沉淀在使用前是需要過(guò)濾掉么?
血小板裂解液主要成分為人血小板裂解液,含有較高濃度的生長(zhǎng)因子等細(xì)胞培養(yǎng)必須物質(zhì),在體外細(xì)胞培養(yǎng)中可代替胎牛血清和自體血清。人源血小板裂解液就是直接將人類(lèi)來(lái)源血小板細(xì)胞經(jīng)過(guò)連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后,進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品。血小板裂解液(platelet lysate,PL)是自體或異體血小板富集物經(jīng)細(xì)胞裂解后的產(chǎn)物,已經(jīng)被諸多研究推薦作為胎牛血清(fetal bovine serum,F(xiàn)BS)的替代品,應(yīng)用于間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSC)的大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)。
本研究中使用的HPL是Stemulate公司兩款人源血小板裂解液(NH和H)是在工業(yè)規(guī)模(很小批量為20L)生產(chǎn)的,具備高度的批間一致性。將脂肪來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加10%Stemulate-NH或10%FBS進(jìn)行傳代培養(yǎng)11代。在DME/F-12中分別添加5、7.5或10%Stemulate-NH,并與10%胎牛血清進(jìn)行比較。羊膜來(lái)源間充質(zhì)干細(xì)胞也在2.5或5%Stemulate中培養(yǎng),與10%胎牛血清相比。牙髓來(lái)源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在DME/F-12中添加不同濃度的Stemulate-NH或Stemulate-H,并與添加10%FBS的培養(yǎng)基進(jìn)行比較。在所有實(shí)驗(yàn)中,每天都監(jiān)測(cè)細(xì)胞,每次傳代結(jié)束時(shí),收獲細(xì)胞,并使用臺(tái)盼藍(lán)和一個(gè)自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)然后繼續(xù)傳代。人源血小板裂解液適合應(yīng)用在多種來(lái)源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程。
ELAREMPrime人血小板裂解液是面向未來(lái)需求的先進(jìn)的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案?;谌搜“宓慕?jīng)濟(jì)實(shí)惠的細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑可實(shí)現(xiàn)從動(dòng)物血清添加劑到無(wú)異種細(xì)胞培養(yǎng)條件的簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)換。每批ELAREMPrime均由大量血小板單位生產(chǎn),以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREMPrime支持細(xì)胞擴(kuò)增,無(wú)需批間測(cè)試即可提供一致的試驗(yàn)結(jié)果。ELAREMPrime只供體外實(shí)驗(yàn)和研究使用(RUO),該產(chǎn)品不適合直接用于人類(lèi)或動(dòng)物用途。有關(guān)安全預(yù)防措施,請(qǐng)參閱相應(yīng)的SDS。推薦用于與FBS相比,ELAREMPrime人血小板裂解液支持間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的細(xì)胞生長(zhǎng)性能,而不會(huì)丟失表型。非靈長(zhǎng)類(lèi)細(xì)胞系的體外繁殖和維持需要根據(jù)具體情況進(jìn)行測(cè)試和優(yōu)化。國(guó)產(chǎn)的血小板裂解液好用么。福建三一造血血小板裂解液使用比例
血小板裂解液進(jìn)口很難嗎?NK細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液代理商
MSCs在添加10%血小板裂解液和不同濃度肝素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)7天,隨后使用MTT法評(píng)估增殖。脂肪組織源性間充質(zhì)干細(xì)胞(AT-MSC)和骨髓源性間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSC)培養(yǎng)的過(guò)程中,如果使用的UFH濃度低于0.61IU/mL或者使用Enoxaparin(LMWH)濃度低于0.024mg/mL(2.4IU/mL)時(shí)培養(yǎng)液均呈現(xiàn)凝膠狀態(tài)(灰色背景),而肝素濃度過(guò)高則對(duì)細(xì)胞增殖的負(fù)面影響明顯且以劑量依賴(lài)的方式提高。備注肝素濃度單位換算:肝素濃度國(guó)際單位(IU)衡量,1IU國(guó)際單位是指在規(guī)定的條件下,將1ml全血延長(zhǎng)凝血3分鐘所需的量:1mg大約相當(dāng)于100IU的肝素。NK細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液代理商
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