增強慢病毒轉導實驗技巧

來源: 發(fā)布時間:2023-08-25

Sirion Biotech GmbH 公司于2007年在德國馬丁雷德成立,此后一直致力于改變病毒載體供應的模式。Sirion載體被用于基因功能研究、臨床前靶點驗證、基因zhi liao和疫苗開發(fā)。Sirion Technologies獲得了歐洲和美國幾項主要臨床試驗(Phase I/II/III)的許可,是歐洲主要的病毒載體技術商業(yè)供應商,在短時間內(nèi)可提供quan mian的定制病毒載體組合,并提供個性化項目管理服務。慢病毒載體的研究發(fā)展得很快,研究的也非常深入,在美國已經(jīng)開展了臨床研究,效果非常理想,因此具有廣闊的應用前景。慢病毒也被guang fan地應用于表達RNAi的研究中。由于有些類型細胞轉染試劑瞬時轉染效果差,轉移到細胞內(nèi)的siRNA半衰期短,體外合成siRNA對基因表達的抑制作用通常是短暫的,因而使其應用受到較大的限制。SIRION Biotech 為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級的臨床前研究和工藝開發(fā),以及評估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國和歐洲多個 Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗正在進行。什么可以增加慢病毒轉導的速度?增強慢病毒轉導實驗技巧

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慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對稱結構、球形。病毒顆粒Zui外層是包膜(包膜蛋白決定了han ran細胞的類型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,Zui里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉錄酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒han ran的xian zhu特點是han ran個體在出現(xiàn)典型的臨床癥狀之前,大多經(jīng)歷長達數(shù)年的潛伏期,之后緩慢發(fā)病,因此這些病原體被稱為慢病毒。慢病毒載體是指以人類免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 來源的一種病毒載體,慢病毒載體包含了包裝、轉染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息,是慢病毒載體系統(tǒng)的主要組成部分。攜帶有外源基因的慢病毒載體在慢病毒包裝質(zhì)粒、細胞系的輔助下,經(jīng)過病毒包裝成為有han ran力的病毒顆粒,通過han ran細胞或huo ti組織,實現(xiàn)外源基因在細胞或huo ti組織中表達。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉導增強劑,歡迎咨詢上海曼博生物!研究級慢病毒轉導原理可以用什么做慢病毒轉染?

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人間充質(zhì)干細胞 (MSCs) 的慢病毒轉導可誘導長期轉基因表達,并為多種基因zhi liao應用帶來巨大希望。Polybrene是實驗室研究中Zui常用的提高病毒基因轉導效率的試劑,但它未被批準用于人體,并且還被證明會損害MSCs細胞的增殖和分化。因此,優(yōu)化轉導方案以應用于臨床試驗是非常有必要的。LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白是可替代的轉導增強劑,可以按照現(xiàn)行的GMP標準生產(chǎn),且很容易應用于現(xiàn)有的轉導方案,并且曾被用于人類 CD34+ HSCs細胞的轉導研究。慢病毒載體可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達目的序列的效果。在gan ran能力方面可有效地gan ran神經(jīng)元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,從而達到良好的的基因zhi liao效果。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!

LentiBOOST可廣泛應用于多種臨床相關細胞類型,包括CD34+造血干細胞(HSCs),間充質(zhì)干細胞(MSCs),神經(jīng)干細胞,原代T細胞,NK細胞和成纖維細胞等,對于難轉導的小鼠T細胞亦有效。已成為改進體外基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉導方案的理想選擇。LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉運,促進慢病毒與細胞膜的融合,提高慢病毒轉導效率。目前LentiBOOST慢病毒轉導增強劑在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中,并有相關藥物已上市銷售。有效果好的慢病毒轉導增強劑嗎?

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影響轉導效率的另一個關鍵參數(shù)是gan ran復數(shù)(MOI),MOI指的是每個細胞gan ran的病毒粒子個數(shù),病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細胞類型的不同而不同,因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI。MOI值越大,慢病毒gan ran上的可能性也越大,gan ran效率越高,但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大,也說明細胞越難被轉導。SIRION Biotech 為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。更多關于LentiBOOST慢病毒轉導的相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!慢病毒轉導增加可以使用哪些試劑?快速慢病毒轉導毒性分析

什么可以增加慢病毒轉染的速度?增強慢病毒轉導實驗技巧

研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉導效率,且對細胞活力或干細胞特性沒有劑量依賴性的不良影響。這種轉導增強劑的組合dai biao了一種有價值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應用中 MSCs 慢病毒轉導效率的潛力。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉導效率也具有很大的影響,良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證,一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細胞進行gan ran可提高gan ran效率。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!增強慢病毒轉導實驗技巧