NK細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-08-30

SIRION Biotech 為研究機(jī)構(gòu)和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式,并為臨床試驗(yàn)提供良好的 GMP 材料供應(yīng)條件。LentiBOOST 目前在美國(guó)和歐洲的多個(gè)臨床試驗(yàn)中使用。LentiBOOST(Pharma grade)jin用于藥物級(jí)的臨床前研究和工藝開發(fā),以及評(píng)估研究。LentiBOOST(GMP grade)用于臨床階段方案,目前美國(guó)和歐洲多個(gè) Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行。Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,高達(dá)90%以上,研究證明對(duì)于細(xì)胞增殖無(wú)不良影響,且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果??蓽p少M(fèi)OI,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量,但不會(huì)過(guò)度增加單個(gè)細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),符合FDA/EMA對(duì)ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,歡迎咨詢上海曼博生物!慢病毒載體是一種源于人類免疫缺陷病毒的基因載體。NK細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度

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研究發(fā)現(xiàn) LentiBOOST 和硫酸魚精蛋白的組合使用可以產(chǎn)生比polybrene更高的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,且對(duì)細(xì)胞活力或干細(xì)胞特性沒(méi)有劑量依賴性的不良影響。這種轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑的組合dai biao了一種有價(jià)值的臨床兼容性polybrene替代方案,具有顯著提高基因zhi liao應(yīng)用中 MSCs 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率的潛力。細(xì)胞狀態(tài)對(duì)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率也具有很大的影響,良好的生長(zhǎng)狀態(tài)是達(dá)到高gan ran效率的保證,一般選擇細(xì)胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行g(shù)an ran可提高gan ran效率。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!多功能慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)常見(jiàn)問(wèn)題加入什么試劑可以提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率?

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在病毒附著到宿主細(xì)胞后,病毒RNA滲透進(jìn)宿主細(xì)胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過(guò)程中,RNA的兩端都進(jìn)行了復(fù)制,產(chǎn)生了長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運(yùn)送到細(xì)胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。原病毒在細(xì)胞周期過(guò)程中復(fù)制,然后傳遞給子細(xì)胞。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,慢病毒可以有效地gan ran不分裂的細(xì)胞,這使它們更有吸引力用于基因zhi liao。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,歡迎咨詢上海曼博生物!

Lentiboost可增強(qiáng)慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,高達(dá)90%以上,研究證明對(duì)于細(xì)胞增殖無(wú)不良影響,且在T細(xì)胞中觀察到一定的促增殖效果??蓽p少M(fèi)OI,從而降低物料成本。均勻增加慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞的數(shù)量,但不會(huì)過(guò)度增加單個(gè)細(xì)胞病毒載體拷貝數(shù)(VCN),符合FDA/EMA對(duì)ATMP產(chǎn)品的安全標(biāo)準(zhǔn)。LentiBOOST是德國(guó)SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無(wú)細(xì)胞毒性的慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑,通過(guò)降低細(xì)胞膜粘稠度、提高脂質(zhì)交換和跨膜轉(zhuǎn)運(yùn),促進(jìn)慢病毒與細(xì)胞膜的融合,提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。目前該產(chǎn)品在美國(guó)和歐洲已有30多個(gè)藥物phaseIII/II/I臨床實(shí)驗(yàn)中,并有相關(guān)藥物已上市銷售。更多關(guān)于Sirion Biotech LentiBOOST相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!為了達(dá)到研究目的,在轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中加入轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑也能有效提高轉(zhuǎn)導(dǎo)效率。

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在病毒附著到宿主細(xì)胞后,病毒RNA滲透進(jìn)宿主細(xì)胞,并以此為模板,利用逆轉(zhuǎn)錄酶合成病毒cDNA,在逆轉(zhuǎn)錄和合成雙鏈DNA的過(guò)程中,RNA的兩端都進(jìn)行了復(fù)制,產(chǎn)生了長(zhǎng)末端重復(fù)序列(LTRs),在雙鏈的病毒DNA中,每條鏈含有U3-R-U5序列,然后雙鏈DNA被運(yùn)送到細(xì)胞核內(nèi)。新合成的逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA整合到宿主DNA中,稱為原病毒。原病毒在細(xì)胞周期過(guò)程中復(fù)制,然后傳遞給子細(xì)胞。不像其他逆轉(zhuǎn)錄病毒科成員,慢病毒可以有效地ganran不分裂的細(xì)胞,這使它們更有吸引力用于基因zhiliao。Zuihou,子代病毒基因組從整合的DNA轉(zhuǎn)錄到細(xì)胞質(zhì)中。病毒粒子從質(zhì)膜出芽獲得其脂質(zhì)包膜。在出芽過(guò)程中,病毒蛋白被病毒蛋白酶裂解,產(chǎn)生成熟的ganranxingbing毒粒子。慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)可使用LentiBOOST產(chǎn)品。更多關(guān)于慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)的相關(guān)產(chǎn)品問(wèn)題,歡迎咨詢上海曼博生物!慢病毒轉(zhuǎn)染有什么限制?NK細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度

慢病毒轉(zhuǎn)染的載體是什么?NK細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度

目前的基因&細(xì)胞zhi liao主要采用病毒和非病毒兩種載體形式。根據(jù)統(tǒng)計(jì),病毒載體約占進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)的項(xiàng)目 65%;而慢病毒因無(wú)嚴(yán)重的臨床事故出現(xiàn)成為目前相對(duì)安全的病毒載體選擇之一。慢病毒載體具有能gan ran非分裂期細(xì)胞、容納外源性目的基因片段大、穩(wěn)定性強(qiáng)、免疫原性小等特點(diǎn)。大量研究表明,相對(duì)其他病毒載體,慢病毒gan ran效率高,更容易gan ran一些較難gan ran的組織和細(xì)胞,其效率一般可以達(dá)到 30%-95% 以上。病毒顆的限制性攝取粒往往會(huì)降低基因或 shRNA 表達(dá)的成功率,并要求應(yīng)用更高的病毒滴度。然而,增加病毒數(shù)量以促進(jìn)表達(dá)可能會(huì)導(dǎo)致許多細(xì)胞類型的毒性副作用,并帶來(lái)不必要的昂貴成本。德國(guó) Sirion Biotech 公司研發(fā)了 LentiBOOST 慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,專為提高病毒基因轉(zhuǎn)導(dǎo)難轉(zhuǎn)的哺乳動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物細(xì)胞的效率。更多關(guān)于LentiBOOST慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑,歡迎咨詢上海曼博生物!NK細(xì)胞慢病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)滴度