DC細胞慢病毒轉導方案

產(chǎn)品介紹LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑，用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑，通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質交換和跨膜轉運，促進慢病毒與細胞膜的融合，提高轉導效率。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中，并有相關藥物已上市銷售。產(chǎn)品特點l增強慢病毒轉導效率，可高達90%—提高zhi liao蛋白表達量，有利于取得臨床試驗成功l減少MOI低至2倍，從而降低COGS（Costofgoodssold）——減少Lentivirus的用量和物料成本l控制單個細胞中的病毒載體拷貝數(shù)（VCN，VirusCopyNumber）——符合FDA/EMA對ATMPs(AdvancedTherapyMedicinalProducts)產(chǎn)品的安全標準l易于使用——無需改變現(xiàn)有轉導流程，兼容已經(jīng)開發(fā)流程l提供研究級和GMP級——GMP級具有臨床試驗的所有必備文件l30多種應用LentiBOOST慢病毒轉導增強劑的藥物已在美國和歐洲進入臨床試驗（PhaseIII和PhaseI/II）階段——加速了IND文件歸檔慢病毒轉導是干什么的呢？DC細胞慢病毒轉導方案

影響轉導效率的另一個關鍵參數(shù)是gan ran復數(shù)（MOI）,MOI指的是每個細胞gan ran的病毒粒子個數(shù)，病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細胞類型的不同而不同，因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI。MOI值越大，慢病毒gan ran上的可能性也越大，gan ran效率越高，但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大，也說明細胞越難被轉導。SIRION Biotech 為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式，并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉導的相關產(chǎn)品問題，歡迎咨詢上海曼博生物！DC細胞慢病毒轉導方案慢病毒載體的研究發(fā)展歷程是怎樣的？

慢病毒gan ran效率受到多種因素的影響，首先，考慮病毒包裝制備是否存在問題，比如外源基因是否正確，病毒滴度是否合格等。其次，考慮病毒運輸和保存方式是否得當，解凍病毒一定要在冰上進行，避免反復凍融，否則會影響病毒滴度；-80℃保存半年以上需要重新測定滴度。細胞狀態(tài)對于慢病毒轉導效率也具有很大的影響，良好的生長狀態(tài)是達到高gan ran效率的保證，一般選擇細胞形態(tài)較好、輪廓清晰、處于對數(shù)生長期的細胞進行gan ran可提高gan ran效率。

第三代慢病毒載體系統(tǒng)又增加了兩個安全特性：一是構建了自身失活的慢病毒載體，即刪除了U3區(qū)的3’ LTR，使載體失去HIV-1增強子及啟動子序列，即使存在所有的病毒蛋白也不能轉錄出RNA；二是去除了tat基因，代之以異源啟動子序列，這樣原始的HIV基因組中的9個基因在慢病毒載體中只保留了3個（gag、pol和rev） ，因此第三代慢病毒載體系統(tǒng)更加安全。與第三代系統(tǒng)相比，第二代慢病毒系統(tǒng)使用更多的HIV蛋白（在較少的質粒上）以產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。第三代包裝系統(tǒng)不表示tat，被認為比第二代系統(tǒng)更安全，但可能更難使用，因為它們需要用四個單獨的質粒轉染才能產(chǎn)生功能性慢病毒顆粒。慢病毒包裝系統(tǒng)一般都是三質?；蛩馁|粒包裝系統(tǒng)。

影響轉導效率的另一個關鍵參數(shù)是gan ran復數(shù)（MOI）,MOI指的是每個細胞gan ran的病毒粒子個數(shù)，病毒粒子滴度以gan ran單位(IU)/mL 或 TU/mL表示。慢病毒的gan ran能力隨細胞類型的不同而不同，因此每種不同的細胞類型需要不同的MOI。MOI值越大，慢病毒gan ran上的可能性也越大，gan ran效率越高，但對細胞的毒性也越大。另外細胞需要的MOI值越大，也說明細胞越難被轉導。SIRION Biotech 為研究機構和醫(yī)院開發(fā)了一種定制的許可模式，并為臨床試驗提供良好的 GMP 材料供應條件。LentiBOOST 目前在美國和歐洲的多個臨床試驗中使用。LentiBOOST（GMP grade）用于臨床階段方案，目前美國和歐洲多個 Phase III 和 Phase I/II 臨床試驗正在進行。為了達到研究目的，在轉導過程中加入轉導增強劑也能有效提高轉導效率。

目前，CAR-T細胞主要通過病毒載體制備，大多數(shù)情況下由慢病毒或逆轉錄病毒做載體。慢病毒載體（LVs）由于其有效的將基因整合進靶細胞基因組，穩(wěn)定的基因表達等特點，被認為是Zui有希望的基因zhi liao載體。與其他病毒載體相比，慢病毒載體的整合模式具有更低的致Ai風險，以及隨機整合基因風險低，因此，用慢病毒載體生產(chǎn)CAR-T細胞更加安全有效，而且靈活。更重要的是慢病毒相較于其他病毒載體，生產(chǎn)成本相對較低。另外，慢病毒載體可以轉導分化細胞，也可以轉導分化細胞，因此，慢病毒載體可以轉導更為guang fan的細胞，包括那些難轉導的血液前體細胞，神經(jīng)細胞，淋巴細胞和巨噬細胞。更多關于Sirion Biotech LentiBOOST慢病毒轉導增強劑，歡迎咨詢上海曼博生物！用什么試劑可以做慢病毒轉染？TAKARA慢病毒轉導體系

什么試劑可以提高慢病毒轉導效率呢？DC細胞慢病毒轉導方案

LentiBOOST是德國SirionBiotech開發(fā)的一種高效、無細胞毒性的慢病毒轉導增強劑，用于臨床前和臨床的慢病毒載體轉導。它是一種非離子型、非受體依賴性的表面活性劑，通過降低細胞膜粘稠度、提高脂質交換和跨膜轉運，促進慢病毒與細胞膜的融合，提高轉導效率。目前該產(chǎn)品在美國和歐洲已有30多個藥物phaseIII/II/I臨床實驗中，并有相關藥物已上市銷售。LentiBOOST可廣泛應用于多種臨床相關細胞類型，包括CD34+造血干細胞（HSCs），間充質干細胞（MSCs），神經(jīng)干細胞，原代T細胞，NK細胞和成纖維細胞等，對于難轉導的小鼠T細胞亦有效。已成為改進體外基因zhi liao和CAR-T細胞zhi liao的臨床轉導方案的理想選擇。DC細胞慢病毒轉導方案