對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到宜轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLPEIMAX轉染試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1.5~4μL體積線性PEIMAX轉染試劑進行優(yōu)化。?如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!?分子量為25000的線性PEI轉染試劑即Polysciences23966轉染效率比較高.進口PEI轉染試劑試用裝歷史悠久
PEIMAX——高產(chǎn)工業(yè)化轉染試劑-高度濃縮,可制備大量轉染試劑Polysciences轉染試劑系列是基于聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)的產(chǎn)品,因其較高的轉染效果,已廣泛應用于工業(yè)化生產(chǎn)。聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽離子電荷密度的有機大分子,每相隔二個碳原子,即每“第三個原子都是質子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡在任何pH下都能充當有效的“質子海綿”(protonsponge)體。PEI可用作轉染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉染真核細胞。PEIMAX40K是由Polysciences出品的全合成線性聚乙烯亞胺瞬時轉染試劑。PEIMAX是一款高度濃縮的粉劑,大量科學家選擇PEIMAX,在內部自行制備低成本高效益的PEI轉染試劑。多年以來,經(jīng)過眾多業(yè)內人士評審的公開研究和出版文獻表明,在HEK293、CHO和Sf9系統(tǒng)中可獲得很高的轉染效率,在重組抗體和病毒載體生產(chǎn)中穩(wěn)定性高,可靠性強。PEIMAX提供從96孔板到200L生物反應器持續(xù)的高基因表達細胞體系,實現(xiàn)從新藥研發(fā)到工業(yè)化生產(chǎn)的輕松過度。而且與大多數(shù)細胞轉染方案相比,使用PEIMAX至少可降低40%轉染成本(部分案例可降低90%轉染成本)。細胞轉染PEI轉染試劑試用裝適用于293細胞轉染線性的和分支的PEI轉染試劑哪個好?
接種細胞:轉染前,用膠原酶(WORTHINGTONG公司LS004196)消化細胞并計數(shù)(不建議用胰酶)。調整細胞濃度,將細胞鋪入細胞培養(yǎng)的器皿,每個孔置入的細胞量應能使轉染時細胞匯合度達到70~80%。2.準備DNA-PEI復合物:DNA、PEI試劑和稀釋劑在進行以下步驟前需先使其升至室溫。依據(jù)表1所示,用Opti-MEMITM(Invitrogen)或其他適合的無蛋白培養(yǎng)基稀釋適量DNA。用同樣的培養(yǎng)基稀釋PEI試劑。每1μgDNA需用1.5-5μL線性PEI轉染試劑(這個需要客戶自行摸索配比,每一批轉染試劑和每一批DNA比例可能會稍有不同)。一邊輕輕渦旋裝有DNA溶液的試管,一邊將稀釋的線性PEI轉染試劑滴加至試管中(注意:請勿顛倒添加順序)。充分混勻后,室溫靜置10~25min以形成DNA-PEI復合物。當溶液體積較大時,請用圓底聚丙烯管,例如NEST5mL/14mL離心管。3.轉染細胞:直接向每個孔中加入DNA-PEI復合物并輕輕渦旋培養(yǎng)板/培養(yǎng)皿。在無血清條件下轉染時,去除生長培養(yǎng)基,替換成無血清培養(yǎng)基,然后滴DNA-PEI復合物。轉染1.5h后,添加?體積的包含30%血清的生長培養(yǎng)基。更多PEI相關產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!
1.對于某些類型的細胞如HEK-293、HEK293T、NIH/3T3和COS細胞,在轉染前兩天鋪板可顯著提高轉入基因的表達水平。如果選擇轉染前兩天鋪板,可適當降低鋪板密度,以確保轉染時細胞的匯合度仍為70~80%。2.對于接觸抑制敏感的細胞,可適當降低鋪板密度。3.即使在有蛋白(如10%的血清)存在的情況下,DNA-PEI復合物仍能轉染細胞,但是DNA-PEI復合物必須在無蛋白存在的條件下形成。我們推薦使用Opti-MEMITM培養(yǎng)基以達到*轉染效率。其他的無蛋白培養(yǎng)基則需測試與線性PEI轉染試劑的兼容性。4.對大多數(shù)細胞來而言,每1μgDNA使用3.0μLEndoFectinTM試劑都能獲得較高轉染效率。使用者也可嘗試每1μgDNA使用1~4μL體積線性PEI轉染試劑進行優(yōu)化。更多關于Polysciences PEI相關內容歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!?有誰用過Polysciences的PEI轉染試劑?
線性PEI轉染試劑是一種陽離子聚合物,分子量25000,它能與核酸形成復合物,并使該復合物進入哺乳動物細胞。線性PEI轉染試劑廣適用于常見細胞系,如HEK-293、HEK293T、HepG2、Hela、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3和Sf9等。該試劑即使在有血清存在的情況下,它仍然能的將核酸導入細胞。78bio公司提供的線性PEI轉染試劑具有如下優(yōu)點:優(yōu)越的轉染效率,重組蛋白的高表達水平,與含血清的培養(yǎng)基相兼容,低細胞毒性,易于操作?質量控制每批次線性PEI轉染試劑均經(jīng)過轉染測試。將eGFP表達質粒(GeneCopoeiaCat.No.EX-EGFP-Lv01)用EndoFectinTM-Plus轉染試劑轉入亞融合狀態(tài)的HEK-293細胞,轉染16h后,超過95%的細胞表達eGFP。更多關于PEI轉染試劑相關的產(chǎn)品信息,歡迎咨詢上海曼博生物!如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!如何辨別假的PEI轉染試劑。細胞轉染PEI轉染試劑試用裝適用于293細胞轉染
用PEI轉染試劑時,一般和DNA的比例是多少?進口PEI轉染試劑試用裝歷史悠久
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司成立于2019年,依托于集團公司泉心泉意深厚的資源和超過400家國內客戶群體,生命科學領域一站式供應鏈體系,以及高風險生物危險材料進出口平臺的優(yōu)勢,曼博生物嚴格篩選國際創(chuàng)新且經(jīng)過同行驗證過的產(chǎn)品和技術,引入中國市場,開發(fā)、孵育和推廣,致力于將全球創(chuàng)新產(chǎn)品和前沿技術帶入中國,集中在為細胞/基因領域、/免疫,抗體藥物研發(fā)客戶提供小眾創(chuàng)新產(chǎn)品,包括從Researchgrade到cGMP等級的無動物源培養(yǎng)基質,轉染試劑、病毒轉導試劑、基因編輯工具等產(chǎn)品和定制服務,支持ATMP(AdvanceTherapyMedicinalProducts)藥物研發(fā)從R&D到Clinicaltrial以及后期商業(yè)化的無縫轉化。更多關于Polysciences PEI相關產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!也歡迎關注我們的公眾號:Mine-Bio。??如想申請PEI試用裝,請關注我們的公眾號:Mine-bio,回復關鍵詞“PEI申請”,即可參加!?進口PEI轉染試劑試用裝歷史悠久