人胰腺B細胞糖尿病細胞模型促胰島素分泌增加10倍

EndoC-βH1細胞移植到小鼠體內(nèi)可以逆轉(zhuǎn)化學誘導的糖尿病，EndoC-βH1細胞每百萬細胞含有0.48μg胰島素，至少80代穩(wěn)定表達許多特異性β細胞標記物，沒有任何其他胰腺細胞類型標記物的大量表達。EndoC-βH1有潛力成為深入研究人類β細胞和藥物篩選的獨特工具，同時也是測試糖尿病替代細胞療法的有用臨床前模型。糖尿病細胞模型，EndoC-βH1、EndoC-βH3、EndoC-βH5等細胞dai biao了大規(guī)模藥物發(fā)現(xiàn)的獨特工具，為糖尿病細胞替代療法提供了臨床前模型。糖尿病細胞模型—EndoC-BH1是永生化胰島細胞，分泌的胰島素接近天然胰島細胞。人胰腺B細胞糖尿病細胞模型促胰島素分泌增加10倍

Human Cell Design 根據(jù)法國生物倫理立法收集人類胎兒組織，獲得法國生物醫(yī)學局（巴黎）的批準，批準號為 PFS08-005。糖尿病細胞模型應用概括如下：細胞因子介導的糖尿病炎癥反應（一/二型糖尿?。阂葝uβ細胞保護機制研究，胰島β細胞炎癥反應研究，誘導胰島β細胞炎癥反應化合物篩選；T 細胞介導的胰島細胞殺傷實驗（一型糖尿病）：胰島β細胞保護機制研究，T 細胞抑制機制，β細胞和 T 細胞作用機制研究。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。通過多輪次優(yōu)化改良，獲得的功能胰腺B細胞，無限接近天然人源胰島B細胞，其胰島素分泌功能與天然細胞類似，基于PDX1/NKX6.1關鍵基因驗證的細胞均一性達到90%以上（左圖），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖劑量下表現(xiàn)出10倍的胰島素分泌反應（右圖），對GLP-1R激動劑， Exendin4刺激產(chǎn)生明細那反饋， 且可實現(xiàn)批量化生成，實現(xiàn)穩(wěn)定供應。天津慢病毒構(gòu)建型糖尿病細胞模型糖尿病研究中較好的胰島B細胞模型？

根據(jù)嚙齒動物β細胞獲得的數(shù)據(jù)，葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白SLC2A2頭次被認為是葡萄糖傳感器蛋白。SLC2A2在人胰島細胞中的表達水平極低，表明葡萄糖在大鼠β細胞中通過SLC2A2轉(zhuǎn)運，而在人β細胞中主要通過SLC2A1和/或SLC2A3轉(zhuǎn)運。研究表明SLC2A2mRNA在EndoC-βH1細胞中表達，因此，EndoC-βH1細胞應該是一個有用的模型，用于解剖不同葡萄糖轉(zhuǎn)運體在人β細胞中的特定作用。Human cell design 構(gòu)建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰島B細胞模型。

在 Human Cell Design 的研發(fā)過程中，科學家們采用了先進的細胞工程技術，通過基因編輯和細胞培養(yǎng)等手段，成功構(gòu)建了多個高質(zhì)量的人源胰島β細胞模型。這些細胞模型不僅在結(jié)構(gòu)上與天然胰島細胞高度相似，還能夠在功能上模擬胰島細胞的生理行為，為糖尿病研究提供了可靠的實驗工具。HCD 的 EndoC-BH5 細胞系在糖尿病研究中具有廣泛應用，其在高葡萄糖環(huán)境下能夠表現(xiàn)出胰島素分泌反應，為研究胰島素調(diào)節(jié)機制和開發(fā)新型抗糖尿病藥物提供了重要支持。這些細胞模型的高穩(wěn)定性和可重復性，使得研究結(jié)果更加可靠，為科學家們提供了寶貴的研究平臺。糖尿病細胞模型—EndoC-BH5 細胞是 EndoC-BH 細胞家族中的較新細胞。

EndoC-βH5細胞是一種新型人類胰腺β細胞解決方案，可用于開發(fā)人類糖尿病模型以及藥物篩選和驗證平臺，產(chǎn)生流程為：DNA構(gòu)建，慢病毒載體產(chǎn)生，人胎兒胰腺外植體與pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒載體共轉(zhuǎn)導，移植到SCID小鼠的腎囊下，導致八個月后形成胰島素瘤，從而獲得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5細胞分別在Opti-β1和Ulti-b1培養(yǎng)基中的βCoat涂層塑料板上培養(yǎng)。使用胰蛋白酶（0.05%）每7天繁殖一次細胞。流式細胞術分析表明所有EndoC-βH5細胞均呈胰島素陽性，并且在絕大多數(shù)細胞中檢測到PDX1和NK6.1表達（分別為92.3%和90%）。EndoC-βH5細胞在涂層塑料上形成小的貼壁簇。Huamn cell design(HCD)提供的糖尿病細胞模型具有高度穩(wěn)健且無批次效應的特點。山東糖尿病細胞模型品質(zhì)保障

EndoC-BH1 和增殖的 EndoC-BH5 細胞分別在 Opti-B1 和 Ulti-b1 培養(yǎng)基中的 BCoat涂層塑料板上培養(yǎng)。人胰腺B細胞糖尿病細胞模型促胰島素分泌增加10倍

EndoC-βH1使用慢病毒介導的基因轉(zhuǎn)移從人類胎兒胰腺中產(chǎn)生功能性β細胞，這些胰腺處于發(fā)育的早期階段，即9至11周，這段時間與β細胞分化的開始相吻合(33)。整合的轉(zhuǎn)基因SV40LT受大鼠胰島素啟動子控制，在胰島素陽性細胞中特異性表達。通過使用這種靶向方法，SV40LT在新形成的β細胞中表達，同時這些細胞頭次產(chǎn)生胰島素。因此，我們成功地模仿了用于產(chǎn)生功能性嚙齒動物β細胞系的轉(zhuǎn)基因方法(7,8,34)，用于從人胎兒胰腺中開發(fā)功能性人β細胞系。人胰腺B細胞糖尿病細胞模型促胰島素分泌增加10倍