人血小板裂解液保存溫度

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-12

凍融循環(huán)后的穩(wěn)定性:對(duì)所有的血小板裂解液不建議反復(fù)凍融超過(guò)3次(包括初始解凍),次數(shù)過(guò)多會(huì)形成較多的碎片沉淀,影響性能,因此建議***次解凍時(shí)即進(jìn)行分裝。Sexton進(jìn)行了內(nèi)部研究,以檢查經(jīng)歷反復(fù)凍融循環(huán)的hPL的穩(wěn)定性。雖然數(shù)據(jù)是使用Stemulate作為測(cè)試血清收集的,但基于產(chǎn)品的相似成分和相似的放行規(guī)范標(biāo)準(zhǔn),測(cè)試結(jié)果同樣適用于nLivenPR和T-LivenPR。Sexton建議單瓶的hPL產(chǎn)品經(jīng)歷不超過(guò)三個(gè)冷凍/解凍循環(huán),包括初始解凍。內(nèi)部數(shù)據(jù)顯示,在經(jīng)過(guò)多達(dá)三個(gè)冷凍/解凍循環(huán)時(shí),pH、滲透壓、總蛋白或細(xì)胞生長(zhǎng)沒(méi)有顯著變化。然而,需要注意的是,單個(gè)單位hPL所經(jīng)歷的凍融循環(huán)次數(shù)越多,碎片形成的發(fā)生率就越高。建議客戶在其培養(yǎng)基產(chǎn)品中遇到碎片問(wèn)題時(shí)盡可能減少冷凍/解凍循環(huán)次數(shù)。此外,建議需要三次以上冷凍/解凍循環(huán)的客戶在初次解凍時(shí)進(jìn)行分裝。國(guó)產(chǎn)的血小板裂解液好用么?人血小板裂解液保存溫度

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本發(fā)明涉及細(xì)胞生物學(xué)領(lǐng)域,特別涉及一種血小板裂解液的制備方法及其應(yīng)用,用于替代動(dòng)物來(lái)源的血清,為間充質(zhì)干細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)提供的營(yíng)養(yǎng)。該制備方法包括:將血小板在20~24℃振蕩保存1~5d,采用反復(fù)凍融法和超聲法進(jìn)行處理,離心,收集上清液,去除纖維蛋白,獲得血小板裂解液.本發(fā)明提供的血小板裂解液的制備方法可明顯提高血小板裂解液中細(xì)胞因子含量,且可進(jìn)行細(xì)胞因子的定量平衡,有利于減少產(chǎn)品批間的差異,可達(dá)到穩(wěn)定的促進(jìn)人源性細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。血小板裂解液使用說(shuō)明血小板裂解液和胎牛血清,各自有利弊,只是這些年大家對(duì)血小板裂解物的熱情比較高漲。

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前述所說(shuō)的生長(zhǎng)因子大多存在于血小板內(nèi)部的α顆粒中,當(dāng)血小板被活化后會(huì)產(chǎn)生脫顆粒作用(即血小板的α顆粒會(huì)和細(xì)胞膜融合),進(jìn)而釋放大量活化的生長(zhǎng)因子。而人源血小板裂解物就是直接將人類(lèi)來(lái)源血小板細(xì)胞經(jīng)過(guò)連續(xù)的反復(fù)凍融裂解后,進(jìn)一步提純這些血小板脫顆粒的商品;人源血小板裂解物除了擁有比富血小板血漿更高的生長(zhǎng)因子濃度,更用特殊工藝去除了細(xì)胞碎片,大幅降低了使用過(guò)程中的免疫原性。

人源血小板裂解物的使用方式非常方便簡(jiǎn)單,在培養(yǎng)基中添加5%血小板裂解物,混合均勻后即可直接用來(lái)培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞,且在傳代過(guò)程中不需要預(yù)包被培養(yǎng)皿。適合應(yīng)用在多種來(lái)源的間充質(zhì)原代干細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程呦!

Sextonh的PL血小板裂解液產(chǎn)品接收時(shí)處于干冰運(yùn)輸?shù)睦鋬鰻顟B(tài)。收到hPL產(chǎn)品后,建議客戶立即將產(chǎn)品儲(chǔ)存在-20°C的環(huán)境中。Sexton有數(shù)據(jù)支持運(yùn)輸期間短時(shí)間的干冰保存對(duì)產(chǎn)品性能(包括pH值、滲透壓、總蛋白和細(xì)胞生長(zhǎng))沒(méi)有顯著影響。Sexton hPL產(chǎn)品的解凍應(yīng)按照Sexton產(chǎn)品說(shuō)明文件中的建議使用37°C水浴進(jìn)行。Sexton不建議使用4°C冰箱或室溫解凍方法,因?yàn)檫@些做法尚未經(jīng)過(guò)測(cè)試或作為任何內(nèi)部驗(yàn)證的一部分。已知使用冰箱或室溫解凍會(huì)導(dǎo)致更高水平的纖維蛋白/纖維蛋白原碎片,并可能導(dǎo)致產(chǎn)品性能下降。37°C水浴是Sexton用于所有批次放行測(cè)試的內(nèi)部解凍方法,也是與Sexton hPL產(chǎn)品相關(guān)的所有驗(yàn)證的解凍方法。血小板裂解液的添加比例是多少?

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由于在臨床中對(duì)血小板單元的需求而供體有限,因此使用新鮮的血小板單元來(lái)產(chǎn)生血小板裂解液引起了關(guān)注。過(guò)期的血小板單位可能是另一種來(lái)源,因?yàn)橛凶C據(jù)表明可以使用從過(guò)期單位獲得的血小板而不會(huì)影響終產(chǎn)品的質(zhì)量。在一個(gè)擁有380萬(wàn)居民的意大利地區(qū),2014年生產(chǎn)了大約100,000個(gè)來(lái)自單一捐贈(zèng)者的血沉棕黃層單位。其中約60%在有效期后被丟棄??紤]到50ml的平均血沉棕黃層體積,使用過(guò)期的血沉棕黃層單位可以生產(chǎn)約3000L的血小板裂解液。血小板裂解液在使用前一定要了解其使用方法。達(dá)優(yōu)血小板裂解液的正確使用方法

血小板裂解液為什么要使用肝素?人血小板裂解液保存溫度

ELAREM Prime人血小板裂解液是面向未來(lái)需求的先進(jìn)的細(xì)胞培養(yǎng)解決方案?;谌搜“宓慕?jīng)濟(jì)實(shí)惠的細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑可實(shí)現(xiàn)從動(dòng)物血清添加劑到無(wú)異種細(xì)胞培養(yǎng)條件的簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)換。每批ELAREM  Prime均由大量血小板單位生產(chǎn),以比較大限度地減少批次間的差異。ELAREM Prime支持細(xì)胞擴(kuò)增,無(wú)需批間測(cè)試即可提供一致的試驗(yàn)結(jié)果。ELAREM Prime只供體外實(shí)驗(yàn)和研究使用(RUO),該產(chǎn)品不適合直接用于人類(lèi)或動(dòng)物用途。有關(guān)安全預(yù)防措施,請(qǐng)參閱相應(yīng)的SDS。推薦用于與FBS相比,ELAREM Prime人血小板裂解液支持間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)的細(xì)胞生長(zhǎng)性能,而不會(huì)丟失表型。非靈長(zhǎng)類(lèi)細(xì)胞系的體外繁殖和維持需要根據(jù)具體情況進(jìn)行測(cè)試和優(yōu)化。人血小板裂解液保存溫度

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