金山區(qū)品牌疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2022-07-13

1、動物模型名稱:膽管結扎致肝膽管性肝硬化大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:5周5、實驗動物體重:200~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級1、實驗方法:用膽管結扎法。大鼠按10mg/kg體重腹腔注射3%戊巴比妥鈉麻醉,腹部皮膚消毒,無菌操作沿腹部正中線剪開腹腔,分離出膽管,在膽管近端和遠端2處結扎膽管。手術后正常飼養(yǎng)28天。28天后解剖取肝臟進行組織病理學檢查。2、檢測標準:肝臟病理切片鏡下小膽管伴纖維組織增生積分按程度為0-3分:0分:無明顯病變;1分:呈局灶性分布,受累面積在30%以下者;2分:呈多灶性分布,受累面積在30%-70%之間者;3分:呈彌漫性分布,受累面積在70%以上者。統(tǒng)計分析:每份標本在低倍視野(10×10)下依次選取左上、右上、左下、右下、中間5個視野(共1.5mm2)進行觀察,測定并計算視野內小膽管伴纖維組織增生總面積。疾病動物模型建模好做嗎?金山區(qū)品牌疾病動物模型建模

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pirb在軸突生長錐表達,位于富含肌動蛋白的前緣和synapsin免疫陽性的囊泡中,在神經(jīng)元突起的表達呈點狀分布。文獻表明,pirb表達隨年齡增加,特別是在老齡認知損傷的小鼠海馬中,pirb能夠抑制軸突再生和突觸可塑性。研究表明小鼠aβ寡聚體對海馬長時程增強的破壞作用需要pirb的參與,在ad轉基因模型中,pirb不僅參與成年小鼠記憶缺失,而且介導幼年小鼠視皮層突觸可塑性的丟失。這些研究提示我們,pirb參與突觸可塑性,抑制pirb可能對ad起到效應。肺病疾病動物模型建模評價小鼠疾病建模請找上海東寰。

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另外pirb在髓細胞和b細胞的表達隨細胞分化增加。在免疫系統(tǒng),pirb作為主要組織相容性復合物1(classimajorhistocompatibilitycomplex,mhc1)的受體,參與免疫調節(jié),包括中性粒細胞和巨噬細胞整合素通路、細胞毒性t淋巴細胞、b淋巴細胞和體液—細胞免疫應答等。pirb的前兩個細胞外免疫球蛋白結構域(d1-d2)介導mhci和pirb的結合。在系統(tǒng)(centralnervoussystem,cns),pirb在許多腦區(qū)包括皮層、海馬、小腦和嗅球都有表達,但在成年脊髓不表達。在細胞層面,pirb不僅表達于神經(jīng)元,也表達于星形膠質細胞。在許多病理條件下,如腦外傷、中風和cns,pirb的mrna和蛋白表達水平增加。

pcrmix:反應條件:pcr擴增產(chǎn)物的電泳鑒定結果如圖3所示,從圖3中可以看出,6、8、9號為pirb基因敲入小鼠在、,wt小鼠pcr產(chǎn)物沒有這兩個擴增產(chǎn)物。(c)短鏈pcr反應,引物如下:primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能夠擴增出344bp的產(chǎn)物,而野生型沒有。pcr體系:反應條件:(2)f1代小鼠測序:通過pcr擴增后測序鑒定小鼠基因型,如圖4所示,為6號pirb基因敲入小鼠測序峰圖,pcr所用引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern雜交檢測f1代小鼠基因型:采用bamhi和avrii核酸內切酶切割dna分子,切割示意圖如圖5。具體的southern雜交檢測過程如下:步驟a、提取f1代小鼠尾部dna;步驟b、制備探針,通過pcr方法將dig-dutp滲入到步驟a的dna分子中。動物模型作為人類疾病的縮影。

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2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片):3mg組動物死亡時間早,無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段,動情前期:撇圓形有核上皮細胞占絕大多數(shù),白細胞和角化上皮細胞很少(圖a)。動情期:角化上皮細胞占多大多數(shù),由散在增至集白細胞和有核上皮細胞很少(圖b)。動情后期:片狀角化上皮細胞,有核上皮細胞和白細胞3種都有,無太大差異(圖c)。動情間期:白細胞占絕大多數(shù),有核上皮細胞和角化上皮細胞很少(圖d)。表6⑤病理結果:如圖7所示。上海東寰疾病動物模型建模。楊浦區(qū)生殖疾病動物模型建模

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得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,l型棒的直徑為,***端長3-5mm,第二端長1-3mm。具體地,根據(jù)大鼠體重選擇l型棒的直徑大小:當大鼠體重在200g到不足220g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在220g到不足250g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在250g到不足300g范圍時,采用直徑為;當大鼠體重在300g到350g范圍時,采用直徑為。在另一個具體實施方式中,壓迫元件為u型棒;步驟三具體為:將u型棒的***端和第二端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。進一步地,壓迫元件采用不受磁場干擾、置入體內不會對神經(jīng)造成化學刺激以及具有一定可塑性的材料制備而成。在一個具體實施方式中,壓迫元件采用黃銅和鋅的混合物制備而成。具體地,混合物為h62黃銅,即含銅量為%~%,余量為鋅含量的黃銅。而銅、鋅皆屬于非鐵磁性物質。在另一個具體實施方式中,壓迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制備而成。pla是一種無毒無刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金屬。h62黃銅棒或pla棒在體內,即不會受磁療、電療引起的磁場、電場干擾,也不會對磁療、電療儀器及磁共振儀器產(chǎn)生不良影響。金山區(qū)品牌疾病動物模型建模