金山區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

    PMID：15082495、7561688)①HE染色②關(guān)節(jié)側(cè)視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關(guān)動(dòng)物模型1.糖尿病***1）模型構(gòu)建（PMID：30826357）使用鏈佐星（STZ）注射ApoE-/-小鼠，建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型，同時(shí)與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2）模型檢測(cè)指標(biāo)（PMID：29107826、28345659）3）生化指標(biāo)檢測(cè)4）超聲檢測(cè)5）主動(dòng)脈染色檢測(cè)2.糖尿病心肌病1）誘發(fā)性DCM模型模型構(gòu)建（PMID：29732743）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：大鼠方法：各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1，pH，現(xiàn)配現(xiàn)用)，并給予高脂飼料進(jìn)行喂養(yǎng)。①模型檢測(cè)指標(biāo)血糖檢測(cè)②HE染色③超聲心電圖2）自發(fā)性1型DCM模型3）自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1）模型構(gòu)建PMID：30862093實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：小鼠方法：糖尿病雄性db/db（+/+Leprdb/J）小鼠。喂養(yǎng)至21周2）模型檢測(cè)指標(biāo)①膠質(zhì)原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結(jié)構(gòu)松散，細(xì)胞排列紊亂GCL，神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層;INL，內(nèi)核層;ONL，外核層三、動(dòng)物模型構(gòu)建總結(jié)1.臨床資料合理性在納入臨床資料時(shí)，需關(guān)注特定疾病患者的流行病學(xué)趨勢(shì)，即疾病易發(fā)年齡，男女比例等，同時(shí)需考慮是否與體重、基因表達(dá)等具有相關(guān)性。2.模型合理性選擇合適，簡(jiǎn)便。人類疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。金山區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

1、自發(fā)性**動(dòng)物模型:未經(jīng)人為處理;自然發(fā)生;自發(fā)性**的總體評(píng)價(jià)--動(dòng)物自發(fā)性**的病因往往是由動(dòng)物的遺傳特性決定的與人癢的病因有較大距離。各動(dòng)物**生長(zhǎng)速度差異較大很難在限定時(shí)間內(nèi)獲得大量生長(zhǎng)均勻的荷瘤動(dòng)物(tumor-bearinganimals)。因此，自發(fā)性**動(dòng)物模型很少在抗**藥物的常規(guī)篩選中廣泛應(yīng)用。2、誘發(fā)性**動(dòng)物模型:在實(shí)驗(yàn)條件下:使用致*物(carcinogens);誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生**的動(dòng)物模型，它是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)**學(xué)研究的常用方法。常用于驗(yàn)證可疑致*因素的作用也越來越多地應(yīng)用干**發(fā)生機(jī)理的研究及防治效果的觀察上，在**病因?qū)W、遺傳學(xué)、生物學(xué)等方面的研究中有重要地位。由于誘發(fā)因素和條件可人為控制，誘發(fā)率遠(yuǎn)高于自然發(fā)病率故在**實(shí)驗(yàn)研究中優(yōu)于自發(fā)瘤。用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的動(dòng)物種類很多，它們因種族不同而對(duì)相同致*因素有不同的反應(yīng)性。常用的動(dòng)物以哺乳動(dòng)物為主，其中嚙齒類動(dòng)物的使用**多，應(yīng)用**廣，包括各種大鼠、小鼠、際鼠等。。寶山區(qū)口碑好的疾病動(dòng)物模型建模上海東寰告訴您如何選擇好的動(dòng)物模型。

    步驟i.將步驟h的吸附柱放入收集管，12000rpm離心2min。步驟j.吸附柱放到一個(gè)新的，在吸附柱膜**加入50～200μl滅菌水或者洗脫液，停留5min。(將無菌水或者洗脫液加熱到65℃能夠增加洗脫的得率)。步驟i.基因組dna定量，洗脫的基因組dna可以通過電泳鑒定。方法2：一種低成本基因組dna的粗提方法：步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm)，放入離心管中，加入100μl尾部消化緩沖液，注意不要剪尾太長(zhǎng)；步驟b.將離心管及其內(nèi)容物于56℃孵育過夜；步驟c.過夜后將離心管于98℃孵育13min，使蛋白酶k失活；步驟d.在微型離心機(jī)以**大轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)15min，上清直接用于pcr體系(每50μlpcr體系加入上清2μl)。尾消化緩沖液成分：50mmkcl10mmtris-hcl()％tritonx-100(b)長(zhǎng)鏈pcr反應(yīng)：長(zhǎng)鏈引物：pcrprimers1(℃):擴(kuò)增片段：5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):擴(kuò)增片段：3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述兩條擴(kuò)增片段，野生型等位基因沒有擴(kuò)增產(chǎn)物。

1、動(dòng)物模型名稱：二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：6~8周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：80~100g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法：二甲基苯并蒽(DMBA)誘導(dǎo)。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠第5對(duì)乳房直徑在各測(cè)定時(shí)間點(diǎn)與正常對(duì)照組比較有***性差異；大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化，乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生，并逐漸加重，在第9周時(shí)可見同一大鼠的多個(gè)乳腺出現(xiàn)不同程度的導(dǎo)管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現(xiàn)>3mm的乳腺*，至第24周時(shí)70%的大鼠發(fā)生乳腺*，并可見一只大鼠同時(shí)發(fā)生多個(gè)乳腺*，而同一大鼠的其他乳腺亦呈現(xiàn)出不同程度的上皮細(xì)胞增生和不典型增生，提示處于*發(fā)生的不同進(jìn)展階段。如何定義好的小鼠疾病模型？

    圖2是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對(duì)大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實(shí)施方式以下通過具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述。以下的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1、模型的制備1、腹腔注射1％戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g)，背部剃毛，碘伏消毒背部皮膚，俯臥位固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上，鋪無菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口，切開皮膚，鈍性分離椎旁肌至橫突上方，暴露腰4椎間孔，腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm，第二端12為2mm，直徑為，第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示，可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后，會(huì)對(duì)腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用；同樣的，當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后，會(huì)對(duì)腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達(dá)到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的，制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。上海東寰為您提供完善的小鼠動(dòng)物疾病模型。鹽城C57小鼠疾病動(dòng)物模型建模

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    實(shí)驗(yàn)期間每天進(jìn)行陰道涂片，觀測(cè)動(dòng)情周期變化。進(jìn)一步地，檢測(cè)***水平是指：檢測(cè)雌***(e2)、促卵泡生長(zhǎng)素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地，檢測(cè)對(duì)比卵巢重量是指：比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地，陰道涂片是指：采用陰道脫落細(xì)胞涂片法，使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型，為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動(dòng)物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語(yǔ)和短語(yǔ)如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說明圖1：e2水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖2：fsh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖3：lh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖4：大鼠體重檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖5：大鼠卵巢重量統(tǒng)計(jì)示意圖。圖6：動(dòng)情周期檢測(cè)(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：動(dòng)情前期，動(dòng)情期，動(dòng)情后期，動(dòng)情間期。圖7：he染色觀察不同方法造模對(duì)卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：空白組，2mg組，4mg組，6mg組。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下。金山區(qū)非酒肝疾病動(dòng)物模型建模

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