浙江EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過(guò)量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么？上海東寰告訴您。浙江EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒

與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。江西品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒到底有什么好處？

EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中，并滲入正在復(fù)制的DNA分子，通過(guò)基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測(cè)試劑盒相同甚至更好的檢測(cè)結(jié)果，而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測(cè)方法反應(yīng)快，效率高，反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過(guò)夜孵育，能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)，更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒應(yīng)用再哪些地方？

EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù)，可為新合成的DNA檢測(cè)與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過(guò)程中摻入修飾的核苷EdU（5-乙炔基-2-脫氧尿苷）時(shí)，可以通過(guò)快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測(cè)到它，并且對(duì)細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡(jiǎn)便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測(cè)法不同，Click-iTEdU檢測(cè)法不是基于抗體，因此并不需要DNA變性以檢測(cè)摻入的核苷。此外，Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時(shí)，Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測(cè)定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢(shì)是顯而易見(jiàn)的。上海EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)。天津哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

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