靜安區(qū)疾病動物模型建模評價

1、動物模型名稱：角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實驗動物種屬：新西蘭兔3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：2~3月齡5、實驗動物體重：1.8~2.5kg6、實驗動物環(huán)境：SPF級。1、實驗方法：角膜環(huán)鉆致兔角膜機(jī)械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進(jìn)行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼，再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒，以保持結(jié)膜清潔。開瞼，滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉，用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切，并滴入2滴氯霉素眼藥水潤洗，用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細(xì)眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮，術(shù)畢，滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。很多自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。靜安區(qū)疾病動物模型建模評價

1、動物模型名稱：堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：成年5、實驗動物體重：160-200g6、實驗動物環(huán)境：SPF級，1、實驗方法：氫氧化鈉致大鼠角膜化學(xué)性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體，將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s，飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過多的堿液，將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜**90s后移去，立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。徐匯區(qū)阿爾茲海默癥疾病動物模型建模小鼠疾病模型有助于遺傳性疾病致病基因的發(fā)現(xiàn)與驗證。

1、動物模型名稱：淚腺摘除聯(lián)合新潔爾滅致干眼兔模型2、實驗動物種屬：新西蘭兔3、實驗動物性別：雌雄不限4、實驗動物年齡：2~3月齡5、實驗動物體重：1.8~2.5kg6、實驗動物環(huán)境：SPF級，1、實驗方法：摘除淚腺聯(lián)合新潔爾滅誘導(dǎo)。兔耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射進(jìn)速眠新Ⅱ進(jìn)行麻醉。麻醉后，進(jìn)行淚腺摘除手術(shù)，眼瞼局部以75％酒精消毒，鋪洞巾，于眼下眶周部做一切口，小心分離皮膚、肌肉、筋膜，尋找到淚腺后完整摘除之，然后縫合創(chuàng)口。術(shù)畢，滴妥布霉素**眼液2滴、涂四環(huán)素可的松眼藥膏，共7d。術(shù)后兔創(chuàng)口愈合后進(jìn)行給藥造模。眼滴0.1%新潔爾滅溶液，2次/天，2滴/次，連續(xù)用藥14d。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：SchirmerI試驗淚液分泌減少，1%虎紅角膜染色試驗虎紅著色評分值高，角膜出現(xiàn)病理改變。

    f1代小鼠southern印記的5’探針引物如下：primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印記的目標(biāo)片段大小如下：5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步驟c、采用限制性內(nèi)切酶bamhi和avrii對dna進(jìn)行切割；瓊脂糖凝膠電泳分離dna；步驟d、將dna轉(zhuǎn)到尼龍膜上；步驟e、探針變性后，與dna分子進(jìn)行雜交，nbt/bcip化學(xué)顯色法顯色，拍照觀察。southern雜交結(jié)果如圖6所示，可以看到：6、8、9號pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割，在，wt小鼠只在，如果被avrii切割，pirb基因敲除小鼠在，wt小鼠只在。步驟6、將f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子pirb基因敲入小鼠，即為本發(fā)明所述小鼠pirb基因敲入的動物模型。將本發(fā)明獲得的動物模型f2代純合子小鼠與同品系小鼠組織/細(xì)胞特異性cre表達(dá)的小鼠雜交，獲得f3代小鼠，可以實現(xiàn)在不同組織或者細(xì)胞類型中敲入pirb基因。對f3代小鼠進(jìn)行基因型的鑒定：含有無(pirb-cwt)、一個(pirb-chet)或者兩個。構(gòu)建人源移植瘤模型需要合適的免疫缺陷小鼠想知道如何選擇？

人乳腺*裸鼠模型：1、實驗方法：**細(xì)胞移植法、**組織塊移植法。a.**細(xì)胞移植：**細(xì)胞在二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)至足夠數(shù)量。取對數(shù)生長期的**細(xì)胞，用0.25％胰酶消化，用不完全培養(yǎng)液配成濃度不低于1×107個/mL的細(xì)胞懸液，于小鼠乳腺脂肪墊注射0.2mL細(xì)胞懸液，注意每次注射前需混勻細(xì)胞懸液。b.**組織塊移植：**接種于動物長至1cm時，取新鮮的**組織塊，在不完全培養(yǎng)液中漂洗，切取生長良好、魚肉裝的瘤組織，將其剪切成約1.5mm直徑的小**塊。將動物接種部位消毒，剪一小口，將小**塊經(jīng)這一小口接種到小鼠乳腺脂肪墊，如切口較大需要縫合切口。動物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機(jī)制研究。普陀區(qū)提供疾病動物模型建模

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1、動物模型名稱：低鐵飼料聯(lián)合放血致缺鐵性貧血大鼠模型2、實驗動物種屬：SD大鼠3、實驗動物性別：雌性4、實驗動物年齡：初斷乳5、實驗動物體重：50~70g6、實驗動物環(huán)境：SPF級 1、實驗方法：低鐵飼料聯(lián)合放血法誘導(dǎo)。SD大鼠每天給予低鐵飼料和超純水飼養(yǎng)，并每周通過眼底靜脈叢放血1mL，連續(xù)3周。2、檢測標(biāo)準(zhǔn)：血紅蛋白含量明顯下降，紅細(xì)胞內(nèi)游離原卟啉明顯升高。1.提供動物模型構(gòu)建過程中的原始實驗記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動物或相關(guān)組織材料。靜安區(qū)疾病動物模型建模評價

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