江西咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關(guān)鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測，此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目，或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性，熒光團分子、染料進入細胞后，將會共價結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團上，從而使染料能夠長時間停留在細胞中。經(jīng)過之后的細胞分裂階段，各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析，即可測定出自標記結(jié)合起，單個細胞或細胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。EdU細胞增殖檢測試劑盒的發(fā)展趨勢如何？江西咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

CFDASE法(C0051、C1031)基于細胞熒光示蹤的原理能檢測到單個的增殖細胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細胞，檢測靈敏度不是很高，通常單適用于流式細胞儀檢測。在進行科學研究時，上述這些基于細胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補充性檢測方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中湖南咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒公司你知道EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點嗎？

細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物，其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見，能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中，EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應，把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性，廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點，操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散，無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應，能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。

細胞增殖分析是細胞生長和分化研究的關(guān)鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評估化學藥物的毒性和對細胞生長的控制作用。經(jīng)過之后的細胞分裂階段，各個子代細胞會從母細胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細胞儀對熒光強度進行分析，即可測定出自標記結(jié)合起，單個細胞或細胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細胞代謝參數(shù)進行細胞增殖檢測，此類分析可以報告出總細胞數(shù)目和活細胞數(shù)目，或者測定出單個細胞內(nèi)的DNA合成情況。細胞增殖染料稀釋分析主要基于細胞膜通透性，熒光團分子、染料進入細胞后，將會共價結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團上，從而使染料能夠長時間停留在細胞中。EdU細胞增殖檢測試劑盒應用再哪些地方？

保存條件：-20℃保存，一年有效。BiotinAzide、DAB顯色液A和DAB顯色液B須避光保存。注意事項：ClickAdditive配制成溶液后請注意適當分裝。如果溶解后有白色物質(zhì)析出，請上下顛倒多次，待全部溶解后使用。如果該溶液顏色變成棕色，說明該組分的有效成分已失效，請棄用。DAB對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。由于本產(chǎn)品需要銅離子催化進行點擊反應，請注意如下的兼容性問題及解決方案。本產(chǎn)品完全兼容有機類染料如Alexa Fluor®系列普通染料及fluorescein (FITC)、Allophycocyanin (APC)及APCE-tandems染EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。河南EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家

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另一方面，EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應非常迅速，被稱作點擊反應(Clickreaction)，其反應原理參見圖1。通過點擊反應，新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記，從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。圖1.BeyoClick?EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細胞DNA標記上生物素等探針。本試劑盒反應簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應，無需DNA變性，只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU，并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。江西咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒原理

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