江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過(guò)量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么？上海東寰告訴您。江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性，就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析，該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響，因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí)，然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)（每公斤小鼠注射5mgEdU），分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織，制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。北京哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處有哪些？

    磺酰羅丹明B細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(SμlforhodamineB,SRB)是一種替代MTT法的細(xì)胞活性檢測(cè)方法。SRB可與生物大分子中的堿性氨基酸結(jié)合，在490nm～520nm波長(zhǎng)處其OD值與活細(xì)胞數(shù)成良好的直線關(guān)系。在515nm的OD讀數(shù)，可用做細(xì)胞數(shù)的定量。儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。有效期：一年。注意事項(xiàng)：●本試劑盒供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或。●禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果?！癖容^好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑?！癖苊馄つw或粘膜與試劑接觸。●正式實(shí)驗(yàn)前，建議先做幾個(gè)孔摸索接種細(xì)胞的數(shù)量，在1000-100000之間摸細(xì)胞數(shù)量。產(chǎn)品特點(diǎn)：●操作時(shí)間短，細(xì)胞固定和染色需90分鐘左右?！駴](méi)有嚴(yán)格時(shí)間限制，固定后或SRB結(jié)合后的細(xì)胞均可存放，樣品7天后測(cè)定的OD值下降不超過(guò)2%?！馭RB法對(duì)于測(cè)定懸浮細(xì)胞無(wú)細(xì)胞損失，結(jié)果靈敏準(zhǔn)確，重復(fù)性好。

傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過(guò)夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒如何發(fā)揮重要作用？上海東寰告訴您。

EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。本試劑盒反應(yīng)簡(jiǎn)單、檢測(cè)靈敏度高。本試劑盒基于簡(jiǎn)單高效的點(diǎn)擊反應(yīng)，無(wú)需DNA變性，只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標(biāo)記出摻入的EdU，并且可以檢測(cè)到單個(gè)細(xì)胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過(guò)點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些？浙江如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

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CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測(cè)靈敏度不是很高，通常單適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí)，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過(guò)程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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