山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

EdU法中的點(diǎn)擊反應(yīng)原理圖。摻入到細(xì)胞DNA中的EdU與熒光探針或生物素等標(biāo)記的疊氮化物，在銅離子的催化下發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，使細(xì)胞DNA標(biāo)記上熒光探針或生物素。細(xì)胞增殖檢測是評估細(xì)胞活性、遺傳毒性及抗藥物效果等的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)手段。細(xì)胞增殖檢測的方法按照原理通?？梢苑譃槲孱悾耗p傷檢測、代謝活性檢測、ATP水平測定、DNA合成檢測和細(xì)胞熒光標(biāo)記檢測法。目前公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒如何去使用呢？山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個(gè)的增殖細(xì)胞，同時(shí)也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品，也可以檢測組織切片，但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法，如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。上海正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價(jià)格上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動(dòng)物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中，并滲入正在復(fù)制的DNA分子，通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細(xì)胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果，而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快，效率高，反應(yīng)時(shí)間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育，能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)，更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。

直接測定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測的準(zhǔn)確方法之一，EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU（5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷），在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中，利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色（BrdU）檢測方法相比(圖1)，更簡單，更快速，更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500，在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散，不需要嚴(yán)格的樣品變性（酸解、熱解、酶解）處理，有效地避免了樣品損傷，有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況，具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和，我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇，也可以用于培養(yǎng)細(xì)胞分析及組織切片分析（圖2）。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家便宜？上海東寰告訴您。

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細(xì)胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí)，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些？上海東寰告訴您。山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

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保存條件：4℃或-20℃保存，MTT需避光保存，一年有效；MTT配制成溶液后需-20℃避光保存；Formazan溶解液也可以室溫保存。注意事項(xiàng)：由于使用96孔板進(jìn)行檢測，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。MTT溶劑在低溫情況下會(huì)凝固，使用前請室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。MTT配制成溶液后為黃色，需避光保存，長時(shí)間光照會(huì)導(dǎo)致失效。當(dāng)顏色變?yōu)榛揖G色時(shí)，請勿使用。MTT溶液在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。山東咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

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