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來源: 發(fā)布時(shí)間:2023-09-03

細(xì)胞增殖能力的檢測是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法,能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

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EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。北京提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些?

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細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測

    直接測定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測的準(zhǔn)確方法之一,的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析,可以有效地檢測處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比(圖1),更簡單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇。 EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒怎樣使用?上海東寰告訴您。

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上海東寰活細(xì)胞能將四咪唑鹽(如MTT、XTT、WST-1)還原成有色的甲瓚或甲瓚鹽(Formazan),可通過分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測。CellCountingKit–8(96992)和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被細(xì)胞內(nèi)脫氫酶生物還原后生成的橙色甲臜染料能夠溶解在組織培養(yǎng)基中,生成的甲臜量與活細(xì)胞數(shù)量成正比?;贑CK-8(WST-8)的試劑盒能高度準(zhǔn)確地檢測細(xì)胞增殖,比MTT法及XTT法的靈敏度高5倍,能檢測更低的細(xì)胞數(shù)目。該試劑盒可適用于96孔板培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時(shí)的注意事項(xiàng)。江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買

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