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    Jurkat細胞只用EdU標記(左列)，或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時后染色，然后通過流式細胞儀進行檢測。從流式結果圖中可以看出，EdU標記的細胞有較高比例的綠色熒光陽性細胞，呈現綠色熒光陰性(弱染色)和陽性(強染色)的兩個峰，分別對應于未增殖細胞和增殖細胞。經過Hydroxyurea處理的細胞，綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失，剩下一個綠色熒光陰性的峰。Hela細胞只用EdU標記(左列)，或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時后染色（步驟染Hoechst，方便觀察增殖細胞比例），然后通過熒光顯微鏡進行檢測。鏡下可見，*EdU標記的細胞有一部分染上綠色熒光的增殖細胞，未增殖細胞的細胞核呈藍色單染。 使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處有哪些？咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

    試劑盒以外自備試劑和儀器：●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標儀使用方法：使用注意事項：●接種時注意細胞懸液一定要混勻，以避免細胞沉淀下來，導致每孔中的細胞數量不等，可以每接種幾個孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā)，為了減少誤差，建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基，而不作為指標檢測孔?！衽囵B(yǎng)時間根據細胞種類的不同和每孔內細胞數量的多少而異?！裼盟蛞宜嵯醇毎麜r充滿孔后保持一會倒掉即可，也可以用排或洗板機?！馩D值在1-2之間較好。以96孔板為例：1．取出培養(yǎng)好待測的96孔板。2．在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細胞加100μl固定液)，靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時。(貼壁細胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液；懸浮細胞必須直接加入固定液，輕加在培養(yǎng)液面，靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時，可使懸浮細胞固定在培養(yǎng)孔底部)。 天津如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好？上海東寰告訴您！

快速—–無需過夜，省卻抗原抗體反應。整個檢測過程只需 2.5 小時，縮短實驗周期。準確—–標記率高且無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細胞核邊緣清晰完。靈敏—–無需抗體，檢測染料為BrdU抗體的1/500，更容易擴散，即使單個增殖細胞也能準確檢測。兼容—–對樣品幾乎無損傷，允許與多種抗體或熒光蛋白同時標記，能夠同時檢測細胞其他性狀特征。本試劑盒適用于培養(yǎng)的細胞或組織樣品，也適用于組織切片，可以檢測到細胞或組織樣本中的單個增殖細胞，也可以對細胞或組織樣本總體的細胞增殖情況進行定量分析。

但該方法由于有放射性污染并且很難實現單細胞檢測而受到很大的限制，隨后逐漸被基于抗體檢測的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多，且需要使用BrdU抗體，影響因素較多，穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體，有時會和其它目的蛋白基于抗體的檢測相互產生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點擊反應，無需使用抗體、操作便捷、檢測靈敏度高，是一種在BrdU法基礎上升級換代的新方法，將會逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細胞活性的細胞增殖檢測方法，能檢測到細胞的總體增殖效果，但無法檢測到單個的增殖細胞。EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點是什么？上海東寰告訴您。

EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)，中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷，是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷，thymidine)類似物，EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面，EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應非常迅速，被稱作點擊反應(Clickreaction)，其反應原理參見圖1。通過點擊反應，新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記，從而可以使用適當的檢測設備檢測到增殖的細胞。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。湖南EdU細胞增殖檢測試劑盒價格

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BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結合。法使用小分子標記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測結果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測快速。相對于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測新合成的DNA，所需時間縮短。經本試劑盒處理后，增殖的細胞呈棕色，可以用普通光學顯微鏡進行觀察。HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細胞用本試劑盒檢測細胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側一列)；EdU(10μM)孵育2小時組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預處理0.5小時后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側一列)。咨詢EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商

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