湖南咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

來源: 發(fā)布時間:2023-12-05

更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡單--無需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測方法,簡單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無需抗體,檢測染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴散,即使單個增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測;更快速--無需過夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個檢測周期單需2.5小時;更兼容--對樣品幾乎無損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標(biāo)記,能夠同時檢測細(xì)胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合,導(dǎo)致BrdU、Hoechst染色彌散,邊緣模糊不清;而EdU邊緣清晰完整,檢測更靈敏、更準(zhǔn)確上海EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的價格是多少?湖南咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

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為了與其他熒光共同使用,東寰生物提供多種染料供選擇,覆蓋常用檢測通道,方便您輕松選擇適合的染料,比較大限度地擴展第三方染色的適用范圍,比較大限度地滿足您的檢測儀器要求,完全解決您的實驗難題。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記(如P65抗體)等進行多重標(biāo)記,從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息,更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。天津如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。

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    熒光試劑請避光保存。反應(yīng)緩沖液10X1ml催化劑溶液25x400ulTAMRA紅色熒光溶液400x25ul緩沖添加劑粉末200mgHoechstX20ul使用前須知該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。實驗步驟(以24孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強度。細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸。

細(xì)胞增殖&細(xì)胞計數(shù)檢測細(xì)胞增殖是生物體生長、發(fā)育、繁殖以及遺傳的基礎(chǔ),是生物體的重要生命特征。檢測細(xì)胞在培養(yǎng)基或組織中的生長速率,對于細(xì)胞生長和分化研究至關(guān)重要。在藥物開發(fā)過程中也常被用于評估藥物的毒性和對細(xì)胞生長的抑制情況。細(xì)胞增殖檢測通常是基于DNA含量或細(xì)胞代謝實現(xiàn)的,主要的研究方向為對活細(xì)胞的代謝活性的檢測(基于WST、XTT、MTT等)及對DNA合成的檢測(基于BrdU的免疫法或EdU的點擊化學(xué)法),可通過體內(nèi)成像、微孔板或流式細(xì)胞術(shù)檢測等多種技術(shù)進行細(xì)胞示蹤。使用四唑鹽進行代謝活性檢測通過添加四咪唑鹽到細(xì)胞中可進行線粒體內(nèi)酶代謝活性的測定。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒應(yīng)用再哪些地方?

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本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和Triton X-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進入細(xì)胞并發(fā)生點擊反應(yīng),不會影響細(xì)胞形態(tài),不會影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測,也不會影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測細(xì)胞核)。而BrdU法為了使大分子的BrdU抗體進入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對雙鏈DNA進行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick? EdU法檢測原理的比較參見圖2。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒在社會上的重要性。湖北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒說明書

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EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測:EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。湖南咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒