長寧區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

上海東寰生物科技有限公司模型特點(diǎn)：煙霧、空氣污染物或者有害氣體誘導(dǎo)模型使用的物質(zhì)、暴露的劑量、頻次和時(shí)間不盡相同；脂多糖造模時(shí)間短，可用來模擬急性加重反應(yīng)，但不能反應(yīng)慢性病變的過程，使動(dòng)物機(jī)體內(nèi)存在致敏物，然后氣道局部激發(fā)（反復(fù)霧化或者滴鼻激發(fā)），誘導(dǎo)。模型特點(diǎn)：造模時(shí)的致敏激發(fā)的時(shí)間間隔、劑量和頻次不盡相同，通常通常需要和其他造模方法聯(lián)用。2.基因模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠獲得方式：直接購買模型特點(diǎn)：α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是經(jīng)典的COPD轉(zhuǎn)基因模型，更準(zhǔn)確地理解易感基因的致病機(jī)制。這類動(dòng)物疾病模型是指各種疾病共同性的一些病理變化過程的模型。長寧區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱：腹主動(dòng)脈縮窄致心衰大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：180~220g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法：采用主動(dòng)脈縮窄法建立模型大鼠麻醉后，仰臥位固定、去腹毛、消毒，沿腹正中線切開皮膚及肌層，分離出腹主動(dòng)脈，在腎動(dòng)脈上方將腹主動(dòng)脈與鈍頭8號(hào)探針一起結(jié)扎后，小心抽出針頭。手術(shù)造模后大鼠正常飼養(yǎng)3個(gè)月。大鼠終末體重(BW),心室重(VW),計(jì)算心體比(VW/BW),并進(jìn)行心功能檢測(cè),包括心率(HR)、左室收縮壓(LVSP)、左室舒張末壓(LVEDP)及左室最大壓力上升及下降速度(±dp/dtmax),并對(duì)心肌組織進(jìn)行病理學(xué)檢測(cè).2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組大鼠VW/BW明顯增加，LVSP明顯降低，LVEDP明顯升高，±dp/dtmax則***減小，與正常對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果表明心肌出現(xiàn)典型心衰樣病理改變。品質(zhì)好的疾病動(dòng)物模型建模供應(yīng)商大量的遺傳變異可作為研究人類疾病的借鑒。

急性肺損傷模型大鼠(右圖)與對(duì)照組大鼠（左圖）肺組織HE染色6.模型又名支氣管。支氣管是由多種細(xì)胞及細(xì)胞組分參與的慢性氣道炎癥，此種炎癥常伴隨引起氣道反應(yīng)性增高，導(dǎo)致反復(fù)發(fā)作的喘息、氣促、胸悶和/或咳嗽等癥狀，多在夜間和/或凌晨發(fā)生，此類癥狀常伴有而多變的氣流阻塞，可以自行或通過而逆轉(zhuǎn)。6.1小鼠模型建立SPF級(jí)Balb/c雌性小鼠，體重約20g。采用OVA致敏誘導(dǎo)建立模型。OVA致敏誘導(dǎo)的模型：分別于第1、8、15天腹腔注射OVA混懸液（含OVA1g/L，氫氧化鋁5g/L）0.2ml，實(shí)驗(yàn)第21天起將小鼠置于霧化激發(fā)器內(nèi)，給予2%OVA生理鹽水霧化激發(fā)

實(shí)驗(yàn)期間每天進(jìn)行陰道涂片，觀測(cè)動(dòng)情周期變化。進(jìn)一步地，檢測(cè)***水平是指：檢測(cè)雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進(jìn)一步地，檢測(cè)對(duì)比卵巢重量是指：比較各組大鼠雙側(cè)卵巢臟器系數(shù)。進(jìn)一步地，陰道涂片是指：采用陰道脫落細(xì)胞涂片法，使用染色劑為亞甲基藍(lán)。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型，為基礎(chǔ)研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動(dòng)物模型奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明使用的各種術(shù)語和短語具有本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的一般含義。提及的術(shù)語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準(zhǔn)。附圖說明圖1：e2水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖2：fsh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖3：lh水平檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖4：大鼠體重檢測(cè)結(jié)果示意圖。圖5：大鼠卵巢重量統(tǒng)計(jì)示意圖。圖6：動(dòng)情周期檢測(cè)(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：動(dòng)情前期，動(dòng)情期，動(dòng)情后期，動(dòng)情間期。圖7：he染色觀察不同方法造模對(duì)卵泡形態(tài)的影響(光鏡下10倍)示意圖，其中，a、b、c、d依次為：空白組，2mg組，4mg組，6mg組。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。然而，本發(fā)明的范圍并不限于下述實(shí)施例。本領(lǐng)域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下。通過小鼠疾病模型的構(gòu)建有助于我們深入揭示潛在致病基因作用機(jī)制。

r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠，圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖，小鼠出生后20天進(jìn)行pcr鑒定，若有陽性小鼠出生，則表示轉(zhuǎn)基因已經(jīng)整合到生殖細(xì)胞。(1)通過pcr方法對(duì)獲得的f1代小鼠進(jìn)行基因型的鑒定：(a)dna的提取：方法1：采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2～5mm)，放入離心管中，加入180μlbuffergl，20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內(nèi)于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質(zhì)。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇，充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上，將步驟d得到的樣品加到吸附柱里，12000rpm離心2min，棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa，12000rpm離心1min，棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb，12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意：bufferwb需要與100％乙醇預(yù)混，沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復(fù)步驟g一次?？梢試?yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)材料的可比性。長寧區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

避免了在人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)所帶來的風(fēng)險(xiǎn)。長寧區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

pirb的mrna和蛋白表達(dá)水平***增加。在cns，pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受體，參與神經(jīng)元突起芽發(fā)和生長錐塌陷，抑制神經(jīng)元軸突再生和突觸可塑性。pirb的細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d3-d6)介導(dǎo)了pirb與nogoa的結(jié)合。近年來關(guān)于阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease，ad)研究還發(fā)現(xiàn)，pirb是aβ42寡聚體的高親和力受體，親和力達(dá)到納摩爾水平。pirb的前兩個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)了aβ42寡聚體和pirb的相互作用，導(dǎo)致絲切蛋白(cofilin)信號(hào)通路****組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)。長寧區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模