北京品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-19

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒直接測(cè)定DNA合成是細(xì)胞增殖檢測(cè)的準(zhǔn)確方法之一開(kāi)發(fā)的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒采用另外一種胸腺嘧啶核苷酸類似物-EdU(5-乙炔基-2’脫氧尿嘧啶核苷),在細(xì)胞增殖時(shí)EdU能夠插入正在復(fù)制的DNA分子中,利用EdU與染料之間的點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,可以有效地檢測(cè)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法相比(圖1),更簡(jiǎn)單,更快速,更準(zhǔn)確。EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織的整體水平上觀測(cè)細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測(cè)速度。EdU分析方法反應(yīng)條件比較溫和,我們提供的一系列AndyFluor?染料標(biāo)記可以用于多色通道選擇,也可以用于培養(yǎng)細(xì)胞分析及組織切片分析上海東寰向您介紹EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的好處。北京品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

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EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù),可為新合成的DNA檢測(cè)與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過(guò)程中摻入修飾的核苷EdU(5-乙炔基-2-脫氧尿苷)時(shí),可以通過(guò)快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測(cè)到它,并且對(duì)細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡(jiǎn)便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測(cè)法不同,Click-iTEdU檢測(cè)法不是基于抗體,因此并不需要DNA變性以檢測(cè)摻入的核苷。此外,Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時(shí),Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測(cè)定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢(shì)是顯而易見(jiàn)的。山東品牌EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)如何?

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細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是直接檢測(cè)細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過(guò)檢測(cè)DNA合成來(lái)檢測(cè)細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。

建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒前的安全檢查。

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EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時(shí)的孵育時(shí)間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒發(fā)揮的重要作用。湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒評(píng)價(jià)

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本試劑盒小包裝C0085S如果用于培養(yǎng)的細(xì)胞(6孔板)的檢測(cè),可以檢測(cè)50個(gè)樣品,每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為500μl的Click反應(yīng)液;如果用于96孔板檢測(cè),可以檢測(cè)500個(gè)樣品,每個(gè)樣品的檢測(cè)體系為50μl的Click反應(yīng)液;如果用于12孔、24孔、48孔或384孔板樣品的檢測(cè),分別可以檢測(cè)125、250、350和1250個(gè)樣品,每個(gè)樣品推薦的Click反應(yīng)液用量為200μl、100μl、70μl和20μl。小包裝如果用于冰凍或石蠟切片的檢測(cè),可以檢測(cè)125-250個(gè)樣品,每個(gè)樣品的反應(yīng)體系為100-200μl的Click反應(yīng)液。大包裝C0085L可檢測(cè)樣品的數(shù)量為小包裝C0085S的4倍。北京品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司