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注:1)培養(yǎng)時(shí)間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長(zhǎng)狀態(tài);2)孵育時(shí)間至少2小時(shí),可延長(zhǎng)至24小時(shí)后再檢測(cè)也可以。4、以1×PBS清洗細(xì)胞兩次,每次5分鐘,以除去未摻入RNA的EU殘留。注:貼壁不牢的細(xì)胞可降低清洗強(qiáng)度。細(xì)胞的固定和通透1、每孔加入150μl細(xì)胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;注:1)該試劑盒配備了細(xì)胞固定液,也可以使用含4%多聚甲醛的PBS來(lái)進(jìn)行細(xì)胞固定;2)如果使用其他的細(xì)胞固定劑建議用DEPC水來(lái)配置,避免RNA酶降解細(xì)胞內(nèi)的RNA。2、每孔加入150μl2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘;3、棄甘氨酸溶液,每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;4、每孔加入300μlTritonX-100細(xì)胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細(xì)胞通透溶液;5、每孔加入300μlPBS洗液,室溫清洗5分鐘;EU染色1、通過(guò)用10:1去離子水稀釋10×反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1×EU反應(yīng)緩沖液;2、按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過(guò)±20%,且該粉末較易氧化,使用后請(qǐng)旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換。上海東寰告訴您使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的便捷性。湖北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司
建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性河南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒給社會(huì)帶來(lái)了什么好處?
EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè),就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。
該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請(qǐng)于4°C條件下避光濕潤(rùn)保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測(cè)。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn),操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒在社會(huì)上的重要性。
蛋白抽提/WesternBlotting技術(shù)服務(wù)WesternBlotting技術(shù)服務(wù)(DH1004)一.服務(wù)內(nèi)容1、蛋白提取:從人或動(dòng)物細(xì)胞、組織,細(xì)胞等樣品中提取蛋白樣品。2、蛋白定量:對(duì)樣品中蛋白進(jìn)行半定量分析。3、WesternBlot檢測(cè)(1)電泳:聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)分離蛋白樣品。(2)濕法轉(zhuǎn)印。(3)雜交:用抗體鑒定膜上的特定蛋白。(4)顯色:ECL熒光顯色,黑條帶白背景照片4、提供蛋白內(nèi)參檢測(cè)(所有內(nèi)參抗體均不收取費(fèi)用)。5、預(yù)實(shí)驗(yàn)及正式實(shí)驗(yàn)服務(wù)。二.樣品要求1、細(xì)胞>1×10^7;組織>30mg;細(xì)菌濕重>1mg等。2、樣品蛋白濃度>1mg/ml,蛋白量>200ug/樣品。3、建議提供目的蛋白陽(yáng)性表達(dá)樣品(純蛋白、有陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞或組織、商品化的陽(yáng)性對(duì)照產(chǎn)品等)作為陽(yáng)性對(duì)照。注:若有特殊處理的樣品,請(qǐng)盡可能出示相關(guān)材料(具有保密性的材料除外)。三.收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)服務(wù)項(xiàng)目免疫學(xué)檢測(cè)服務(wù)內(nèi)容周期產(chǎn)物/報(bào)告價(jià)格(元)DH1004-01樣品準(zhǔn)備總蛋白提取、定量、質(zhì)控3天總蛋白質(zhì)控報(bào)告100元/樣DH1004-02免疫印跡(WB)WB預(yù)實(shí)驗(yàn),質(zhì)控WB體系5-10天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜WB檢測(cè)正式實(shí)驗(yàn)10-15天完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告1000元/膜四、客戶提供材料1、樣品:新鮮或正確保存的樣品以及與樣品相關(guān)的必要資料。dU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒找哪家比較安心?上海東寰不錯(cuò)。湖南品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理
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EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。本試劑盒可以檢測(cè)到細(xì)胞或組織樣品中單個(gè)的增殖細(xì)胞,同時(shí)也可以對(duì)細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測(cè)。本試劑盒可以檢測(cè)培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品,也可以檢測(cè)組織切片,但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測(cè)是評(píng)估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。湖北口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司