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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒更準(zhǔn)確--無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免變性帶來(lái)的樣品損傷,確保細(xì)胞核邊緣清晰完整;更簡(jiǎn)單--無(wú)需抗原抗體反應(yīng),基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法,簡(jiǎn)單高效,反應(yīng)單需要幾分鐘;更靈敏--無(wú)需抗體,檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500,更容易擴(kuò)散,即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè);更快速--無(wú)需過(guò)夜,省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟,完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí);更兼容--對(duì)樣品幾乎無(wú)損傷,更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。河北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)
避免反復(fù)凍融。如短時(shí)間內(nèi)需多次重復(fù)使用,請(qǐng)于4℃避光保存,有效期半年。使用前須知該試劑是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1、蓋玻片2、1×PBS()(用DEPC水配置)3、含TritonX-100的PBS(用DEPC水配置)4、甘氨酸溶液(2mg/ml)(用DEPC水配置)5、培養(yǎng)板或培養(yǎng)皿實(shí)驗(yàn)參考96孔板48孔板24孔板12孔板6孔板EU培養(yǎng)基100μl200μl300μl500μl1ml染色反應(yīng)液100μl200μl300μl500μl1ml實(shí)驗(yàn)步驟(以96孔板,HK2貼壁細(xì)胞為例)細(xì)胞培養(yǎng)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,以每孔4×103~1×105細(xì)胞接種于96孔板中,培養(yǎng)至正常狀態(tài)。EU標(biāo)記1、將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EU溶液,制成2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基;2、提前將2×EU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得1×EU溶液,其中EU的終濃度為500μM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因?yàn)檫@樣可能會(huì)影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒(méi)過(guò)細(xì)胞為宜;3、每孔加入300μl含EU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時(shí),棄培養(yǎng)基。湖北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的基本結(jié)構(gòu)級(jí)應(yīng)用。
細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究的關(guān)鍵,在藥物開(kāi)發(fā)階段常用來(lái)評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的控制作用。經(jīng)過(guò)之后的細(xì)胞分裂階段,各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析,即可測(cè)定出自標(biāo)記結(jié)合起,單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè),此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目,或者測(cè)定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性,熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后,將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上,從而使染料能夠長(zhǎng)時(shí)間停留在細(xì)胞中。
EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè):EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。上海哪家EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒值得信賴?
細(xì)胞增殖是評(píng)價(jià)細(xì)胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法通過(guò)檢測(cè)滲入DNA復(fù)制期間的EdU,借助熒光檢測(cè)工具即可準(zhǔn)確地檢測(cè)出新增殖的細(xì)胞,快速統(tǒng)計(jì)處于S期的細(xì)胞百分?jǐn)?shù),分析細(xì)胞增殖情況。該方法簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè),尤其適用于高通量篩選試驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過(guò)基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)?河北如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)
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EdU染色(a)通過(guò)用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過(guò)±20%,且該粉末較易氧化,使用后請(qǐng)旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換。(c)按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制:該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理,固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。河北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)買(mǎi)