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來源: 發(fā)布時間:2021-09-12

通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。注:貼壁不牢的細胞可降低清洗強度。EdU細胞增殖檢測試劑盒常見的用途有哪些?上海東寰告訴您。天津哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書

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細胞增殖的研究方法有很多,主要包括:BrdU,EdU,CCK8等方法。其中EdU檢測方法是新的細胞增殖檢測方法。細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式產(chǎn)生新的個體。真核生物的分裂依據(jù)過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數(shù)分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、等一切真核生物中的一種普遍的分裂方式,是真核細胞增殖的主要方式。減數(shù)分裂是生殖細胞形成時的一種特殊的有絲分裂。山東哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒評價上海東寰告訴您什么是EdU細胞增殖檢測試劑盒?

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細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標(biāo)。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一種胸腺嘧啶核苷類似物,其連有的炔烴基團在天然化合物中很少見,能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細胞固定化和透化處理,能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。

該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測。能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。上海東寰與您分享EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要性。

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EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細胞增殖時期代替T滲入正在復(fù)制的DNA分子,通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性,通過檢測EdU標(biāo)記便能準(zhǔn)確地反映細胞的增殖情況。與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細胞增殖等現(xiàn)象。EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點是什么?上海東寰告訴您。江西哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

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EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點擊反應(yīng),新合成的DNA會被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細胞。EdU檢測法中的點擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。天津哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書

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