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超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是樣本在力的作用下,通過超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來,而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效,可同時(shí)濃縮和純化分子,一般來說超濾的回收率能夠達(dá)到90%以上,因此得到許多人的青睞。一種超濾離心管,包括主管,主管為頂部開口底部封閉結(jié)構(gòu),主管開口處安裝有頂蓋,主管內(nèi)安裝有內(nèi)管,內(nèi)管上下貫通,內(nèi)管底面貼合有超濾膜,超濾膜將內(nèi)管底面包覆,超濾膜底面貼合有支撐板,超濾膜位于內(nèi)管底面與支撐板之間,內(nèi)管底部安裝有底托,內(nèi)管配合底托將超濾膜、支撐板壓緊,內(nèi)管、超濾膜、支撐板、底托與主管中位于底托以下的容腔空間連通。超濾離心管適用于從細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、尿液等樣品中提取蛋白質(zhì)、核酸、多糖等大分子化合物。重慶外泌體超濾離心管
離心超濾裝置用于濃縮和澄清過濾生物樣品,蛋白純化,顆粒物去除,血漿或血清過濾,以及從細(xì)胞裂解液或細(xì)胞培養(yǎng)上清去除細(xì)胞或細(xì)胞碎片。提供一系列離心設(shè)備,快速安全處理100 μl到100ml樣品??蛇x拋棄型和可重復(fù)使用超濾裝置。超濾離心濃縮管,用于生物樣品濃縮。離心超濾管,簡(jiǎn)單快速,一步離心完成樣品濃縮,起始樣品體積可達(dá)500μl。可放入2.2ml角轉(zhuǎn)子離心。垂直膜配合狹長(zhǎng)的流道,有效地避免濾膜堵塞,提高濃縮速度,即使顆粒含量高的溶液,也同樣能達(dá)到快速濃縮。在30分鐘內(nèi)就可達(dá)到超過90%的濃縮回收率。死端結(jié)構(gòu)避免離心干燥樣品。0.5ml-20ml樣品處理量的超濾管,截留分子量2KDa-100KDa,規(guī)格齊全,濃縮回收率高、流速更快,較高達(dá)12000g的高速離心機(jī),機(jī)械強(qiáng)度更好,質(zhì)量更好,價(jià)格更優(yōu)惠。湖州蛋白分離離心管定制超濾離心管適用于從細(xì)胞培養(yǎng)基、血漿、尿液等樣品中分離蛋白質(zhì)、核酸、多糖等大分子化合物。
超濾離心管是內(nèi)部裝有超濾膜的用于濃縮和凈化生物樣本的一次性耗材。15ML的超濾離心管可處理樣品量達(dá)20ML,具有快速超過濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進(jìn)行濃縮液回收。豎式設(shè)計(jì)以及其雙面的超大過濾面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進(jìn)行80倍濃縮。典型的處理時(shí)間為15至40分鐘。豎式設(shè)計(jì)將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至低,過濾裝置中的物理止濾點(diǎn)防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。的離心管有超過7種不同的截留分子量(截留分子量,MWCO)3Kda,5Kda,10Kda,30Kda,50Kda,100Kda,500Kda等。
超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白,在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子,但還有些問題還是向園子里的大蝦請(qǐng)教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子,不知道有沒有誰以前做過的,有關(guān)于轉(zhuǎn)速,時(shí)間給一些建議,另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理?離心之后回收蛋白時(shí)怎么盡量減少損失?如果要把管子重復(fù)利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是將其浸到乙醇中防于4度,還是在管子中灌入乙醇?我用過5ml的管子,當(dāng)時(shí)使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min,可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul,這只供參考,具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出,浸泡于裝有20%乙醇的燒杯中。四度保存。在使用超濾離心管時(shí),需要注意保持管子清潔、干燥和無污染。
離心管就是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。 蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,目前較常用的就是Millipore的。目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積而定??芍貜?fù)使用,使用一次就扔掉太浪費(fèi)。以下是個(gè)人總結(jié)的使用方法和注意事項(xiàng)。離心超濾管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理。超濾離心管的選擇主要看你要截留那部分物質(zhì),就選擇比較小分子量小的,如果你要截留26KD的,你要的超濾管就要比26小。但兩者也要有一定的差距,比如,選擇20-25KD之間的就不合適,因?yàn)?6的也可能會(huì)出去(這是由制造工藝決定的)。所以選擇20KD以下的超濾管比較合適。超濾離心管還可以用于提取DNA、RNA等核酸分子,并在基因工程和生物技術(shù)中發(fā)揮重要作用。青島10K超濾離心管廠家
超濾離心管可用于分離細(xì)胞培養(yǎng)上清中的蛋白質(zhì)和小分子物質(zhì)。重慶外泌體超濾離心管
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出產(chǎn)品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達(dá)到1000倍以上,基本上可以達(dá)到換buffer的目的。重慶外泌體超濾離心管