一提起蛋白質(zhì)濃縮、更換緩沖液,我們都會想起超濾。這是一種我們都很熟悉的膜分離技術(shù)。它可用來分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。這種方法的較大特點是操作簡便,只需要濃縮離心管和離心機,即可圓滿完成我們的任務(wù)。與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和。它不需要有機萃取,就不會導(dǎo)致蛋白變性。這種方法非常高效,可同時濃縮和純化分子。操作可在低溫(比如冷庫)下進行。另外,快速、便宜,也是許多人青睞它的原因。濃縮離心管的操作很簡單。選擇適當(dāng)?shù)臐饪s離心管,加入待處理的樣本,按照離心管的指示進行離心操作,之后回收截留的樣本。在離心力的作用下,溶液中的小分子溶質(zhì)和溶劑透過超濾膜,被收集在濾過液收集瓶中,而大分子溶質(zhì)被超濾膜截留在濃縮離心管中。這種分離的主要依據(jù)是分子大小,但分子形狀和電荷等其他因素也會有影響。超濾離心管可以用于分離和純化各種大分子化合物,如蛋白質(zhì)、核酸、多糖等。鄭州小型超濾離心管在哪買
超濾離心管關(guān)于回收率的疑問?一般對濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進行回收,回收率在90%以上。通常,樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的。為了獲得較高的回收率,所選濾膜的截留率約為目標蛋白的1/3。超濾膜是一種非對稱膜,其孔徑呈正態(tài)分布。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏,在這種情況下蛋白質(zhì)可能會發(fā)生變形。因此,截留孔徑越小,流速越慢,但回收率會更高。濃縮過程中有蛋白質(zhì)沉淀,如何處理?如果蛋白質(zhì)濃縮過快或過多,都可能造成蛋白質(zhì)沉淀,濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過高;對于對濃縮速度敏感、易沉淀的蛋白質(zhì),建議改進方法如下:1)降低離心速度,2)使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管,然后離心。河南10K超濾離心管生產(chǎn)商超濾離心管在醫(yī)學(xué)診斷和緩解中也具有重要作用,如血液透析、肝功能檢測等領(lǐng)域。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。 使用注意事項 (1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。 (2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。 (3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預(yù)冷至4度)。不同離心機的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調(diào)至較低檔,減小對膜的壓力。
超濾離心管使用的是再生纖維素膜,這種材質(zhì)是蛋白吸附較低的超濾膜。但是對于一些疏水性蛋白或非極性蛋白,它們和膜的非特異吸附可能會增強,對于這種情況,可以嘗試在實驗前對超濾管進行封閉處理,也可以嘗試換成Amicon Ultra0.5或2來進行實驗,通過減小膜面積來降低非特異性吸附。超濾膜含有微量甘油。如果此成分干擾分析,可用緩沖液或Milli-Q水預(yù)清洗。如果干擾仍存在,用0.1N NaOH清洗,然后用緩沖液或Milli-Q水再次清洗后甩干。超濾離心管是現(xiàn)代實驗室必不可少的設(shè)備之一,為科研工作者提供了便利和支持。
在生物學(xué)領(lǐng)域中,常常被用于細胞培養(yǎng)液的去除和濃縮。在細胞培養(yǎng)液中,存在著許多細胞代謝產(chǎn)物和廢物。使用超濾離心管可以將這些雜質(zhì)去除并濃縮目標物質(zhì),從而方便后續(xù)的實驗操作。此外,還可以用來分離、濃縮和純化單個蛋白質(zhì)或核酸分子。在化學(xué)工業(yè)生產(chǎn)中,它同樣具有重要的應(yīng)用價值。例如,在醫(yī)藥工業(yè)生產(chǎn)中,可以使用對某些藥物進行純化和分離。此外,在飲料生產(chǎn)中,也可以用于去除懸浮物和有機色素,提高飲料的透明度和口感。超濾離心管是一種高效、精密的分離設(shè)備,普遍應(yīng)用于生物和化學(xué)實驗研究以及工業(yè)生產(chǎn)中。它提供了一種快速、簡便且高效的離心濾膜技術(shù),可以有效地分離目標物質(zhì)并提高實驗效率。超濾離心管可用于制備純度高的蛋白質(zhì),以進行晶體結(jié)構(gòu)解析或其他實驗室操作。金華外泌體超濾離心管推薦
超濾離心管通常需要冷藏保存,以保持其性能和壽命。鄭州小型超濾離心管在哪買
離心過濾器具有快速超過濾功能,能夠達到較高的濃縮系數(shù),易于從稀釋液和復(fù)雜的樣本組合進行濃縮液回收。其豎式設(shè)計以及可用的濾膜表面積能提供快速的樣本處理和較高的樣本回收率(通常大于90%稀薄的初始溶液),并能進行80倍濃縮。典型的處理時間為15至60分鐘,這取決于標稱分子量限值(NMWL)。豎式設(shè)計將溶質(zhì)極化和之后造成的濾膜結(jié)垢降至較低,過濾裝置中的物理止濾點防止過濾器旋轉(zhuǎn)過度使樣本干燥和造成樣本損失。濃縮液用移液管從過濾器的樣本槽中收集,而超過濾濾出液則收集到所提供的離心管中。該裝置可在擺桶或定角轉(zhuǎn)子中旋轉(zhuǎn)。裝置未經(jīng)消毒,只供—次使用。鄭州小型超濾離心管在哪買