超濾離心管(JetSpinTM -5、15)分別可處理體積5mL和15mL以內(nèi)的樣本,離心管包含一個內(nèi)置聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點,可應(yīng)用在多種不同的截留分子量中,一般來說回收率能夠達(dá)到90%以上。超濾離心管是一種用于分離液體的工具,常用于生物學(xué)和化學(xué)研究中。它的使用方法如下:1.將樣品液體加入超濾離心管內(nèi)。2.將超濾離心管放入離心機(jī)中進(jìn)行離心。3.離心結(jié)束后,打開離心管,收集離心液。4.根據(jù)需要,可以在使用前或使用后對超濾離心管進(jìn)行清洗和消毒。注意:每個研究史都有丕回要求:縣體操作應(yīng)根據(jù)實驗所盂進(jìn)行調(diào)整。超濾離心管還可以用于濃縮樣品,減少其體積并提高濃度。湖州蛋白分離離心管廠商
超濾離心管采用再生纖維素膜,具有較高的回收率(>90%)和 高濃縮倍數(shù)(80–100 倍),100%完整性檢測確保性能可靠,主要應(yīng)用與生物樣品與蛋白濃縮、大分子組分的純化、脫鹽和緩沖液更換。再生纖維素膜具有一系列截留分子量,用戶可根據(jù)目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標(biāo)體積,選用不同體積大小和MWCO的超濾管。超濾離心管備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。超濾離心管應(yīng)用范圍:*生物樣品濃縮:包括抗原、抗體、酶、核酸或微生物。*對組織培養(yǎng)提取物或細(xì)胞裂解液中大分子組分的純化。*對稀釋或從柱洗脫液預(yù)先純化的蛋白質(zhì)進(jìn)行濃縮。*脫鹽和緩沖液更換。河北30K超濾離心管生產(chǎn)廠商超濾離心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成,具有強度高和化學(xué)惰性。
我們通常會以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,通常更小的孔徑會使回收率提高但是超濾的時間也會比較長。一定范圍內(nèi),超濾的回收率和速度是一對矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,液體的粘度會增加,流動性會降低,因此液體的跨膜速率也會降低。適當(dāng)提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復(fù)離心來完成操作,這樣必然造成時間上的浪費。怎么辦?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復(fù)離心從而提升超濾的效率。
超濾離心管從細(xì)胞培養(yǎng)上清液中濃縮蛋白,在園子里找到一些關(guān)于濃縮蛋白的一些帖子,但還有些問題還是向園子里的大蝦請教一下。我們定的是 15ml規(guī)格的管子,不知道有沒有誰以前做過的,有關(guān)于轉(zhuǎn)速,時間給一些建議,另外細(xì)胞上清液離心前是否需要什么預(yù)處理?離心之后回收蛋白時怎么盡量減少損失?如果要把管子重復(fù)利用,NaoH清洗后,如何在20%的乙醇中保存?是將其浸到乙醇中防于4度,還是在管子中灌入乙醇?我用過5ml的管子,當(dāng)時使用的轉(zhuǎn)速是4000rpm 8min,可以把5ml的樣品液濃縮到約200ul,這只供參考,具體情況還要由您的樣品決定。我保存5ml管子的方法是把內(nèi)管取出,浸泡于裝有20%乙醇的燒杯中。四度保存。超濾離心管是一個快速、便捷的方法來從混合物中分離和提取大分子,如蛋白質(zhì)、核酸等。
可以通過多個超濾管同時超濾來降低濃度,而后者通過改變不同的緩沖液直到?jīng)]有蛋白質(zhì)沉淀。用來濃縮蛋白質(zhì)的。如果要更換緩沖液,當(dāng)總蛋白溶液濃縮到1毫升左右時,輕輕添加一個新的緩沖液〈用0.22um超濾膜超濾后〉,然后連續(xù)濃縮到1毫升左右。濃縮液的之后體積取決于所需的蛋白質(zhì)濃度,通常不超過500 ul,但也要濃縮到200 ul以下。根據(jù)每次至少10次的體積濃度計算,1000次以上的3次基本可以達(dá)到更換緩沖器的目的。提取之后濃縮蛋白的操作在冰上進(jìn)行。黃色設(shè)備頭(200ul)用于提取之后的蛋白質(zhì)濃縮物。設(shè)備頭沿設(shè)備頭邊緣輕輕插入。將蛋白溶液輕輕吹勻。注意不要觸摸超濾膜。吸取濃縮液,一次較多吸200 ul,直至耗盡。之后留在管底的濃縮液不需要吸收,否則太困難,可能損壞超濾膜。之后,在無超濾膜的超濾管中加入milliq水,以防止超濾膜干燥。使用超濾離心管時應(yīng)注意避免振動或震動造成樣品混亂并影響分離效果。河北30K超濾離心管生產(chǎn)廠商
使用超濾離心管時應(yīng)注意保持其平衡和穩(wěn)定,并調(diào)整旋轉(zhuǎn)參數(shù)以確保較佳效果。湖州蛋白分離離心管廠商
下面是處理和重復(fù)使用超濾管的步驟。將超濾管中的水倒出來,用Milliq水輕輕沖洗幾次。[如管底有可見蛋白質(zhì)沉淀,可先加水,再用設(shè)備頭吹氣,注意不要碰觸膜,吹氣至沉淀懸浮,再倒出,不要沖自來水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室溫放置20分鐘,平衡超濾。在此期間定量管。離心10分鐘。倒出剩余的MaOH溶液,將管芯浸入Milliq燒杯(1L或2L)中。放器數(shù)小時,然后用新水替換,放置數(shù)小時,不斷稀釋Na0E濃度。50ml管道和蓋子用自來水沖洗,內(nèi)壁用Milliq水沖洗。取出浸入水中的芯,并將其加入幾乎滿毫升的水中。在50毫升試管中注入毫升水。慢慢地將芯放入50毫升離心管中,排出一些水。然后蓋上蓋子,4度存放,直到下次使用。一般來說,根據(jù)上述步驟和注意事項,每根渠道在三到四年內(nèi)不會受損。湖州蛋白分離離心管廠商