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回收濃縮液主要有兩種方法:一種是用吸管直接吸取并回收,另外一種是將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存,因此超濾管常配合離心機(jī)使用。超濾管主要應(yīng)用有以下幾個(gè)方面:1.濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物標(biāo)本。2.凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合頁中去除引物、鏈接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì),3.除鹽、更換緩沖液或滲濾。根據(jù)其材質(zhì)的不同總體可以分為塑料和玻璃的,塑料的離心管用的較多,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會(huì)選擇不同的塑料材料來進(jìn)行制作。離心機(jī)轉(zhuǎn)速會(huì)影響到超濾效果,因此需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求調(diào)整相應(yīng)的轉(zhuǎn)速。湖州10K超濾離心管價(jià)錢多少
玻璃離心管玻璃離心管是由玻璃制成的,不同廠家可能使用的玻璃成分不同,所以強(qiáng)度上可能會(huì)略有差異。我們的普通玻璃試管可以承受的相對(duì)離心力(RCF) 通常小于3000g ,而硼硅玻璃管一般可以承受超過10000g 以上的相對(duì)離心力。但由于玻璃離心管質(zhì)量易碎,所以玻璃管一般不用于高速離心機(jī),用得也不多。由于玻璃本身的特性,它具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性,能與酸、堿和有機(jī)溶劑和平共存。玻璃管外形穩(wěn)定,能承受一定程度的擠壓,但不能抵抗碰撞,在 高速離心時(shí)容易破碎,雖然能抵抗高溫,能抵抗熱沖擊,但在溫度突然劇烈變化的環(huán)境中也很容易斷裂。湖州10K超濾離心管價(jià)錢多少超濾離心管可以用于制備溶液中的化合物和分子,以進(jìn)行進(jìn)一步的純化和鑒定。
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長(zhǎng)時(shí)間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,運(yùn)用壽命短;不銹鋼離心管強(qiáng)度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學(xué)腐蝕,但用時(shí)要防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品、如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴(yán),倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。超濾離心管可用于分離和純化各種大分子化合物,如蛋白質(zhì)、核酸、多糖等。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。 使用注意事項(xiàng) (1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。 (2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。 (3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。超濾離心管可以根據(jù)不同孔徑大小選擇超濾膜,以便過濾出所需大小范圍內(nèi)的目標(biāo)分子。湖州10K超濾離心管價(jià)錢多少
使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的溫度、時(shí)間和壓力要求,以獲得較佳結(jié)果。湖州10K超濾離心管價(jià)錢多少
脫鹽、更換緩沖液或滲濾是從含有生物分子的溶液中去除鹽分或溶劑的重要方法。鹽分去除或緩沖液更換可通過超濾管來完成,具體過程是濃縮樣本,棄去濾出液,然后向濃縮液中加入任何所需的溶劑,恢復(fù)到樣本原先的體積。"洗出"的過程可反復(fù)進(jìn)行,直到雜質(zhì)的濃度被充分降低。關(guān)于超濾管的常見問題與解答:Q:超濾管的膜材質(zhì)是什么?A:超濾管的膜材質(zhì)為默克密理博特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而準(zhǔn), 蛋白吸附損失小。Q:如果要用超濾的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?A:按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差 一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。湖州10K超濾離心管價(jià)錢多少