胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對于細微差異即可決定成敗的細胞培養(yǎng)技術來說,選擇來源安全、品質優(yōu)良的胎牛血清至關重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品,胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞,新西蘭, 美國, 南美(烏拉圭&巴西)以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況,將胎牛血清分為特級胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD),因此這些產(chǎn)地的胎牛血清被定義為特級胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為很好胎牛血清。另外,中國國產(chǎn)的胎牛血清在市場上并不多見,這一方面是由于是養(yǎng)殖模式的差異導致的,另一方面也受到過度使用的影響。胎牛血清提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結合或調(diào)變它們所結合的物質活力。泰州細胞培養(yǎng)用血清
較為低血清試驗的要求。內(nèi)有毒的檢測:內(nèi)有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革蘭氏陰性菌的細胞外膜。臨床上,內(nèi)有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,如腦膜炎球菌。動物體內(nèi),內(nèi)有毒的能夠導致發(fā)熱或者誘導炎癥反應;細胞培養(yǎng)中,內(nèi)有毒的能夠誘導細胞反應異常。通常,采用鱟阿米巴樣細胞裂解實驗(LAL檢測)檢測內(nèi)有毒的水平。LAL是從美洲鱟的血液中制備的,對內(nèi)有毒的非常靈敏,在微量內(nèi)有毒的存在情況下就凝結。阿米巴樣細胞相當于哺乳動物的白細胞。特異性血清及其加工方式,熱鈍化:胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補體成分及一些未知的細胞生長抑制分子失活。與胎牛血清的其它加工方式一樣,熱鈍化處理過程必須小心謹慎,因為血清中的生長因子容易在較高溫度或者較長時間加熱條件下失活,甚至產(chǎn)生沉淀。舟山優(yōu)等血清血清提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。
很好的胎牛血清:微生物,包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1μm過濾,大多也能消除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底消除,但對血清質量影響不大。病原毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清相對國產(chǎn)血清而言,檢出率不高。
胎牛血清的整個生產(chǎn)流程可以分為原料采集,原料加工以及冷鏈運輸。原料采集作為胎牛血清整個生產(chǎn)流程的第一步也是關鍵的一步,對產(chǎn)品的較為終質量起了決定性的影響。采集過程一般要求在各個血源地相關部門認證的農(nóng)場現(xiàn)場采集胎牛血漿,以確保采集對象為獸醫(yī)監(jiān)管下經(jīng)臨床檢查為健康的動物。同時,整個采集的過程還需要在無菌環(huán)境下進行,一些很好的供應商甚至提供了全封閉的采集系統(tǒng),徹底避免血清與空氣的接觸,這樣較為終的血清產(chǎn)品內(nèi)的內(nèi)有毒的以及血紅蛋白等成分才會維持在一個極低的水平,確保了獲取的原始血漿質量。采集到了很好的原料,下一步就是對采集到的原料進行加工。原料到加工往往會涉及運輸?shù)倪^程,由于生物制品需要冷鏈運輸?shù)奶厥庑?,在原產(chǎn)地直接對原料進行加工是較為理想的情況,這樣可以較為大程度地避免交叉污染。血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質:氨基酸、維生素、無機物、核酸衍生物等,是細胞生長必須的物質。
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質較為高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分較為少。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體;蛋白質含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v);無菌檢驗:陰性;支原體檢驗: 陰性;細菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。血清有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質亦可儲備供給機體蛋白質不足時的應用。舟山優(yōu)等血清
為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學成分的分析,都以血清為樣品。泰州細胞培養(yǎng)用血清
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