很好的胎牛血清:免疫球蛋白,國產(chǎn)血清的只是定性檢測,結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出的時的牛齡情況,國產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。含量,此外,的使用也是要考慮在內(nèi)的。國內(nèi)外的血清,都不對進(jìn)行測試(無四環(huán)素胎牛血消除外)。其中,由于國外使用較為嚴(yán)格,用量有限,同時每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以追溯源頭,所以國外胎牛血清不含或者含量極低。但是國內(nèi)由于使用普遍,血清中殘留量很高,導(dǎo)致國產(chǎn)血清質(zhì)量很差,不利于細(xì)胞培養(yǎng)。胎牛血清常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。珠海標(biāo)準(zhǔn)血清供應(yīng)商
避免產(chǎn)生沉淀物:請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。若血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。但不建議以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙枞^濾膜。珠海標(biāo)準(zhǔn)血清供應(yīng)商胎牛血清有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。
胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血;新生牛血清:出生12-24小時新生牛靜脈;又可細(xì)分為:a.高級新生牛血清:后靜置自然析出的血清;b.標(biāo)準(zhǔn)新生牛血清:c.經(jīng)離心分離的血清;d.普通新生牛血清:融血或微融血的血清;小牛血清:出生三月齡小牛動脈分離血清;血清是血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。胎牛血清是品質(zhì)較為高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分較為少。
細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動。如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘?。谎遒|(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長;配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化。
除了對血清進(jìn)行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量?目測法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進(jìn)行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當(dāng)?shù)模捎谘t蛋白的破壞氧化,會呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時反復(fù)凍融會增加沉淀。進(jìn)口血清過濾分裝前很少反復(fù)凍融,因此成品清澈。澄清度:進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。珠海標(biāo)準(zhǔn)血清供應(yīng)商
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。珠海標(biāo)準(zhǔn)血清供應(yīng)商
細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻!胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。珠海標(biāo)準(zhǔn)血清供應(yīng)商