黃石鈣熒光指示蛋白病毒光纖成像記錄原理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-07-23

小動(dòng)物在體光纖成像記錄圖像處理軟件除了提供含有光子強(qiáng)度標(biāo)尺的成像圖片外,還能計(jì)算分析發(fā)光面積、總光子數(shù)、光子強(qiáng)度的相關(guān)參數(shù)供實(shí)驗(yàn)者參考。原則上,如預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)拍攝出圖片非特異性雜點(diǎn)多,需降低曝光時(shí)間;反之,如信號(hào)過(guò)弱可適當(dāng)延長(zhǎng)曝光時(shí)間。但曝光時(shí)間的延長(zhǎng),不單增加了目的信號(hào),對(duì)于背景噪音也存在一個(gè)放大效應(yīng)。同一批實(shí)驗(yàn)應(yīng)保持一致的曝光時(shí)間,同時(shí)還應(yīng)保持標(biāo)本相對(duì)位置和形態(tài)的一致,從而減少實(shí)驗(yàn)誤差。進(jìn)行熒光成像時(shí),實(shí)驗(yàn)者可選擇背景熒光低不容易反光的黑紙放在動(dòng)物標(biāo)本身下,減少金屬載物臺(tái)的反射干擾。在體光纖成像記錄有望代替?zhèn)鹘y(tǒng)熒光探針。黃石鈣熒光指示蛋白病毒光纖成像記錄原理

黃石鈣熒光指示蛋白病毒光纖成像記錄原理,在體光纖成像記錄

在體光纖成像記錄增大視場(chǎng)可以提高成像光譜儀的工作效率,大視場(chǎng)寬覆蓋是下一代成像光譜儀的發(fā)展趨勢(shì)。視場(chǎng)增大通常會(huì)導(dǎo)致遙感器質(zhì)量和體積的增加,如何在獲得大視場(chǎng)的同時(shí)具有小型化與輕量化的結(jié)構(gòu)是每個(gè)成像光譜儀設(shè)計(jì)者應(yīng)該權(quán)衡的問(wèn)題。為了突破成像光譜儀質(zhì)量與體積對(duì)視場(chǎng)的限制,提出使用光纖傳像束代替色散型成像光譜儀中的狹縫來(lái)鏈接望遠(yuǎn)鏡和光譜儀組成光纖成像光譜儀。利用線列光纖傳像束柔軟可拆分的特點(diǎn),將望遠(yuǎn)鏡的線性大視場(chǎng)拆分為若干個(gè)小視場(chǎng),將它們折疊分離放置于光譜儀物面上,經(jīng)過(guò)光譜儀分光成像至同一焦平面上。常州實(shí)時(shí)光纖成像記錄技術(shù)方案現(xiàn)有技術(shù)中的在體光纖成像記錄系統(tǒng)仍包含多根多模光纖。

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在體光纖成像記錄,指的是利用光學(xué)的探測(cè)手段結(jié)合光學(xué)探測(cè)分子對(duì)細(xì)胞或者組織甚至生物體進(jìn)行成像,來(lái)獲得其中的生物學(xué)信息的方法。傳統(tǒng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法需要在不同的時(shí)間點(diǎn)處死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,以獲得多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。而在體光纖成像記錄則可以對(duì)同一觀察目標(biāo)進(jìn)行連續(xù)的查看并記錄其變化,從而達(dá)到簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)的目的。光在體內(nèi)組織中傳播時(shí)會(huì)被散射和吸收,血紅蛋白吸收可見(jiàn)光中藍(lán)綠光波段的大部分,但是波長(zhǎng)大于600nm的紅光波段無(wú)法被其吸收,可以穿過(guò)組織和皮膚被檢測(cè)到。在相同的深度情況下,檢測(cè)到的發(fā)光強(qiáng)度和細(xì)胞數(shù)量具有線性關(guān)系。光源的發(fā)光強(qiáng)度隨深度增加而衰減,血液豐富的組織/系統(tǒng)衰減多,與骨骼相鄰的組織/系統(tǒng)衰減少。

在體光纖成像記錄的目的是實(shí)時(shí)檢測(cè)細(xì)胞的活性變化?;阝}離子濃度變化的熒光成像技術(shù)被較多用來(lái)記錄神經(jīng)元活性。在體光纖記錄方法與傳統(tǒng)的在體電生理記錄方法有著不同的特點(diǎn),光纖記錄因其穩(wěn)定、方便、易上手而應(yīng)用較多。首先,將熒光蛋白表達(dá)在特定類型的神經(jīng)元中,光纖記錄可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類型特異性的活性檢測(cè),而用電生理記錄的方法記錄特定類型的神經(jīng)元的活性比較困難。其次,電生理記錄容易受到環(huán)境中的電信號(hào)以及動(dòng)物的行為動(dòng)作影響,而光纖記錄相對(duì)來(lái)說(shuō)有著較強(qiáng)的抗干擾性能。然后,光纖記錄相對(duì)穩(wěn)定,可以很容易實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)程的活性檢測(cè),例如動(dòng)物的整個(gè)學(xué)習(xí)過(guò)程,而利用電生理記錄實(shí)現(xiàn)起來(lái)則相對(duì)困難。較后,光纖記錄用神經(jīng)元群體的熒光強(qiáng)度變化來(lái)表征神經(jīng)元整體的活性變化,不能反映單個(gè)神經(jīng)元的活性,而電生理記錄則能夠檢測(cè)到單個(gè)神經(jīng)元的活性,具有更高的空間分辨率。在體光纖成像記錄待成像物體所處環(huán)境為血管,支氣管。

黃石鈣熒光指示蛋白病毒光纖成像記錄原理,在體光纖成像記錄

在體光纖成像記錄對(duì)于成像結(jié)果的處理,需要依賴專業(yè)的圖像分析軟件,分割出目的信號(hào)和背景噪聲,獲得準(zhǔn)確的熒光強(qiáng)度值。光學(xué)成像方法可分為基于熒光的方法和基于生物發(fā)光的方法。光學(xué)相對(duì)于設(shè)備小且較便宜?;畹奈矬w顯微成像的缺點(diǎn)是它的有創(chuàng)性,因?yàn)樾枰ㄟ^(guò)手術(shù)創(chuàng)造一個(gè)窗口來(lái)觀察感興趣的結(jié)構(gòu)和組織。宏觀層析熒光成像可以無(wú)創(chuàng)、定量和三維方式測(cè)定熒光,但其空間分辨率比活的物體顯微鏡低(約1毫米)。光學(xué)成像的根本缺點(diǎn)是光的組織穿透率低。由于吸收和散射,熒光發(fā)射的可見(jiàn)光譜中的光只能穿透幾百微米的組織。這個(gè)問(wèn)題限制了大多數(shù)光學(xué)方法在小動(dòng)物或人類表面結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用。使用近紅外光譜能夠提高信號(hào)的組織穿透能力,并能降低了組織的自體熒光。在體光纖成像記錄不需要掃描器件。蕪湖在體光纖成像記錄

在體光纖成像記錄就是生物樣本的造影技術(shù)。黃石鈣熒光指示蛋白病毒光纖成像記錄原理

對(duì)生物體內(nèi)的突觸結(jié)構(gòu)和蛋白進(jìn)行空間分布的研究時(shí),成像系統(tǒng)需要具備高的成像速度,防止出現(xiàn)生物體移動(dòng)造成的重影現(xiàn)象;成像的超高動(dòng)態(tài)范圍和熒光信號(hào)的超高線性度:像的熒光強(qiáng)度計(jì)數(shù)需要具有對(duì)的的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義證明實(shí)驗(yàn)結(jié)論的正確性,因此圖像的熒光強(qiáng)度值必須能夠精確反映體內(nèi)蛋白、基因濃度的高低,這需要檢測(cè)器具有超高的動(dòng)態(tài)范圍能夠同時(shí)記錄強(qiáng)信號(hào)和弱信號(hào),并且在此動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)圖像計(jì)數(shù)值與真實(shí)的熒光信號(hào)對(duì)的線性變化以正確反映蛋白、基因的濃度。黃石鈣熒光指示蛋白病毒光纖成像記錄原理

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