胎牛血清FBS的處理方法?胎牛血清FBS一般需要冷凍保存,在-5到-20°C之間,并且可以在2到8°C的溫度下解凍。將血清等分并冷凍在較小的部分(通常為50ml試管)中通常很有用,以避免多次冷凍和解凍循環(huán)。有時,一些FBS等分試樣在冷凍溫度下仍保留在液體中。這是由于缺乏用于開始結晶(冷凍)的成核中心(顆粒物質)。如果您只是用手指輕彈管子,它們通常幾乎會立即凝固。解凍后有一些沉淀是很常見的。沉淀物,可能是由于某些血清蛋白的變性,可以通過短暫的離心來清理,這通常不會影響血清的質量。胎牛血清保存條件是在-20°C凍存。廣州無外泌體血清
胎牛血清:胎牛血清用于細胞培養(yǎng)已經(jīng)超過半個世紀了,20世紀50年代末TheodorePuck在細胞和組織培養(yǎng)中初次加入胎牛血清(FBS)來刺激細胞生長。后來人們發(fā)現(xiàn),由于胎牛未進食過母乳,所以IgG的含量極低,不會阻礙細胞生長,而且胎牛血清中含有豐富的促進細胞生長的成分,如維生素、運輸?shù)鞍?、微量元素、生長因子等,胎牛血清生產(chǎn)的一切環(huán)節(jié)均有嚴格的質量把控。出廠的血清無細菌、支原體和病毒等微生物的威脅,且內的毒性含量低,滿足絕大多數(shù)細胞培養(yǎng)需求。寧波賽業(yè)胎牛血清廠家胎牛血清是細胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基。
胎牛血清的生產(chǎn)工藝:胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標記研究細胞代謝)適合轉染CHO后的篩選,避免外源小分子對細胞產(chǎn)生干擾。透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎上進行加工的。胎牛血清在無菌條件下要經(jīng)過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測,包括理化性質檢查(如滲透壓和pH值),成分檢查(如內的毒性和血紅蛋白)、外源因子檢查(如細菌、病毒和支原體)以及促進細胞增殖的檢查等。透析胎牛血清為保證其性能和安全性,也需具備胎牛血清的這些工藝和檢查。
如何區(qū)別真假胎牛血清:主要技術指標,1、內的毒性,標準為不高于5EU/ml。內的毒性是細菌破碎后細胞壁的成分,因此內的毒性含量的高低可表現(xiàn)出采的血到生產(chǎn)一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產(chǎn)血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內的毒性含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我國標準10倍。可見,內的毒性含量偏高不影響質量,除非含量極高,預示著已經(jīng)污染。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛,數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標記研究細胞代謝)適合轉染CHO后的篩選。
胎牛血清的作用:胎牛血清提供對維持細胞指數(shù)生長的Hormone,胎牛血清基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。胎牛血清提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,胎牛血清能結合或調變它們所結合的物質活力。有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到釋放毒性作用。胎牛血清是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。胎牛血清在無菌條件下要經(jīng)過0.1微米膜三重過濾,要進行一系列的檢測。寧波賽業(yè)胎牛血清廠家
胎牛血清是血液凝固后的液體部分,不含血細胞、纖維蛋白及凝集因子等。廣州無外泌體血清
胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中,如發(fā)現(xiàn)母牛懷孕,就應立即將生殖系統(tǒng)從尸體中分離出來,在無菌條件下從子宮中取出小牛,進行臍帶打結處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過導管被抽入無菌的血液收集袋內。在沒有真空泵時,也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過重力作用或按摩方式進行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經(jīng)過離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個月,否則會因心臟太小而不便于操作。一個3月齡的胎兒可產(chǎn)生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產(chǎn)生350mL和550mL血清。廣州無外泌體血清
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