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來源: 發(fā)布時間:2020-01-13

白的免疫檢測:SNAP i.d.“ 2.0系統(tǒng)與SNAP 1.d.系統(tǒng)(首先代)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測一種。 SNAPi.d。 2.0蛋白質(zhì)檢測b。快照蛋白質(zhì)檢測。標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)Midi印跡系統(tǒng)首先代,單孔免疫檢測對照,茴香霉素處理和PDGF處理的3T3小鼠成纖維細(xì)胞裂解液(10-0.63 ug)被轉(zhuǎn)移到Immobilon9-P膜上。印跡被阻止含0.5%的非脂肪干mik(NFDM),并在加筋的鹽水中制備含0. 1%Tweene 20表面活性劑(TBST),并用主要抗B-Tubulin探測(MAB3408)和次級HRP偶聯(lián)的山羊螞蟻(AP1 24P)在上述條件。將印跡暴露于X射線膠片一分鐘。圖2. erbB2的免疫檢測:SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)與SNAP i.d.系統(tǒng)(首先代)與標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測s。 S上海益啟生物細(xì)胞計數(shù)器訂購方便。上海Merck儀器哪家好

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P i.d.o 2.0SNAP i.d. @ 2.0多印跡框架迷你相框中框阻塞溶液量每孔15毫升30毫升30毫升抗體量每孔2.5 mL5毫升10毫升洗滌緩沖液*量每孔4x 15 mL每個4x 30 mL每個4x 30 mL●Tris或磷酸鹽緩沖鹽溶液,補(bǔ)充有0.1%Tweene 20表面活性劑在計算免疫檢測所需的抗體量時,三個要素對于成功檢測出蛋白質(zhì)并獲得了高質(zhì)量的印跡(低背景,高信號):●樣品類型和凝膠上樣濃度●一級和二級抗體濃度●檢測試劑的種類和靈敏度下表中的所有抗體均使用LuminataTM Forte化學(xué)發(fā)光檢測試劑進(jìn)行了測試。對于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng),抗體濃度高于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測中的濃度,但濃度較低體積。 表3.標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測中一抗稀釋的實(shí)例 SNAPi.d.?2.0免疫檢

lon@CrescendoWesternHRP基材WBLUR0500500毫升Immobilon@ClassicoWesternHRP底材WBLUC0500500毫升Immobilon@WesternHRP基材WBKLS05零零5零零毫升Immobilon@ECLUltraWestemHRP基材WBULS05零零5零零毫升TMB,不溶61毫升用于免疫檢測的Immobilon@信號增強(qiáng)劑WBSH05S05零零5零零毫升免疫印跡封閉劑20-20020克Re-BlotTMPlus強(qiáng)力抗體剝離解決方案,10倍25毫升Immobilon@Block-CH緩沖液WBAVDCH01S05零零毫升Immobilon@Block-FL緩沖液WBAVDFL01500毫升Immobilon@Block上海益啟生物細(xì)胞分析儀訂購方便。

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有關(guān)詳細(xì)信息,請參見表2?!癫唤ㄗh在SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)中剝離印跡。印跡已被剝離可以從阻塞步驟開始在SNAP i.d.o 2.0系統(tǒng)中對遵循標(biāo)準(zhǔn)協(xié)議的系統(tǒng)進(jìn)行重新探測?!袢绻恍枰獎冸x(例如,如果使用其他二抗進(jìn)行檢測),則可以重新檢測印跡快速清洗后,立即在SNAP i.d.9 2.0系統(tǒng)中使用。 優(yōu)化準(zhǔn)則抗體已經(jīng)開發(fā)了優(yōu)化指南,以使用戶能夠轉(zhuǎn)換所用抗體的濃度將標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測測定法濃縮至適用于SNAP i.d. @ 2.0系統(tǒng)的濃度。大多數(shù)用戶會能夠使用相同量的抗體,但與標(biāo)準(zhǔn)品相比,體積更小,濃度更高免疫檢測。但是,當(dāng)使用擴(kuò)展抗體方案(第12頁)時,可以使用相同的方法通常用于標(biāo)準(zhǔn)免疫檢測的一抗的濃度,體積和時間,其次是較高濃度的二抗,持續(xù)時間較短。表1.如何根據(jù)SNAP i.d.9上海益啟生物電阻儀訂購方便。普陀區(qū)Merck細(xì)胞分析儀Merck儀器參數(shù)

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密封的平板/m歧管組件放在倒置顯微鏡。6.在擴(kuò)展的灌注實(shí)驗(yàn)中,定期將7孔倒空至避免出口溢流到歧管和灌注系統(tǒng)中。在CellASICOONX2軟件的“運(yùn)行”選項(xiàng)卡上,單擊“暫?!卑粹o。按下儀器上或“工具”下拉菜單中的“密封”按鈕在下拉菜單中,單擊開封板。從板,并抽吸良好。7.將歧管重新密封到板上,然后在在“運(yùn)行”選項(xiàng)卡上,單擊“恢復(fù)”以重新啟動每個融合協(xié)議。解決方案切換1.從選定的進(jìn)水口(1-5)吸出溶液。加至350μL所需的解決方案。如果少于四個單位(A-D)使用時,用緩沖液填充未使用的進(jìn)口井,以防只托水。2.根據(jù)以下說明將微流體板密封到ONIX2歧管上:CellASIC@ONIX2微流體系統(tǒng)用戶指南。3.打開CelIASICOONIX2軟件,在下拉列表,然后單擊ProtocolEditor選上海Merck儀器哪家好

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