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來源: 發(fā)布時(shí)間:2020-01-26

SDS PAM 凝膠電泳大多在不連續(xù)緩沖系統(tǒng)中進(jìn)行,其電泳槽緩沖液的 pH 值與離子強(qiáng)度不同于配膠緩沖液,當(dāng)兩電極間 接通電流后,凝膠中形成移動(dòng)界面,并帶動(dòng)加入凝膠的樣品中所含的 SDS 多肽復(fù)合物向前推進(jìn)。樣品通過高度多孔性的積層膠后,復(fù)合物在分離膠表面聚集成一條 很薄的區(qū)帶(或稱積層)。曲于不連續(xù)緩沖系統(tǒng)具有把樣品中的復(fù)合物全部濃縮于極小體積的能力,故比較大提高了 SDS PAM 凝膠的分辨率。 比較普遍 使用的不連續(xù)緩沖系統(tǒng)比較早是由 Ornsstein(1964)和 Davis(1964)設(shè)計(jì)的,樣品和積層膠中含 Tris-Cl(Merck同時(shí)操作4個(gè)WB實(shí)驗(yàn)加速上海授權(quán)代理商。楊浦區(qū)可用于IHC實(shí)驗(yàn)加速WB實(shí)驗(yàn)加速器咨詢問價(jià)

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【操作步驟】 按廠商的使用指南用兩塊干凈的玻璃,平板和 0.75 mm 墊片組裝電泳裝置中的玻璃平板夾層,并固定在灌膠支架上。 按表 1 配制分離膠液體并脫氣,然后加入 10% 的 (NH4)2S2O8 和 TEMED,輕輕攪拌混勻。 ? 按所需分離的蛋白質(zhì)分子大小選擇合適的 C3H5NO 百分比濃度,一般地,5% 的凝膠可用于 60~200kDa 的 SDS 變性蛋白質(zhì)分子的分離,10% 用于 16~70kDa,15% 用于 12~45kDa。 用一根巴斯德吸管立即將分離膠液體沿夾層中一條墊片的邊緣加入于玻璃平板夾層中,離膠,并被篩分而依各自的大小得到分離。長寧區(qū)加速可回收抗體WB實(shí)驗(yàn)加速器咨詢問價(jià)上海益啟WB實(shí)驗(yàn)加速器可同時(shí)操作24個(gè)切片。

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