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來源: 發(fā)布時間:2022-09-26

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每隔2天用電阻儀測量細胞跨膜電阻值,直到達到平臺,提示細胞已經形成致密單層;或者通過檢測熒光染料熒光黃的通過率,以判斷細胞剛好完全匯合。電阻儀測量因不傷害細胞,可以繼續(xù)培養(yǎng)而比熒光黃法更為普遍地被采用。細胞單層匯合后,用DPBS清洗一次細胞,加入含有不同濃度藥物(一般10-200μM)的緩沖液。如果要測藥物從上至下的運輸效果,則上層小室中加藥物,下層培養(yǎng)板孔里只加緩沖液;反之則相反。將培養(yǎng)板在37℃條件下培養(yǎng)(60rpm震蕩或者不震蕩)1-2h,到達時間之后,分別從細胞小室和培養(yǎng)孔里取出一定 體積緩沖液(一般50μL )轉移至新的轉運分析板進行LC/MC分析。對于放射性標記藥物,分別取出20μL緩沖液加入100μL閃爍液,通過多孔閃爍讀板儀讀值。上海益啟生物的酶詢價公司電話。浦東新區(qū)細胞轉染細胞培養(yǎng)哪家好

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常見檢測細胞: **細胞(MDA-MB-231, MCF-7, HT1080, B16F10)等,用孔徑為8μm的培養(yǎng)小室巨噬細胞、單核細胞 PMN:用孔徑為5μm的培養(yǎng)小室內皮細胞(HUVEC)、白血病細胞 K562、骨髓瘤細胞HB124:用孔徑為 3μm或5μm的培養(yǎng)小室 具體操作: 以配合24孔板的8μm PET膜Millicell?懸掛式細胞培養(yǎng)小室(cat#MCEP24H48)為例,實驗周期:3-5天 復蘇代數靠前的**細胞,在含有10%FBS的培養(yǎng)基中預先培養(yǎng)2-3代,待細胞匯合達到80%左右,饑餓處理18-24小時。 準備鋪膠: a) 4 °C融EMC膠過夜。 b) 將細胞小室、培養(yǎng)板和***頭等于4°C 預冷。寶山區(qū)培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)銷售

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