南京默克15ml超濾濃縮管銷售

來源: 發(fā)布時間:2024-05-17

膜的吸附損失 對于濃度很低及珍貴的樣品,除了考慮截留效率和操作方便外,額外 要關(guān)注的是采用的超濾膜及設(shè)備對目標(biāo)蛋白的潛在非特異性吸附損 失。不同膜材質(zhì)對生物分子吸附程度不同,默克密理博的 Ultracel? 再 生纖維素膜在各類膜中對生物分子吸附**小,是 Amicon? Ultra 超濾管 等超濾產(chǎn)品成為優(yōu)先的**技術(shù)關(guān)鍵之一。濾膜和裝置表面對溶質(zhì)的 吸附對樣品收率會產(chǎn)生直接影響,所以如果希望盡可能提高得率,就 應(yīng)該考慮采用較小的設(shè)備和膜面積。小量的、較為稀釋的樣品應(yīng)該選 用膜面積小的裝置,同時保證一定的流速。默克密理博設(shè)計了一系列 離心式或攪拌式裝置,配合不同的膜面積、不同的截留分子量的切向 流系統(tǒng),支持您獲得理想的處理效果。益啟生物公司就帶您了解一下超濾濃縮管的特點。南京默克15ml超濾濃縮管銷售

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外泌體用于細(xì)胞學(xué)或動物實驗前的無菌處理 已經(jīng)經(jīng)過上述方法制備的外泌體在進行細(xì)胞或動物實驗之前還需進行一步除菌過濾,這個時候考慮到得率,應(yīng)該采用離心法處理,以減少過濾時的外泌體樣品損失。 超濾方法純化具體操作步驟舉例 Amicon? Ultra-15 超濾管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip?真空抽濾對樣品進行澄清[目錄號SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜] 用PBS平衡Amicon? Ultra-15 超濾管(目錄號UFC901024,10 kDa MWCO) ,4000g離心 X 10 min。 從超濾管內(nèi)管及收集管吸走PBS。向超濾管加入15 mL 樣品。4000g 離心30 min 濃縮。倒空收集管。加入14 mL PBS 進行緩沖液置換,溫柔吸打樣品數(shù)次。4000g離心 30 min。從濃縮管吸回處理好的樣品。(30X 濃縮) 注意 : 所有 Amicon? Ultra 超濾管 (0.5, 2, 4 和 15 mL) 與此操作流程兼容 *長寧區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管報價上海超濾濃縮管代理銷售推薦益啟生物公司。

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離心方式的超濾方法進行溶液置換也被稱為“滲濾”,操作時樣品首先被濃縮,繼而加入新的溶液,再次濃縮時,原溶液已經(jīng)被換成選定的溶液。 化學(xué)相容性與溶出 樣品的化學(xué)背景有時很多樣而復(fù)雜,過濾的過程中很重要的一點是操作過程不應(yīng)給樣品帶來新的污染。所以濾膜和裝置與樣品接觸的其它部分都不能與樣品中的化學(xué)成分發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生溶出污染。關(guān)于默克密理博各種微濾、超濾產(chǎn)品的化學(xué)相容性請參考產(chǎn)品使用說明書或垂詢技術(shù)支持專線 ?;厥章始捌渲匾猿瑸V的**終目的常常是很大程度地回收目標(biāo)溶質(zhì),但膜的很多特性會對這一目的產(chǎn)生影響。影響回收的因素包括:? 標(biāo)稱分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)? 截留 ? 濃差極化 ? 通量

外泌體的精制磁珠法富集精制外泌體:300μg樣品(相當(dāng)于300μg總蛋白)用含有5μg anti-CD63抗體的溶液稀釋,與protein A/G磁珠共孵育1hr,漂洗后用0.2M glycine洗脫。如果要先將抗體偶聯(lián)在磁珠上(以避免抗體洗脫下來對外泌體的干擾),請參考默克磁珠操作說明書。(Protocol C - Antibody Crosslinking Using Bis(sulfosuccinimidyl) suberate (BS3))。推薦使用試劑目錄號信息:cat# CBL553t 和cat# OP171以及LSKMAGAG02。 默克已經(jīng)建立了基于“微濾+超濾”的外泌體制備操作標(biāo)準(zhǔn),相較于需要昂貴的設(shè)備及繁瑣操作的超速密度梯度離心,用實驗室常見的工具解決外泌體制備的高大上問題,真是惠而不費,不亦樂乎?超濾濃縮管的優(yōu)勢您了解多少呢?

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核苷酸截留分子量(NCO) 超濾膜的 NMWL 是用球形蛋白標(biāo)定的,適合各種蛋白研究,但在核酸 和多糖純化時則要考慮更多因素。這些分子的棒狀的三維結(jié)構(gòu)容易漏 過,相對于球形蛋白需要更致密的膜(截留分子量更?。?。所以選擇 濾膜是更多考慮的是核苷酸長度而非分子量。 濃差極化 濃差極化實質(zhì)是溶質(zhì)累積在膜表面造成的堵塞,產(chǎn)生除了膜本身截留分 子量以外的過濾限制。當(dāng)溶質(zhì)濃度較高時,會形成相當(dāng)于第二層濾膜作 用的膠體層,干擾分子通過濾膜,同時降低流速。pH 值、緩沖液的成分 也會影響目的分子的狀態(tài)而使?jié)獠顦O化現(xiàn)象加劇或減輕。超濾濃縮管的主要優(yōu)勢是什么。長寧區(qū)默克0.5ml超濾濃縮管報價

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上樣池下端接上Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管(有5種截留分子量規(guī)格可選)。 6. 加入1 mL洗脫緩沖液與樹脂混勻。孵育5 min。 7. 4,000×g離心15 min。 8. 加上蛋白樣品**終需要的緩沖液1.5 mL。4,000×g離心15 min,置換緩沖液的同時進行濃縮。 9. 倒轉(zhuǎn)Amicon? Ultra 0.5 mL超濾管,1,000×g離心回收純化和濃縮好的蛋白。 * 本操作受Amicon? Ultra-0.5 mL超濾管~1 mg蛋白的容量限制。體積較大而蛋白濃度較低的情況下也可以采用如上方法,但溶液體積和離心時間等需要略加優(yōu)化。 用Protein A或G對抗體進行親和純化南京默克15ml超濾濃縮管銷售