浙江土壤微生物土壤DNA提取規(guī)格

來源: 發(fā)布時間:2024-09-10

內(nèi)生菌共生于植物內(nèi)部,要獲得內(nèi)生菌首先需要破碎植物組織。植物組織和內(nèi)生菌在形態(tài)、硬度等性質(zhì)上均有差異,想要獲得更多內(nèi)生菌基因組DNA,對裂解介質(zhì)的選擇是難點。2、相對于植物基因組,雖然內(nèi)生菌包括細(xì)菌,***,放線菌等不同類型微生物,但其基因組*占微小部分單獨提取內(nèi)生菌DNA比較困難,提取到的是混合DNA,通過PCR才能鑒定。內(nèi)生菌DNA提取思路:STEP1破壞植物釋放菌體;STEP2破壞菌體釋放核酸;STEP3提取DNA。有沒有合適的上海益啟生物的土壤DNA提取操作是否簡易?浙江土壤微生物土壤DNA提取規(guī)格

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l. Nicotiana tabacum seed endophytic communities share a commoncore structure and genotype-specific signatures in diverging cultivars【J】.Computational and Structural Biotechnology Journal, 2020, 18。本發(fā)明屬于核酸提取純化技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種土壤尿液DNA提取試劑盒及方法。 背景技術(shù): 二氧化硅能在鹽和特定pH值條件下可逆的結(jié)合DNA,這也是硅珠法、磁珠法、硅膠膜法提取DNA的理論基礎(chǔ);在高濃度離液鹽和低pH值條件下,二氧化硅能通過氫鍵與DNA結(jié)合,而蛋白質(zhì)、脂類、糖類等雜質(zhì)因不能被結(jié)合從而被去除,去除離液鹽、提高pH值之后,DNA與二氧化硅之間的相互作用力減弱,DNA從二氧化硅表面釋放,從而獲得純化的DNA;上海土壤DNA土壤DNA提取聯(lián)系方式上海益啟生物的土壤DNA提取價格區(qū)間大概是多少?

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DNA Spin Kit,按照植物DNA提取protocol進(jìn)行。FastDNA Spin Kit(11**40**0)。艱難樣本:植物組織或堅硬、有韌性的樣本組織,采用介質(zhì)A。介質(zhì)A中含有石榴石和氧化鋯珠,能夠有效的破碎植物組織,釋放微生物。去雜提純:植物中含葉綠素、多糖、多酚等抑制物,試劑盒中即有針對植物樣本DNA提取而設(shè)計的裂解液CLS-VF及雜質(zhì)去除劑PPS及漂洗液,能夠很好的去除影響DNA純化及下游實驗的抑制劑。解決方案2:當(dāng)作微生物樣本看待,選擇SPINeasy D

12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,益啟生物公司帶您了解土壤DNA提取詳情。

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-24 5G儀器和裂解介質(zhì)E管同時使用可在40秒內(nèi)快速裂解難處理樣本,例如***孢子、內(nèi)生孢子、革蘭氏陰性菌和酵母等。釋放出來的DNA經(jīng)過硅膠基質(zhì)離心純化,得到的DNA可以直接進(jìn)行下游PCR反應(yīng)、限制性內(nèi)切酶消化、電泳和任何其他所需的應(yīng)用。產(chǎn)品特點:1.適用于不同類型的土壤樣本,以及廢水、污泥等樣本。該試劑盒中不存在也不需要再使用有危害的有機試劑。3.DNA產(chǎn)量高、純度高。4.去除腐殖酸和RCR抑制劑。應(yīng)用實例:提取多種樣本的500mg上海益啟生物賣的土壤DNA提取是正規(guī)產(chǎn)品嗎?楊浦區(qū)FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系人

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取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序為,95℃,11分鐘;浙江土壤微生物土壤DNA提取規(guī)格