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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-07

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因?yàn)镽IP做完得到的是RNA序列,要做后續(xù)檢測(cè),比如測(cè)序、判斷目標(biāo)序列位置等,是不是都必須要做RT-PCR,得到逆轉(zhuǎn)錄的DNA后,后面就跟ChIP相同了?細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包。常見(jiàn)的用realtimeqRT-PCR。如果對(duì)照的目的是保證兩個(gè)樣品間加入的細(xì)胞量一致或者進(jìn)行定量,理論上說(shuō),使用input作為判別,計(jì)算不同樣品上樣量的差異。如果對(duì)照的目的是為了看IgG以及目的抗體富集的非特異性mRNA的量的話,那么可以找一個(gè)確定不會(huì)與目的抗體結(jié)合的RN**段設(shè)計(jì)primer進(jìn)行qPCR,用來(lái)看IgG以及目的抗體拉下來(lái)的背景情況。RIP可以看成是普遍使用的染色質(zhì)免疫沉淀ChIP技術(shù)的類似應(yīng)用,但由于研究對(duì)象是RNA-蛋白復(fù)合物而不是DNA-蛋白復(fù)合物,RIP實(shí)驗(yàn)的優(yōu)化條件與ChIP實(shí)驗(yàn)不太相同(如復(fù)合物不需要固定,RIP反應(yīng)體系中的試劑和抗體相對(duì)不能含有RNA酶,抗體需經(jīng)RIP實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證等等)寧夏靠譜的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包待檢樣本寄送要求。

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