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因為RIP做完得到的是RNA序列，要做后續(xù)檢測，比如測序、判斷目標序列位置等，是不是都必須要做RT-PCR，得到逆轉(zhuǎn)錄的DNA后，后面就跟ChIP相同了？細胞實驗外包。常見的用realtimeqRT-PCR。如果對照的目的是保證兩個樣品間加入的細胞量一致或者進行定量，理論上說，使用input作為判別，計算不同樣品上樣量的差異。如果對照的目的是為了看IgG以及目的抗體富集的非特異性mRNA的量的話，那么可以找一個確定不會與目的抗體結(jié)合的RN**段設計primer進行qPCR，用來看IgG以及目的抗體拉下來的背景情況。RIP可以看成是普遍使用的染色質(zhì)免疫沉淀ChIP技術(shù)的類似應用，但由于研究對象是RNA-蛋白復合物而不是DNA-蛋白復合物，RIP實驗的優(yōu)化條件與ChIP實驗不太相同（如復合物不需要固定，RIP反應體系中的試劑和抗體相對不能含有RNA酶，抗體需經(jīng)RIP實驗驗證等等）山東推薦的細胞實驗外包服務

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