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來源: 發(fā)布時間:2022-11-05

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因為RIP做完得到的是RNA序列,要做后續(xù)檢測,比如測序、判斷目標(biāo)序列位置等,是不是都必須要做RT-PCR,得到逆轉(zhuǎn)錄的DNA后,后面就跟ChIP相同了?細(xì)胞實驗外包。常見的用realtimeqRT-PCR。如果對照的目的是保證兩個樣品間加入的細(xì)胞量一致或者進(jìn)行定量,理論上說,使用input作為判別,計算不同樣品上樣量的差異。如果對照的目的是為了看IgG以及目的抗體富集的非特異性mRNA的量的話,那么可以找一個確定不會與目的抗體結(jié)合的RN**段設(shè)計primer進(jìn)行qPCR,用來看IgG以及目的抗體拉下來的背景情況。RIP可以看成是普遍使用的染色質(zhì)免疫沉淀ChIP技術(shù)的類似應(yīng)用,但由于研究對象是RNA-蛋白復(fù)合物而不是DNA-蛋白復(fù)合物,RIP實驗的優(yōu)化條件與ChIP實驗不太相同(如復(fù)合物不需要固定,RIP反應(yīng)體系中的試劑和抗體相對不能含有RNA酶,抗體需經(jīng)RIP實驗驗證等等)寧夏整體細(xì)胞實驗外包推薦細(xì)胞實驗外包南京哪家比較好?英瀚斯生物。

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細(xì)胞實驗外包實驗中衛(wèi)星菌落出現(xiàn)的原因是什么?該如何避免?(1)衛(wèi)星菌落是氨芐降解后生長的雜菌。可能是感受態(tài)細(xì)胞的問題也可能是轉(zhuǎn)化過程出現(xiàn)操作失誤例如未在冰中進(jìn)行轉(zhuǎn)化,感受態(tài)在常溫下放置過久失活,轉(zhuǎn)化后搖菌時間過短,或者搖床速度過慢,沒有把菌搖起來,如果不是轉(zhuǎn)化過程出現(xiàn)的問題就要進(jìn)一步考慮連接是否正確,連接時間12~16h,體系一般6ul-10ul,目的片段:載體一般1:3~1:10.(2)可以將培養(yǎng)時間控制在12h-16h之間,或者更換***為羧芐青霉素醫(yī)學(xué)細(xì)胞實驗外包生物公司有哪些?英瀚斯生物。甘肅整體細(xì)胞實驗外包哪家靠譜

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