組織免疫組化

免疫組化染色切片的好壞直接影響著病理醫(yī)生對其染色結(jié)果的判斷，進而影響病理診斷，所以制作一張良好的免疫組化切片至關(guān)重要，它需要病理醫(yī)生與病理技師兩者間的相互協(xié)調(diào)，密切配合和共同努力，病理醫(yī)生選擇抗體，設(shè)置對照，判讀結(jié)果，指導技術(shù);而技術(shù)人員進行實驗操作，保證染色質(zhì)量。在免疫組化切片的制作過程存在多個環(huán)節(jié)，每一環(huán)節(jié)的失誤都可能影響檢測結(jié)果，如抗原保存，蛋白酶消化，增強技術(shù)及對抗體的管理、使用和試劑的濃度等等，因此制作一張高質(zhì)量的免疫組織化學切片是多方面相互配合的結(jié)果。有沒有能做免疫組化的實驗外包公司？效果好一點的。組織免疫組化

免疫組化染色呈陰性結(jié)果的原因有哪些？

1、抗體濃度和質(zhì)量問題以及抗體來源選擇錯誤。不是抗體濃度越高就越易出現(xiàn)陽性結(jié)果，抗原抗體反應(yīng)有前帶和后帶效應(yīng)，必須摸索比較好濃度。

2、抗原修復不全，對于甲醛固定的組織必須用充分抗原修復來打開抗原表位，以利于與抗體結(jié)合；建議微波修復用高火4次*6min試試。有人做過實驗，這是比較好的時間和次數(shù)。若不行，還可高壓修復。

3、組織切片本身這種抗原含量低。

4、血清封閉時間過長。

5、DAB孵育時間過短。

6、細胞通透不全，抗體未能充分進入胞內(nèi)參與反應(yīng)。

7、開始做免疫組化，建議一定要首先做個陽性對照片，排除抗體等問題。 甘肅細胞免疫組化注意事項臨床樣本檢測，免疫組化，英瀚斯生物專業(yè)病理。

病理醫(yī)師日常工作中經(jīng)常說的一句話應(yīng)該就是“做個免疫組化吧”；不管是臨床醫(yī)師，還是患者，他們問的多的問題則是“為什么要做免疫組化？”病理醫(yī)師通過“特殊染色”來進行細胞的識別。這一做法的依據(jù)是特定細胞和組織中的成分不同、則化學性質(zhì)不同，通過染色的方法則可以呈現(xiàn)不同顏色。不過，由于組織固定或儲存等，會造成相應(yīng)物質(zhì)的活性降低甚至消失，因而限制了特殊染色方法的應(yīng)用。隨著免疫學研究的進展，根據(jù)抗原與相應(yīng)抗體間特異性結(jié)合的性質(zhì)，則有了現(xiàn)在免疫組化的方法：不同細胞、不同組織中抗原有一定差異，抗體與被測組織中的特定抗原結(jié)合，進而通過一定顯色方法將結(jié)合的抗體顯示出來。如有相應(yīng)顯色，則證實可能有被測抗原；無顯色則可能無被測抗原。當然，這一方法中需注意相應(yīng)的“例外”，如抗體的非特異性結(jié)合、非特異性顯色，則容易造成“假陽性”；或者雖有相關(guān)抗原、但所用抗體與該抗原并未結(jié)合等，則容易造成“假陰性”。隨著免疫組化的應(yīng)用經(jīng)驗的增加，這些問題在常規(guī)應(yīng)用中盡量得以避免，前者如各種顯色方法的優(yōu)化；后者如抗原修復方法的優(yōu)化、新型抗體開發(fā)及選擇。

免疫組化的局限性，可能會有假陽性。陽性信號定位不正確即為假陽性，包括著色不勻、背景著色、邊緣效應(yīng)，另外組織的某些特定成分也能導致假陽性結(jié)果。假陽性可能的原因有:(1)一抗?jié)舛燃耙豢故欠袷?，抗體有一個合適的濃度范圍且必須在有效期內(nèi)使用，過期的抗體或者不著色，或者背景著色，形成假陽性;(2)試劑未充分覆蓋組織，組織邊緣的試劑易干濃度較組織中間高致深染;(3)抗體孵育時間過長，由于室溫的影響夏季孵育時間稍短，冬季孵育時間稍長;(4)操作過程中組織變干，造成組織邊緣收縮或損壞形成偽影，產(chǎn)生假陽性;(5)3，3'-二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色時間太長，DAB宜現(xiàn)配現(xiàn)用，配制時間比較好在30min以內(nèi);(6)由于胞漿里含有較多的蛋白質(zhì)，因此間質(zhì)和胞漿中出現(xiàn)很多非特異性的染色，如內(nèi)源性酶血紅蛋白、肌紅蛋白等造成的著色，可以通過血清封閉解決;乳腺cancer組織中的脂肪細胞、淋巴細胞也會產(chǎn)生非特異性的染色;(7)非特異性抗體吸附常見于壞死組織中，使壞死組織呈較高的背景染色，在免疫組化中應(yīng)避免選擇壞死組織較多的蠟塊。免疫組化檢測經(jīng)驗總結(jié)！

確定cancer分期，免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床可以進行處理哦，英瀚斯生物為您處理。cancer分期是判斷預后的一個指標，與是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲密切相關(guān)，而通過免疫組化方法可以判斷cancer是否浸潤、有無淋巴管或血管侵襲。層黏連蛋白和Ⅳ型膠原的單克隆抗體可以清楚的顯示基膜的主要成分，用于區(qū)分原位*和浸潤*，一旦上皮性*突破基膜為浸潤，未突破基膜為原位;顯示血管和淋巴管內(nèi)皮細胞的標記物第八因子相關(guān)蛋白、D2-40等則可清楚顯示cancer對血管或淋巴管的浸潤。因此對許多cancer的良惡性鑒別及有無血管或淋巴管浸潤，免疫組化結(jié)果作為主要的鑒別依據(jù)。免疫組化IHC詳細介紹！組織免疫組化

免疫組化流程是什么樣的？組織免疫組化

免疫組化臨床應(yīng)用對“未分化”cancer的分類。未分化cancer包括cancer或肉瘤，在HE切片上由于cancer的“未分化”而缺少cancer細胞的起源特征不能分類，初步區(qū)分組織學類型用非特異性抗體，在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進一步鑒定。如分化差的cancer可顯示Vimentin或S-100蛋白，有時淋巴瘤可以表達上皮膜抗原，一些黑色素瘤表現(xiàn)出角蛋白，這同時也強調(diào)了在cancer診斷中應(yīng)使用一組抗體而不是單個抗體。如果您有實驗外包的需求，可以與我們南京英瀚斯生物進行聯(lián)系，我們也有做免疫組化的服務(wù)！組織免疫組化