貴州熒光染料熒光素酶

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-10-29

管可用于實(shí)驗(yàn)室的熒光團(tuán)數(shù)量眾多,但這些染料通常屬于以下三組之一:熒光染料:這些是用于在體外標(biāo)記生物相關(guān)分子的小型有機(jī)天然或合成熒光分子。該組中的一些熒光染料包括熒光素、溴化乙錠和花青。熒光蛋白:這些是較大的、生物制造的蛋白質(zhì),由于它們的大分子結(jié)構(gòu)而發(fā)出熒光。GFP、RFP和YFP是屬于該組的一些染料。量子點(diǎn):這些高熒光合成納米晶體由半導(dǎo)體材料制成。隨著熒光基本特性的廣泛應(yīng)用和該領(lǐng)域的顯著進(jìn)步,已經(jīng)針對(duì)特定應(yīng)用和儀器開(kāi)發(fā)和優(yōu)化了數(shù)百種活性熒光染料。同樣,多年來(lái),大量復(fù)雜的熒光技術(shù)(例如,F(xiàn)RET、TRF、FP、FRAP、FACS、FCS)也在不斷發(fā)展。羅丹明具有出色的光穩(wěn)定性以及許多光物理特性,使其非常適合用作激光染料、熒光探針和顏料。貴州熒光染料熒光素酶

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二、***成像分析:D-熒光素,鉀鹽,D-PBS,不含鈣、鎂1、配制溶液使用無(wú)菌D-PBS(w/oCa2+;Mg2+)配制D-熒光素鉀鹽溶液(15mg/ml),0.22μm濾膜過(guò)濾除菌(避光),分裝后于-20℃或-80℃冷凍保存,避免反復(fù)凍融。使用時(shí)4℃融化,實(shí)驗(yàn)前平衡至室溫(避光)2、注射量取決于注射方式,具體如下:注射方式劑量靜脈注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液腹腔注射(25-27gauge針頭)按10μl/g體重濃度,加入相應(yīng)體積的15mg/ml熒光素工作液肌肉注射(27gauge針頭)50μl,濃度為1-2mg/ml熒光素工作液鼻內(nèi)注射(pipette)50μl,濃度為3mg/ml熒光素工作液3、注射入體內(nèi)10-20min(待光信號(hào)達(dá)到**強(qiáng)穩(wěn)定平臺(tái)期),再進(jìn)行成像分析中國(guó)澳門(mén)熒光染料高分子羰花青染料用作 Di 來(lái)標(biāo)記細(xì)胞、細(xì)胞器、脂質(zhì)體、病毒和脂蛋白。

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Cy5:激發(fā)波長(zhǎng)633/635nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)670nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL4通道檢測(cè);3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于APC。5)與單核和粒細(xì)胞非特異性結(jié)合多,易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

5、PE:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)575nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè);3)其熒光泯滅性強(qiáng),不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù),但適用于激光共聚焦顯微鏡技術(shù)。

6、PE-TR:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)615nm。1)在BeckmanCoulter流式細(xì)胞儀的FL3通道檢測(cè);2)可適用于小功率激光器的流式細(xì)胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細(xì)胞儀。

7、PE-AlexaFluor610:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)628nm。1)在BeckmanCoulter流式細(xì)胞儀的FL3通道檢測(cè);2)熒光強(qiáng)度高;3)可適用于小功率激光器的流式細(xì)胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細(xì)胞儀。

異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機(jī)熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)中。在495/517nm處,該染料會(huì)產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)與不同抗體結(jié)合,該基團(tuán)可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團(tuán)相結(jié)合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質(zhì)量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料,且其被當(dāng)成AlexaFluor®488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng),而該系統(tǒng)受藍(lán)色光譜中的光所激發(fā)。經(jīng)常與FITC同時(shí)使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸]。與FITC相反,TRITC并非熒光素,而是羅丹明家族的衍生物。羅丹明也具有一個(gè)大的共軛芳香電子系統(tǒng),正是該系統(tǒng)引發(fā)了它們的熒光行為。還有一點(diǎn)與FITC相反,TRITC(479g/mol)由比較**長(zhǎng)為550nm的綠色光譜中的光所激發(fā),它的比較大發(fā)射波長(zhǎng)為573nm。與蛋白質(zhì)(例如,抗體)結(jié)合也基于異硫氰酸鹽反應(yīng)基團(tuán)。Super Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)琥珀酰亞胺酯熒光染料。

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其他細(xì)胞結(jié)構(gòu)常用染料生物染料在細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組分鑒定中有著廣泛的應(yīng)用,除細(xì)胞膜研究外,我們經(jīng)常也會(huì)對(duì)一些其它細(xì)胞結(jié)構(gòu)及成分進(jìn)行探索,例如線(xiàn)粒體、溶酶體、蛋白質(zhì)、細(xì)胞核等,而對(duì)于不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu)有不同的染料進(jìn)行染色細(xì)胞染色神器DAPI+PhalloidinDAPI染色液(DAPIStainingSolution)常用于細(xì)胞核染色,可將細(xì)胞核染成藍(lán)色。鬼筆環(huán)肽(Phalloidin)是細(xì)胞骨架的染色神器,羅丹明標(biāo)記的Phalloidin(TRITC-Phalloidin)可將細(xì)胞染成橙紅色,DAPI與Phalloidin染色液是研究細(xì)胞形態(tài)變化時(shí)經(jīng)常用到的兩種共染的試劑,染色效果可見(jiàn)A1-E1用TRITC-鬼筆環(huán)肽(橙紅)染色的細(xì)胞骨架免疫熒光圖;A2-E2用DAPI(藍(lán)色)染色的細(xì)胞核免疫熒光圖;A3-E3合并的L929細(xì)胞免疫熒光染色圖。是S100A16過(guò)表達(dá)或下調(diào)前后PDAC細(xì)胞形態(tài)的變化。DiI(橙色熒光),DiO(綠色熒光),DiD(紅色熒光)和 DiR (深紅色熒光)對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行多色成像和流式分析。中國(guó)澳門(mén)熒光染料高分子

CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測(cè)和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標(biāo)記試劑。貴州熒光染料熒光素酶

常用抗體標(biāo)記熒光染料的特性及其應(yīng)用

1、FITC:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)525nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);3)可用于熒光顯微鏡技術(shù)4)熒光強(qiáng)度易受PH值影響,PH值降低時(shí)其熒光強(qiáng)度減弱。2、AlexaFluor488:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)519nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀:2)在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測(cè);3)具有超乎尋常的光穩(wěn)定性,非常適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)在較寬的PH值范圍內(nèi)保持穩(wěn)定(PH4~10)。5)南京星葉生物科技有限公司SuperFluor系列(效果同AlexaFluor系列)質(zhì)優(yōu)價(jià)廉,歡迎咨詢(xún)。3、Cy3:激發(fā)波長(zhǎng)488nm,比較大發(fā)射波長(zhǎng)570nm。1)其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氟離子激光器的流式細(xì)胞儀;2)在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測(cè):3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細(xì)胞術(shù),熒光強(qiáng)度低于PE。 貴州熒光染料熒光素酶