內(nèi)蒙古南京熒光染料

來源: 發(fā)布時間:2024-11-18

過標記——計算結(jié)果顯示每摩爾145,000MW的蛋白標記的熒光團大于10mol。雖然過標記的蛋白也可以使用,但可能會引起蛋白的聚集、降低抗體結(jié)合抗原的特異性,這些都會造成非特異性結(jié)合。過標記還會引起熒光淬滅??梢栽黾拥鞍谆驕p少反應(yīng)時間。3.未結(jié)合染料難以去除——盡管大部分時候用分離柱可以較好的純化蛋白偶聯(lián)物,但仍可能會有痕量的游離染料留在偶聯(lián)物溶液中,會使標記計算的值偏高??捎梅蛛x柱再次分離或透析去除。4.蛋白或蛋白偶聯(lián)物無法洗脫——不要再加緩沖液,只需再次離心一次或幾次。Super Flour 系列熒光探針,具有更強的熒光強度,更廣的pH應(yīng)用范圍(pH 4~10), 更好的抗淬滅性。內(nèi)蒙古南京熒光染料

內(nèi)蒙古南京熒光染料,熒光染料

細胞培養(yǎng)后,需要對其生長情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進行觀察。由于細胞小而復(fù)雜,若不借助適當?shù)氖侄?,難以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu),更難發(fā)現(xiàn)細胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前,已有多種研究細胞的技術(shù),從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡,從一般細胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細胞染色是研究細胞生物學(xué)特征的一種常用手段,然而,對于細胞實驗新手來說,想要獲得一張漂亮的細胞染色圖并不容易。染色試劑不會選、細胞染色不均勻、染色時切片脫落等都是很常見的問題。

細胞膜常用染料DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料(見表2),它們是一族親脂性的熒光染料,用于細胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。該系列染料進入細胞膜后,會在整個細胞膜上側(cè)向擴散,在比較好濃度時可以使整個細胞膜染色。其中DiD染料的染色效率高,染色均一,熒光不易猝滅,無明顯細胞毒性,且受自身熒光背景干擾小。目前DiD已成功應(yīng)用于多種細胞的體內(nèi)示蹤研究,如Treg細胞、間充質(zhì)干細胞、腫瘤細胞、造血干祖細胞等。 湖南熒光染料合成DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織,在小動物成像中用來示蹤。

內(nèi)蒙古南京熒光染料,熒光染料

Cy5:激發(fā)波長633/635nm,比較大發(fā)射波長670nm。1)其標記的抗體適用于所有配備633nm氟離子激光器的流式細胞儀;2)在流式細胞儀的FL4通道檢測;3)適用于熒光顯微鏡技術(shù);4)同樣為小分子染料,非常適合需小分子染料的流式細胞術(shù),熒光強度低于APC。5)與單核和粒細胞非特異性結(jié)合多,易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。

5、PE:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長575nm。1)其標記的抗體適用于所有配備488nm氯離子激光器的流式細胞儀:2)在流式細胞儀的FL2通道檢測;3)其熒光泯滅性強,不適用于傳統(tǒng)的熒光顯微鏡技術(shù),但適用于激光共聚焦顯微鏡技術(shù)。

6、PE-TR:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長615nm。1)在BeckmanCoulter流式細胞儀的FL3通道檢測;2)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。

7、PE-AlexaFluor610:激發(fā)波長488nm,比較大發(fā)射波長628nm。1)在BeckmanCoulter流式細胞儀的FL3通道檢測;2)熒光強度高;3)可適用于小功率激光器的流式細胞儀,也可使用于大功率激光器的大流式細胞儀。

本質(zhì)上,有機染料的特征在于源自在整個生色團上離域的光學(xué)躍遷或源自分子間電荷轉(zhuǎn)移躍遷(從激發(fā)電子態(tài)的分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移)的發(fā)射。在這里,表現(xiàn)出源自在整個生色團上離域的光學(xué)躍遷的發(fā)射的染料被稱為共振染料(介觀染料),而后者被稱為CT染料(電荷轉(zhuǎn)移染料)?;ㄇ?、羅丹明和熒光素是一些最常見的共振染料,其特點是窄的吸收和發(fā)射帶(略微結(jié)構(gòu)化),往往相互鏡像,以及小的、對溶劑極性不敏感的斯托克斯位移。另一方面,CT染料包括香豆素和丹磺酰熒光團等染料,其特點是與共振染料相比,吸收和發(fā)射帶結(jié)構(gòu)無結(jié)構(gòu),分離良好,以及更大的斯托克斯位移。同樣,與共振染料相比,CT染料具有更小的摩爾吸收系數(shù)和熒光量子產(chǎn)率。對于共振和CT熒光染料,在結(jié)構(gòu)-性質(zhì)關(guān)系眾所周知的情況下,可以通過精心設(shè)計的策略來微調(diào)光譜性質(zhì)。DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常見的細胞膜染料,它們是一族親脂性的熒光染料,用于細胞的形態(tài)學(xué)和結(jié)構(gòu)研究。

內(nèi)蒙古南京熒光染料,熒光染料

Hoechst33258是一種可以穿透細胞膜的藍色熒光染料,對細胞的毒性較低。用于細胞核染色時,推薦的Hoechst33258工作濃度為0.5-10μg/ml。儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。注意事項:Hoechst33258對人體有害,請注意適當防護。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液??篃晒獯銣绶馄?P0126)可以向碧云天訂購。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作注意事項:Hoechst33342對人體有一定刺激性,請注意適當防護。熒光染料都存在淬滅的問題,建議染色后盡量當天完成檢測。為減緩熒光淬滅可以使用抗熒光淬滅封片液。為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。D-熒光素鉀鹽熒光染料。黑龍江國產(chǎn)熒光染料

CY5熒光染料是一種被廣泛應(yīng)用于生物分子檢測和熒光成像等領(lǐng)域的高效、穩(wěn)定的熒光標記試劑。內(nèi)蒙古南京熒光染料

異硫氰酸熒光素(FITC)是一種有機熒光染料,目前,這種熒光染料仍用于免疫熒光和流式細胞術(shù)中。在495/517nm處,該染料會產(chǎn)生激發(fā)/發(fā)射峰值,并可借助異硫氰酸鹽反應(yīng)基團與不同抗體結(jié)合,該基團可以和蛋白質(zhì)上的氨基、巰基、咪唑、酪氨酰、羰基等基團相結(jié)合。而它的基本成分——熒光素,其摩爾質(zhì)量為332g/mol,常被用作熒光示蹤劑。FITC(389g/mol)是用于熒光顯微鏡技術(shù)的首批染料,且其被當成AlexaFluor®488等后續(xù)熒光染料的發(fā)端。該染料的熒光活性取決于它的大共軛芳香電子系統(tǒng),而該系統(tǒng)受藍色光譜中的光所激發(fā)。經(jīng)常與FITC同時使用的另一種染料是與其相似的TRITC[四甲基羅丹明-5(6)-異硫氰酸]。與FITC相反,TRITC并非熒光素,而是羅丹明家族的衍生物。羅丹明也具有一個大的共軛芳香電子系統(tǒng),正是該系統(tǒng)引發(fā)了它們的熒光行為。還有一點與FITC相反,TRITC(479g/mol)由比較**長為550nm的綠色光譜中的光所激發(fā),它的比較大發(fā)射波長為573nm。與蛋白質(zhì)(例如,抗體)結(jié)合也基于異硫氰酸鹽反應(yīng)基團。內(nèi)蒙古南京熒光染料