單克隆細(xì)胞株的篩選:如何獲得高表達(dá)或者干擾效率高的單克隆細(xì)胞株,是很多科研工作者比較頭疼的事情,往往單克隆細(xì)胞株的過表達(dá)或干擾效率比混合克隆差。在這里,作者想說混合克隆和單克隆各有優(yōu)缺點?;旌峡寺≈苽渲芷诙?,過表達(dá)和干擾效果往往也很好,但隨著傳代次數(shù)的增加,過...
CRISPR基因敲除穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù):隨著TALEN和Cas9/gRNA基因敲除系統(tǒng)的出現(xiàn),基因定點敲除的難度大幅下降。全新的技術(shù)將基因敲除從價格高昂,耗時漫長的ZNF系統(tǒng),逐漸變成簡便的研究工具。現(xiàn)在我們可提供Talen和Cas9/gRNA兩個系統(tǒng)的基因敲...
幾種慢性肝病(CLD),包括慢性病毒性肝炎、酒精性肝病和非酒精性脂肪肝/非酒精性脂肪性肝炎(NAFLD/NASH),引起肝細(xì)胞損傷和壞死,進(jìn)而引發(fā)炎癥和以細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)積累為特征的傷口愈合反應(yīng)。如果損傷是急性的或自限性的,傷口愈合反應(yīng)會迅速恢復(fù)正常組織穩(wěn)...
常見細(xì)胞株:AtT-20小鼠垂體瘁;AZ-521人胃ai細(xì)胞;B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞;A2780細(xì)胞[人卵巢ai細(xì)胞]ATCC細(xì)胞;B16BL6小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1鼠黑色素瘤細(xì)胞系;B16F1小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16F10小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細(xì)胞;A2...
腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類腦膜細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計的*適于其生長的培養(yǎng)基。包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激su、生長因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為重碳酸鹽,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中平衡后pH值為7.4。該培...
實驗室常用細(xì)胞株:A9 CRL-6319 小鼠 結(jié)締組織 成纖維細(xì)胞、貼壁 DMEM,10% FBS+;AR42J CRL-1492 大鼠 胰腺瘤 貼壁、上皮樣 Ham'sF-12K, 20%FBS;AtT-20 CCL-89 小鼠 垂體瘤 上皮細(xì)胞、貼壁 F...
中喬新舟代理美國sciencell人卵巢上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基,經(jīng)過技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化和長期測試,本產(chǎn)品可保持人卵巢上皮細(xì)胞良好的的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人卵巢上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人卵巢上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品*供進(jìn)一步科研使...
CRISPR基因敲除穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù):隨著TALEN和Cas9/gRNA基因敲除系統(tǒng)的出現(xiàn),基因定點敲除的難度大幅下降。全新的技術(shù)將基因敲除從價格高昂,耗時漫長的ZNF系統(tǒng),逐漸變成簡便的研究工具?,F(xiàn)在我們可提供Talen和Cas9/gRNA兩個系統(tǒng)的基因敲...
原代培養(yǎng):1.取出小鼠后瀝干酒精,放入超凈臺內(nèi),固定在泡沫板上。2.用鑷子提起皮膚,用解剖剪剪開皮膚一個橫切口,將皮膚向上撕開,然后剪開肌肉等,暴露出腹腔,在左側(cè)找到脾臟,用彎頭眼科鑷取出脾臟,置于無菌培養(yǎng)皿中。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次,...
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營...
文獻(xiàn)定義由新鮮組織制成的細(xì)胞培養(yǎng)物稱原代細(xì)胞,這種細(xì)胞經(jīng)初次傳代成功后的細(xì)胞稱做細(xì)胞系,可泛指一般可能傳代的細(xì)胞,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系(lineagesofcells)所組成,這種細(xì)胞世系含有多種細(xì)胞類型。若用胰蛋白酶等將原代細(xì)胞消解分散后,再培...
不管是國外還是國內(nèi)血清生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)都要求不得添加任何外源成分,以前美國某品牌就有前車之鑒,他們在血清中加入大量細(xì)胞因子和生長因子,導(dǎo)致細(xì)胞瘋長,但是做細(xì)胞功能性實驗,結(jié)果卻慘不忍睹。目前該品牌已經(jīng)被美國取締,但這種情況在非正規(guī)渠道胎牛血清身上屢禁不止。血清添加外源...
營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長的基礎(chǔ),營養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡,新生牛血清中所含大部分營養(yǎng)成分可以通過化學(xué)成分明確的營養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基,只需添加1%~5%新生牛血清,而對細(xì)胞生長、...
現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)基通常包含70至100種成分,數(shù)百種成分的選擇以及每種成分都可以從多種渠道來源獲得。這導(dǎo)致了錯綜復(fù)雜的供應(yīng)商網(wǎng)絡(luò)和可能的變異性??紤]到這種復(fù)雜性,我們需要從不同角度對培養(yǎng)基生產(chǎn)穩(wěn)定性進(jìn)行控制,并完善供應(yīng)管理網(wǎng)絡(luò)?;赟AFC的經(jīng)驗,我們將從6個...
副基底層細(xì)胞:圓形,大小約為30μm,胞漿濃染,偏綠色,核居中,核漿比較高。副基底層細(xì)胞不是在每一個宮頸樣本中都是可見的,這樣的細(xì)胞層次較深,如果是些年輕女性,沒有宮頸糜爛,沒有鱗狀上皮缺損的時候,通常見不到這類細(xì)胞。有時在一張片子中,見到少數(shù)類似形態(tài)的細(xì)...
合成培養(yǎng)基是根據(jù)天然培養(yǎng)基的成分,用化學(xué)物質(zhì)模擬合成、人工設(shè)計、配制的培養(yǎng)基。*早開發(fā)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(minimal essential medium, MEM),其本質(zhì)為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養(yǎng)物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎(chǔ)上,DMEM...
別小看細(xì)胞培養(yǎng),這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問。1.怎樣查到一個特定細(xì)胞株的相關(guān)知識和培養(yǎng)條件?ATCC(AmericanTypeCultureCollection)收集了絕大多數(shù)細(xì)胞的詳細(xì)資料。打開ATCC網(wǎng)頁的Cellsandhybridomas鏈接,輸入...
培養(yǎng)基:原代細(xì)胞專業(yè)使用低血清、無血清、無異源蛋白無動物成分培養(yǎng)基。細(xì)胞培養(yǎng)試劑:胎牛血清、原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒、細(xì)胞實驗檢測試劑盒、細(xì)胞生長因子、ELISA試劑盒、定量PCR芯片試劑盒、DNA/RNA及細(xì)胞裂解物等。細(xì)胞系(株):種類豐富(1000余種),已通...
原代細(xì)胞培養(yǎng),也稱初代培養(yǎng),是從供體取得組織細(xì)胞后在體外進(jìn)行的培養(yǎng)。方法包括組織塊培養(yǎng)法,消化培養(yǎng)法,培養(yǎng)法和懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法。注意事項:1、組織塊培養(yǎng)法:(1)剛接種后,組織塊粘附不牢固,觀察和轉(zhuǎn)移過程中動作要輕,以防引起液體振蕩,使組織塊漂起(2)培養(yǎng)初期,...
動物培養(yǎng)基內(nèi)主要的氮源是各種的氨基酸,幾乎所有的培養(yǎng)基都含有全部的必需氨基酸,根據(jù)需要也會添加適量的非必需氨基酸。培養(yǎng)基內(nèi)氨基酸的種類及含量,會根據(jù)項目的變化而進(jìn)行調(diào)整,需要根據(jù)特定的細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)基的篩選和優(yōu)化。為了維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài),需要在培養(yǎng)基內(nèi)...
利用冷卻水夾套進(jìn)行降溫是傳統(tǒng)降溫方式,但由于無法接觸研磨的溫度中心,會導(dǎo)致物料在內(nèi)部高溫的部位發(fā)生氧化等化學(xué)反應(yīng),甚至培養(yǎng)基粉末顏色會發(fā)生肉眼可見的加深。因此默克在干粉研磨工藝中通常采用液氮揮發(fā)出的冷卻氮?dú)怆S物料一起進(jìn)入研磨過程進(jìn)行冷卻,效果,產(chǎn)品顏色淺淡...
測定培養(yǎng)基PH的準(zhǔn)確的方法是使用PH計。使用前必須用已知PH的(通常PH 為4?7)標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行校準(zhǔn)。將PH計的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養(yǎng)基中,就可以從PH計的刻度讀出培養(yǎng)基的PH。每個生產(chǎn)廠商對每種不同PH計都提供有詳細(xì)的操作說明。配制培養(yǎng)基...
常見細(xì)胞株:293TN人胚腎細(xì)胞--用于慢病毒包裝;A2780細(xì)胞[人卵a(bǔ)i細(xì)胞]ATCC細(xì)胞;2B4人前列腺ai細(xì)胞;2BS人胚肺成纖維樣細(xì)胞;2V6.11人胚腎細(xì)胞;311果蠅胚胎細(xì)胞;A2780細(xì)胞[人卵巢ai細(xì)胞];ATCC細(xì)胞;351雜交瘤細(xì)胞抗;C...
微生物學(xué)研究需要能在實驗室提供各種不同種類的細(xì)菌、酵母或病毒。打個比方,諸如發(fā)酵、蛋白質(zhì)和疫苗生產(chǎn)的大規(guī)模過程中也是需要大量處于生理活性狀態(tài)的細(xì)菌。因此,要針對各種應(yīng)用需要有能提供適當(dāng)?shù)纳h(huán)境并保持微生物所有特征的合適的營養(yǎng)培養(yǎng)基。任何微生物培養(yǎng)基都應(yīng)該...
首先消毒雙手和超凈臺。取約10ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基放于15毫升離心管中。配置細(xì)胞凍存液:凍存液應(yīng)該提前配制,置于室溫備用,防止臨時配制產(chǎn)生的熱量損傷細(xì)胞,按無血清培養(yǎng)基比血清比DMSO=7:2:1的比例配置細(xì)胞凍存液,其中加大凍存液中血清的比例對于保...
探討胚胎發(fā)育的調(diào)控機(jī)制:發(fā)育生物學(xué)是生命科學(xué)的前沿領(lǐng)域,在較近幾十年里,對發(fā)育生物學(xué)的某些基礎(chǔ)領(lǐng)域有了較為深入的認(rèn)識。但是發(fā)育生物學(xué)領(lǐng)域依然存在許多未解的問題,例如,一個單細(xì)胞——受精卵細(xì)胞是如何發(fā)育成復(fù)雜的組織、器臟、系統(tǒng)乃至完整的有機(jī)個體?生命比較大的奧秘...
細(xì)胞復(fù)蘇注意事項1、整個復(fù)蘇過程要盡量快,溶解時間太長可能影響復(fù)蘇效果;2、已溶解的凍存細(xì)胞盡量短時間的在常溫存放,盡快稀釋或者離心去除DMSO;3、由于“化冰”這一步里凍存管與水溫差太大,尤其是液氮里拿出來的凍存管,放到水里可能會造成翻江倒海的既...
對于人類腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細(xì)胞系與細(xì)胞株區(qū)別:細(xì)胞株:原代培養(yǎng)的細(xì)胞一般傳至10代左右就不容易傳下去了,細(xì)胞的生長就會出現(xiàn)停滯,大部分細(xì)胞衰老死亡。但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)”而繼續(xù)傳下去,這些存活...
目前,NAFLD動物模型和細(xì)胞模型仍然是研究NAFLD發(fā)病機(jī)制及藥物防治的重要手段。動物模型雖然能很好地模擬體內(nèi)環(huán)境,但是存在造模周期長、個體差異大、實驗結(jié)果難以控制等問題,而細(xì)胞模型個體差異小、影響因素較少、實驗條件可控性強(qiáng)[8-11]。鑒于細(xì)胞...
胎牛血清功能——牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量比較大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂...