原代細(xì)胞是出了名的難養(yǎng)，對(duì)培養(yǎng)環(huán)境和實(shí)驗(yàn)操作的要求更苛刻。原代細(xì)胞在體外通常只能傳代少數(shù)幾次，某些原代細(xì)胞（如神經(jīng)元細(xì)胞）甚至無(wú)法進(jìn)行傳代。對(duì)于研究人員來(lái)說(shuō)，如何才能經(jīng)濟(jì)高效地培養(yǎng)好原代細(xì)胞，并圍繞這有限幾次傳代的細(xì)胞設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，是更大的一個(gè)挑戰(zhàn)。原...

不能用手觸及已消毒器皿瓶口、瓶塞內(nèi)部，吸管前部等所有可能與細(xì)胞接觸的部分，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。開啟、關(guān)閉長(zhǎng)有細(xì)胞的培養(yǎng)瓶時(shí)，火焰滅菌時(shí)間要短。防止因溫度過(guò)高燒死細(xì)胞。換液時(shí)傾倒廢液，瓶口不能接觸廢液缸，速度不能過(guò)快，防止廢液四濺...

CRISPR基因敲除穩(wěn)定細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù)：隨著TALEN和Cas9/gRNA基因敲除系統(tǒng)的出現(xiàn)，基因定點(diǎn)敲除的難度大幅下降。全新的技術(shù)將基因敲除從價(jià)格高昂，耗時(shí)漫長(zhǎng)的ZNF系統(tǒng)，逐漸變成簡(jiǎn)便的研究工具?，F(xiàn)在我們可提供Talen和Cas9/gRNA兩個(gè)系統(tǒng)的基因敲...

這篇研究報(bào)告中，研究人員將四種類型人類細(xì)胞注射到小鼠的大腦中，包括間質(zhì)干細(xì)胞，對(duì)于每一種類型的細(xì)胞而言，研究人員共能注射30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。隨后研究人員利用MRI來(lái)追蹤在兩周內(nèi)所發(fā)現(xiàn)的注射細(xì)胞群體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細(xì)胞的MRI信號(hào)要比其它三種注射的細(xì)胞類型高出大約...

簡(jiǎn)單的可以這么認(rèn)為，就是說(shuō)呢，生長(zhǎng)因子進(jìn)入人體以后，它不光刺激普通的細(xì)胞，它也刺激一種細(xì)胞，演變?yōu)榉置诩?xì)胞，而且這個(gè)分泌細(xì)胞又可以分泌生長(zhǎng)因子，所以它會(huì)源源不斷的造成生長(zhǎng)因子產(chǎn)生，刺激到組織的生長(zhǎng)。但是這只是一種理論上的推測(cè)啊。不過(guò)它能更好的解釋打...

疫區(qū)來(lái)源的胎牛血清受制于血源地和集血技術(shù)，很多都攜帶有生物學(xué)污染，如支原體、噬菌體、病毒、原蟲等。這對(duì)實(shí)驗(yàn)室和操作人員的安全是重大的隱患，對(duì)全國(guó)廣大人民**也是不容忽視的潛在危險(xiǎn)！國(guó)內(nèi)官方對(duì)這方面有明確解答（以下摘自查處非法入境胎牛血清的官方公告）：“未經(jīng)檢疫...

肝臟原位灌注法：（為分離肝細(xì)胞的經(jīng)典方法）1，在38度-39度的水浴槽中預(yù)熱hepes緩沖液和膠原酶液，使其在肝內(nèi)達(dá)到37度。2，給大鼠（180-200g）腹腔注射巴比妥鈉100ul/100g，從古靜脈注射肝素1000u，打開腹腔，在門靜脈的肝外5...

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基是專門為正常人類成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)設(shè)計(jì)的*適于其生長(zhǎng)的培養(yǎng)基。它是經(jīng)滅菌的液體培養(yǎng)基，包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無(wú)機(jī)化合物、激su、生長(zhǎng)因子、微量礦物質(zhì)和低濃度胎牛血清(2%)。該培養(yǎng)基緩沖體系為HEPES和重碳酸鹽，在含5%CO2...

原代培養(yǎng)就是提取的細(xì)胞體外次培養(yǎng)。，當(dāng)原代培養(yǎng)成功以后，隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)和細(xì)胞不斷分裂，一則細(xì)胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長(zhǎng)速度減慢甚至停止；另一方面也會(huì)因營(yíng)養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長(zhǎng)或發(fā)生中毒。此時(shí)就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的...

胎牛血清是一種外觀呈黃色無(wú)溶血無(wú)異物，粘稠的液體，它取自于剖腹產(chǎn)的胎牛，胎牛血清品質(zhì)是比較高的，因?yàn)樗麤](méi)有接觸到外界，血清中所含有的抗體補(bǔ)體對(duì)細(xì)胞有害成分也比較少。它能夠維持細(xì)胞指數(shù)的正常生長(zhǎng)素，提供蛋白質(zhì)，識(shí)別維生素之類，有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱...

胎牛血清儲(chǔ)存：-10℃，避光 恒溫冰箱；運(yùn)輸：干冰。高質(zhì)量澳大利亞胎牛血清和小牛血清現(xiàn)貨供應(yīng)——牛血清由于包含豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，通常被添加到細(xì)胞培養(yǎng)液中，用于促進(jìn)和維持脊椎動(dòng)物、哺乳動(dòng)物、昆蟲及其他物種細(xì)胞的生長(zhǎng)。牛血清的來(lái)源地很多，其中澳大利亞來(lái)源的牛血清被公...

原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基由補(bǔ)充了適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的基礎(chǔ)培養(yǎng)基組成。細(xì)胞在細(xì)胞培養(yǎng)箱中生長(zhǎng)并維持在適當(dāng)?shù)臏囟群突旌蠚怏w中（對(duì)于哺乳動(dòng)物細(xì)胞，通常為37°C，5％CO2）。培養(yǎng)條件根據(jù)細(xì)胞類型而廣變化。生長(zhǎng)培養(yǎng)基的pH，葡萄糖濃度，生長(zhǎng)因子和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的存在...

Autotaxin(ATX)是一種分泌型溶血磷脂酶D，可催化溶血磷脂酰膽堿(LPC)水解為溶血磷脂酸(LPA)，這是一種多效性生長(zhǎng)因子樣磷脂。LPA通過(guò)其G蛋白偶聯(lián)受體(GPCRs;LPAR1-6)在幾乎所有細(xì)胞類型中具有多種作用，表現(xiàn)出重疊的特異...

細(xì)胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，則需要做再培養(yǎng)，即將培養(yǎng)的細(xì)胞分散后，從一個(gè)容器以1：2或其他比率轉(zhuǎn)移到另一個(gè)或幾個(gè)容器中擴(kuò)大培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的累積次數(shù)就是...

干細(xì)胞鑒別方法：盡管許多組織中都存在干細(xì)胞，但其數(shù)量很少，而且在顯微鏡下時(shí)，無(wú)法將它們與這些組織中的其他細(xì)胞清楚區(qū)分。因此，如何找到一種簡(jiǎn)單有效的方法，科學(xué)、準(zhǔn)確地區(qū)分這類稀少的細(xì)胞，一直是科學(xué)家們不斷探索的課題。過(guò)去人們普遍采用的干細(xì)胞鑒別方法主要有以下兩種...

細(xì)胞培養(yǎng)是生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究常用的手段之一，可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取組織或的一部分進(jìn)行培養(yǎng)，也稱初代培養(yǎng)。嚴(yán)格地說(shuō)即從體內(nèi)取出組織接種培養(yǎng)到次傳代階段，但實(shí)際上，通常把代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。一般持...

這篇研究報(bào)告中，研究人員將四種類型人類細(xì)胞注射到小鼠的大腦中，包括間質(zhì)干細(xì)胞，對(duì)于每一種類型的細(xì)胞而言，研究人員共能注射30萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。隨后研究人員利用MRI來(lái)追蹤在兩周內(nèi)所發(fā)現(xiàn)的注射細(xì)胞群體。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，間充質(zhì)干細(xì)胞的MRI信號(hào)要比其它三種注射的細(xì)胞類型高出大約...

細(xì)胞株是培養(yǎng)十代以內(nèi)的細(xì)胞，細(xì)胞系是培養(yǎng)50代以內(nèi)的細(xì)胞，而腫瘤細(xì)胞，可以簡(jiǎn)單的理解為病細(xì)胞。那么請(qǐng)看生物必修一然后一章：病細(xì)胞是正常細(xì)胞的原病基因或者抑病基因發(fā)生突變產(chǎn)生的可以無(wú)限增殖，表面糖蛋白減少易轉(zhuǎn)移的一類細(xì)胞。注意：只要細(xì)胞原病基因或者抑病基因發(fā)生突...

慢病毒染上目的細(xì)胞：通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)確定了慢病毒染上目的細(xì)胞的比較好MOI，接下來(lái)就可以進(jìn)行穩(wěn)定細(xì)胞株的篩選工作了。將目的細(xì)胞接種24孔板，控制好細(xì)胞密度，貼壁后大約為30%-40%左右的密度；細(xì)胞過(guò)夜培養(yǎng)后，按比較好MOI加入病毒，同時(shí)加入終濃度為8μg/mlp...

現(xiàn)在您知道了如何傳代細(xì)胞，讓我們?cè)賮?lái)看看傳代的一些不同應(yīng)用。前面已經(jīng)提到，人胚胎干細(xì)胞是一類必須傳代的細(xì)胞。它們通常與小鼠成纖維細(xì)胞MEF共培養(yǎng)，后者能提供幫助干細(xì)胞保持其多能性的因子。生長(zhǎng)于飼養(yǎng)細(xì)胞上的干細(xì)胞到了合適的發(fā)育階段時(shí)需挑出來(lái)?？捎梦⑿?..

常見(jiàn)細(xì)胞株：4179長(zhǎng)尾綠猴胚胎細(xì)胞；4647長(zhǎng)尾綠猴腎細(xì)胞ATCC細(xì)胞；351雜交瘤細(xì)胞抗；CD23A0人卵巢ai細(xì)胞；A2780細(xì)胞[人卵巢ai細(xì)胞]ATCC細(xì)胞；3T3小鼠胚胎瘤成纖維細(xì)胞；3T3-E1鼠胚成骨細(xì)胞；3T3-L1小鼠脂肪細(xì)胞；3T3-Sw...

細(xì)胞培養(yǎng)可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。直接從體內(nèi)獲取的組織細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)為原代培養(yǎng)；當(dāng)原代培養(yǎng)的細(xì)胞增殖達(dá)到一定密度后，則需要做再培養(yǎng)，即將培養(yǎng)的細(xì)胞分散后，從一個(gè)容器以1：2或其他比率轉(zhuǎn)移到另一個(gè)或幾個(gè)容器中擴(kuò)大培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)，傳代培養(yǎng)的累積次數(shù)就是...

細(xì)胞一般儲(chǔ)存在液氮中，溫度達(dá)-196℃，理論上儲(chǔ)存時(shí)間是無(wú)限的。細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以比較大限度的保存細(xì)胞活力。細(xì)胞復(fù)蘇就是要把原本冷凍保存(凍存)著的細(xì)胞恢復(fù)到一般的生長(zhǎng)狀態(tài)，現(xiàn)在我們來(lái)看看原代細(xì)胞的復(fù)蘇步驟。一、檢...

傳代培養(yǎng)的細(xì)胞是細(xì)胞系；細(xì)胞株就是從細(xì)胞系篩選出來(lái)的有特殊屬性的比如無(wú)線增值的。細(xì)胞株(CellStrain)：通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株(CellStrain)，也就是說(shuō)，細(xì)胞株是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或...

零售EGF產(chǎn)品的主要障礙是它們的貨架期過(guò)短。在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下，平均3個(gè)月的穩(wěn)定期使EGF制劑不適合大規(guī)模的商業(yè)批量使用。在室溫下存放一周對(duì)EGF的穩(wěn)定性影響不大，但產(chǎn)品的長(zhǎng)期穩(wěn)定性需要溫度監(jiān)控。冷藏的儲(chǔ)存方式可以將保質(zhì)期從1個(gè)月延長(zhǎng)到3個(gè)月。若果該產(chǎn)品在冷凍...

原代肝細(xì)胞屬于高度分化的細(xì)胞，對(duì)體外培養(yǎng)條件的要求比傳代細(xì)胞高，其在體外存活時(shí)間也比傳代細(xì)胞短，采用單層膠原培養(yǎng)法進(jìn)行體外培養(yǎng)的原代肝細(xì)胞存活時(shí)間為1周左右[25]。本實(shí)驗(yàn)是在Seglen兩步灌流法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，結(jié)合逆向灌流、多次低速離心等方法成功分離獲取...

是一種可對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑，常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。碘化丙啶是一種核酸染料呈紅色，它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜，但凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞由于細(xì)胞通透性的增加，PI能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅，用PI 單一染色觀測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞，只能表示細(xì)胞的壞死情況，而不是...

營(yíng)養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基是維持細(xì)胞活性及高密度生長(zhǎng)的基礎(chǔ)，營(yíng)養(yǎng)缺乏容易引起細(xì)胞凋亡，新生牛血清中所含大部分營(yíng)養(yǎng)成分可以通過(guò)化學(xué)成分明確的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如氨基酸維生素等成分組合取代。低血清培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分大優(yōu)于基礎(chǔ)培養(yǎng)基，只需添加1％～5％新生牛血清，而對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、...

科學(xué)家們?cè)诮?jīng)過(guò)長(zhǎng)期的探索和努力之后，較終把目光落在干細(xì)胞上，生命體是通過(guò)干細(xì)胞的分裂來(lái)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞更新及保證持續(xù)增長(zhǎng)，干細(xì)胞的研究與應(yīng)用將有可能使人類實(shí)現(xiàn)完美修復(fù)損傷組織和器臟的夢(mèng)想。多年來(lái)科學(xué)家們一直致力于尋找利用干細(xì)胞的復(fù)制和分化來(lái)取代受損細(xì)胞或組織的方法。這...

這項(xiàng)研究中，研究者Bulte及其同事發(fā)現(xiàn)，這些間充質(zhì)干細(xì)胞含有高水平的甘露糖（mannose），其與葡萄糖相似，且能利用基于MRI的標(biāo)準(zhǔn)成像方法輕松成功地被發(fā)現(xiàn)；研究者表示，特定的腫瘤細(xì)胞會(huì)失去大量糖分子，這或許就能被MRI機(jī)器很容易就檢測(cè)到，此后研究人員便有...