金華正規(guī)RNA提取試劑推薦廠家

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2023-11-30

超快速多糖多酚植物RNA提取試劑盒優(yōu)勢(shì):1、快速:多糖多酚植物RNA提取試劑盒提取RNA的整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作步驟簡(jiǎn)化快捷從時(shí)間因素考量上較大限度的防止RNA在提取中的降解(一般樣品十多分鐘就能完一個(gè)樣RNA的提取,較大縮短了一般試劑盒提取所需要的半小時(shí)甚至更長(zhǎng)的時(shí)間)。2、高產(chǎn)量:多糖多酚植物RNA提取試劑盒擁有較強(qiáng)細(xì)胞裂解液,保證后續(xù)RNA提取的得率。(能完全通過(guò)化學(xué)方法徹底裂解細(xì)胞讓RNA釋放完整,并且有效成分能壓制內(nèi)源RNA酶的降解作用)。3、高純度:試劑盒的進(jìn)口吸附柱具有的專一吸附特性和強(qiáng)吸附力。三管齊下保證所提取RNA的產(chǎn)量和純度,前期得到的高質(zhì)量RNA才能保證后續(xù)實(shí)驗(yàn)成功,尤其是對(duì)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)等??俁NA提取試劑:自備新開(kāi)封或?qū)iT氯仿,異丙醇,75%乙醇,DEPC處理水。金華正規(guī)RNA提取試劑推薦廠家

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昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:RNA完整性的電泳檢測(cè):如果需要做Northern雜交,強(qiáng)烈建議用戶使用甲醛變性膠進(jìn)行RNA電泳,因?yàn)榉亲冃阅z不能分離所有的RNA分子。注意:大部分昆蟲的28SRNA被切割成兩個(gè)小的片段,彼此用氫鍵相連,所以在甲醛變性膠中,沒(méi)有28S帶出現(xiàn)。RNA產(chǎn)量產(chǎn)率測(cè)定:將5~10μLRNA溶于TE緩沖液中(pH7.5~8.2之間)檢測(cè)其在OD260的光吸收。通過(guò)光吸收可以得出RNA濃度(1OD260的RNA=40μg/mL),進(jìn)而計(jì)算出RNA的產(chǎn)量(濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA產(chǎn)量/組織用量)。RNA純度測(cè)定:無(wú)污染的總RNA的OD260/OD280一般在1.8~2.1之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān)),高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染,但一般不影響RT-PCR等反應(yīng)。溫州天津RNA提取試劑與DNA不同,RNA一般為單鏈長(zhǎng)分子,不形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。

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經(jīng)典Trizol法并不能獲得總RNA:這個(gè)事實(shí)可能會(huì)刷不少新手甚至老手的三觀,但確有實(shí)驗(yàn)支持:經(jīng)典Trizol法會(huì)選擇性丟失低GC比的miRNA。這一點(diǎn),源自一則作者自撤稿的故事。V.NarryKim是韓國(guó)鼎鼎大名的美女科學(xué)家,專做RNA相關(guān)的研究,包括miRNA。幾年前她們組發(fā)現(xiàn)一個(gè)奇怪的“現(xiàn)象”,即貼壁細(xì)胞在消化之后,會(huì)有一些miRNA的豐度突然降低,看起來(lái)好像是被快速“降解”掉了,并據(jù)此寫了一篇文章發(fā)到MolecularCell上。但很快她們就發(fā)現(xiàn),這個(gè)“現(xiàn)象”難以重復(fù):如果用Trizol做實(shí)驗(yàn),就一定是陽(yáng)性結(jié)果,而用試劑盒提RNA,就重復(fù)不出來(lái)。難道是號(hào)稱能提總RNA的Trizol方案出了問(wèn)題?確實(shí)如此。經(jīng)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),經(jīng)典的Trizol方案會(huì)使得低GC比的miRNA丟失。

核糖核酸RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息傳遞過(guò)程中的橋梁。tRNA的功能是攜帶符合要求的氨基酸,以mRNA為模板,合成蛋白質(zhì)。核糖核酸由至少幾十個(gè)核糖核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵連接而成的一類核酸,因含核糖而得名,簡(jiǎn)稱RNA。RNA普遍存在于動(dòng)物、植物、微生物及某些病菌和噬菌體內(nèi)。RNA和蛋白質(zhì)生物合成有密切的關(guān)系。RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過(guò)程中的橋梁。在此過(guò)程中,轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(TransferRNA,tRNA)是攜帶與三聯(lián)體密碼子對(duì)應(yīng)的氨基酸殘基與正在進(jìn)行翻譯的mRNA結(jié)合,而后核糖體RNA(RibosomalRNA,rRNA)將各個(gè)氨基酸殘基通過(guò)肽鍵連接成肽鏈進(jìn)而構(gòu)成蛋白質(zhì)分子??俁NA提取試劑:適用于植物材料、各種微生物及培養(yǎng)細(xì)胞等樣品中提取總RNA。

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RNA提取:預(yù)備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無(wú)菌塑料制品。已標(biāo)明RNase-free的塑料制品,如沒(méi)有開(kāi)封使用過(guò),通常不必再處理。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強(qiáng)的劇毒物,須在通風(fēng)櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個(gè)可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通風(fēng)柜中37℃或室溫下處理過(guò)夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,將裝有DEPC-H2O處理過(guò)的塑料制品的容器以鋁箔封口,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥,置潔凈處備用。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時(shí)以上。RNA提取試劑注意事項(xiàng):有機(jī)相用異丙醇沉淀可回收蛋白。長(zhǎng)沙正規(guī)RNA提取試劑直銷價(jià)

在裂解液上游加入酶裂解步驟(如蛋白酶 K、溶菌酶等)。金華正規(guī)RNA提取試劑推薦廠家

昆蟲RNA柱式提取試劑盒使用方法:將一半的溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。將剩下的一半溶液轉(zhuǎn)移到同一離心吸附柱中,12000rmp室溫離心半分鐘,棄穿透液。加0.7mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。加0.3mL通用洗柱液,室溫12000rmp離心半分鐘,棄穿透液。此步可以省略。室溫12000rmp離心半分鐘。此步十分重要,否則殘留的乙醇會(huì)影響RNA的使用。將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到RNase-free收集管中,加入50~100μLRNA洗脫液,室溫放置1~2分鐘。12000rmp室溫離心半分鐘,離心管中溶液即為RNA樣品,可以立即使用或存放于-80℃待用。金華正規(guī)RNA提取試劑推薦廠家